Lineweaver-Burke -kaavio

Lineweaver-Burk-kaavio , myös Lineweaver-Burk tai käänteinen kaksoiskaavio , on graafinen menetelmä Lineweaver-Burk-yhtälön esittämiseksi, joka kuvaa entsyymin kinetiikkaa. Käytetään biokemiassa ja entsymologiassa. Hans Lineweaver ja Dean Burke kuvasivat menetelmän ensimmäisen kerran vuonna 1934 [1] .

Kätevämpään kokeellisen datan graafisen esityksen saamiseksi Lineweaver ja Burke muuttivat Briggs-Haldane-yhtälön (Michaelis-Menten-yhtälön johtaminen) kaksoiskäänteislukujen menetelmän mukaan perustuen periaatteeseen, että jos minkä tahansa kahden välillä on yhtäläisyys. määrät, silloin myös käänteisluvut ovat yhtä suuret.

Lineweaver-Burk-kaavio on oikea, kun entsyymikinetiikka noudattaa ihanteellisten toisen asteen reaktioiden kinetiikkaa, mutta epälineaarinen regressio on välttämätön järjestelmille, jotka eivät toimi ihanteellisesti. Kaksoiskäänteiskaavio vääristää datavirheiden kuviota, eikä se siksi ole tarkin työkalu entsyymin kineettisten parametrien määrittämiseen. Parametrien laskemiseen käytetään yleensä Michaelis-Menten-yhtälön epälineaarista regressiota tai vaihtoehtoisia lineaarisia muotoja , kuten Haynes-Wulff- tai Eady-Hofstey-kaavio [2] .

Johtopäätös

Lineweaver-Burk-yhtälön graafinen esitys on suora viiva, joka vastaa muotoa: y = ax + b. Muunnetaan Michaelis-Menten-yhtälö lineaariseen muotoon arvojen V max ja K m helpompaa laskemista varten . Erityisesti jos:

sitten

jota kutsutaan Lineweaver-Burk yhtälöksi.

Nyt tämän yhtälön mukaisesti voit rakentaa graafin koordinaatteihin 1/V (y) pisteestä 1/[S] (x) [3] , samalla kun saamme suoran, kaltevuuskulman tangentin, joka olla yhtä suuri kuin arvo K m /V max ; y-akselista suoralla viivalla leikattu segmentti on 1/V max (maksiminopeuden käänteisluku). Jos jatkamme suoraa y-akselin yli, niin Michaelis-vakion käänteislukua -1 / K m vastaava segmentti leikataan abskissalta pois . Siten Km:n arvo voidaan laskea suoran kaltevuuden tiedoista ja ordinaatta-akselilta poikki janan pituudesta tai abskissa-akselista negatiivisen alueen pituudesta. arvot.

Muistiinpanot

1. ↑ Lineweaver, Hans; Burk, Dean (maaliskuu 1934). "Entsyymien dissosiaatiovakioiden määritys" . American Chemical Societyn lehti ]. 56 (3): 658-666. DOI : 10.1021/ja01318a036 . ISSN  0002-7863 . Arkistoitu alkuperäisestä 2021-09-16 . Haettu 2021-10-04 . Käytöstä poistettu parametri |deadlink=( ohje )
2. ↑ Greco, WR; Hakala, M.T. (1979-12-10). "Menetelmien arviointi tiukasti sitoutuvien entsyymi-inhibiittoreiden dissosiaatiovakion arvioimiseksi". The Journal of Biological Chemistry . 254 (23): 12104-12109. DOI : 10.1016/S0021-9258(19)86435-9 . ISSN  0021-9258 . PMID  500698 .
3. ↑ Christensen, Siegfried B.; DeWolf, Walter E.; Ryan, M. Dominic & Torphy, Theodore J. (1996-01-01), Schudt, Christian; Dent, Gordon & Rabe, Klaus F., toim., 13 - Molecular Aspects of Inhibitor Interaction with PDE4 , Handbook of Immunopharmacology, San Diego: Academic Press, s. 185–207, ISBN 978-0-12-210720-7 , doi : 10.1016/b978-012210720-7/50015-0 , < http://www.sciencedirect.com/science/article/pii > 5007081200708 Haettu 15. joulukuuta 2020. Arkistoitu 4. lokakuuta 2021 Wayback Machinessa