TIMAC - Testisarja Escherichia coli -ryhmän bakteerien yksittäisten sukujen erottamiseksi
TIMAC -kompleksissa lämpötila- ja sitraattitestit ovat tärkeimmät, stabiiliimmat, joiden avulla voidaan erottaa ulosteperäiset E. coli -ryhmän bakteerit ulkoympäristössä elävistä E. coli -ryhmän bakteereista .
Kykyä fermentoida hiilihydraatteja ( laktoosi , glukoosi , mannitoli ) ihmisen kehon lämpötilaa korkeammassa viljelylämpötilassa kutsutaan lämpötilatestiksi . Escherichian erottamiseksi Citrobacterista ja Enterobacterista ehdotettiin viljelylämpötilaksi 43-44 °C. Escherichialle lämpötilatesti on positiivinen, eli ne pystyvät fermentoimaan hiilihydraatteja 43-44 °C:ssa, kun taas useimmat bakteerit suvuilla Citrobacter ja Enterobacter ei ole tätä kykyä. Lämpötilatestin määrittää erikoisaineilla Eikman , Kessler , Boulij .
Kyky tuottaa indolia on luontaista Escherichialle ; Citrobacter- ja Enterobacter -suvun bakteerit eivät muodosta indolia. Ihmisen suolesta eristetyt E. coli -kannat muodostivat indolia 90,1-98,6 %:ssa tapauksista.
Reaktio koostuu hapon muodostumisen intensiteetin määrittämisestä hiilihydraatin käymisen aikana mikrobilla. Reaktio suoritetaan seuraavasti. Muutama tippa metyylipunaa lisätään viljelmään (3-5 päivää vanha), jota on kasvatettu Clarkin alustalla. pH : ssa 5,0 ja sen alapuolella indikaattori muuttuu vaaleankeltaisesta punaiseksi, mikä osoittaa vahvan hapon muodostumisen. E. coli ja Citr. coli citrovorum antaa elatusaineelle punaisen värin, Ent aerogenes - keltaisen. pH 5:n yläpuolella elatusaine pysyy vaaleankeltaisena.
Aromaattinen aine - asetyylimetyylikarbinoli (asetoiini) muoto Ent. aerogeenit. E. coli ja Citr. coli citrovorum -bakteerilla ei ole tätä kykyä. Reaktion aikaansaamiseksi sama tilavuus 40-prosenttista KOH - liuosta lisätään 5 ml:aan 4-5 päivää vanhaa viljelmää, jota on kasvatettu peptonivedellä ja glukoosilla tai Clarkin alustalla . Asetyylimetyylikarbinolin läsnä ollessa väliaine muuttuu vaaleanpunaiseksi.
Mikro-organismin kykyä absorboida sitruunahappoa tai sen suoloja ainoana hiilen lähteenä kutsutaan sitraattitestiksi. Tutkittu viljelmä kylvetään sitraattisynteettiselle alustalle (neste Coser tai kiinteä Simmons). Citrobacter ja Enterobacter kasvavat sitraattialustalla, ja niitä kutsutaan sitraattipositiivisiksi tai sitraattia assimiloiviksi bakteereiksi, kun taas Escherichia ei kasva näissä elatusaineissa ja niitä kutsutaan sitraattinegatiivisiksi.
Suurin osa Enterobacteriaceae -suvun kykyä fermentoida laktoosia jakaa . Escherichia -suvun edustajat (lukuun ottamatta E. colin laktoosinegatiivisia variantteja) fermentoivat laktoosia, Citrobacter ja Enterobacter fermentoivat laktoosia epäjohdonmukaisesti. Tämän kompleksin ominaisuudet määräävät, kuuluvatko Escherichia coli -ryhmän bakteerit johonkin kolmesta suvusta: Escherichia, Citrobacter ja Enterobacter.