Maaperän mikrobiologinen analyysi - maaperän analyysi , joka suoritetaan bakteerien esiintymisen maaperässä, niiden tyypin ja lukumäärän määrittämiseksi.
Maaperänäytteet tulee ottaa halkaisijaltaan noin 10 mm:n ytimistä 10-20 cm:n syvyyteen. Sydämet on parempi esisteriloida kiehuvassa vedessä (100 °C).
Näytteet tulee laittaa steriileihin petrimaljoihin , jotka on suljettava. Jokaisen näytteen painosta ½ otetaan yleensä kemialliseen analyysiin (typpipitoisten ionien pitoisuuden tutkimiseen), loput mikrobiologiseen analyysiin.
Maaperän mikrobiologinen aktiivisuus voidaan määrittää maaperässä elävien mikro- organismien proteaasiaktiivisuuden perusteella, ja maaperän proteaasiaktiivisuus määräytyy maaperän mikro-organismien eksoentsyymien aktiivisuuden perusteella ja riippuu niiden lukumäärästä ja aktiivisuudesta. Eksoentsyymit ovat mikro-organismien ulkoiseen ympäristöön erittämiä entsyymejä, jotka hajottavat proteiineja, polysakkarideja ja lipidejä.
Petrimaljoihin, joissa on maanäytteitä, sinun on asetettava valaistu valokuvafilmi, joka on leikattu 2-3 kehykseen, joka on aiemmin liotettu vedessä 10 minuuttia. Vesi tulee esisteriloida keittämällä 10 minuuttia (100 °C). On myös parempi sijoittaa yksi kalvofragmentti tyhjään steriiliin petrimaljaan (verrokki), jotta saatuja tuloksia voidaan verrata kokeen lopussa kontrolliin ja minimoida virheiden riski.
Seuraavaksi maanäytteitä on säilytettävä huoneenlämmössä (20 °C) 9 päivää. Sitten kalvo on poistettava varovasti ja pestävä juoksevan veden alla ja kuivataan sitten. Sen jälkeen sinun on laskettava paletin "syödyn" emulsiokerroksen prosenttiosuus. Mitä suurempi emulsiokerroksen tuhoutumisprosentti on, sitä suurempi on maaperän eksoentsymaattinen aktiivisuus.
Gram-värjäyksen ominaisuus on erilaisten mikrobien epätasainen suhde trifenyylimetaaniryhmän väriaineisiin: gentianvioletti, metyylivioletti , kristallivioletti. Gram-positiivisten ryhmään kuuluvat mikrobit muodostavat vahvan yhteyden mainittujen väriaineiden ja jodin kanssa . Värjäytyneet mikrobit eivät värjää alkoholille altistuessaan , minkä seurauksena grampositiiviset mikrobit eivät muuta alun perin otettua violettia väriä , kun ne värjätään lisäksi fuksiinilla . Gram-negatiiviset mikro-organismit muodostavat gentian-, kristalli- tai metyyliviolettin ja jodin kanssa yhdisteen, joka tuhoutuu helposti alkoholin vaikutuksesta, minkä seurauksena ne värjäytyvät ja värjäytyvät sitten fuksiinilla ja saavat punaisen värin. Mikro-organismien suhteella Gram-värjäykseen on suuri diagnostinen arvo.
Pieni määrä maanäytettä siirrostetaan leväagar -petrimaljoihin mikrobiologisella silmukalla, jonka jälkeen siirrostettuja petrimaljoja tulee säilyttää huoneenlämmössä 9 päivää. On myös parempi tehdä kontrollirokotus ilmasta, jotta voidaan myöhemmin vertailla eri petrimaljoissa kasvaneiden mikro-organismien pesäkkeitä ja tietää, mitkä mikro-organismit voivat tulla ilmasta, ei maaperästä.
Aseta tippa tislattua vettä puhtaalle, rasvattomalle lasilevylle ja lisää sitten pieni määrä agarilla kasvatettua mikrobiviljelmää mikrobiologisella silmukalla. Seuraavaksi sinun on tehtävä vedot ja kiinnitettävä ne liekkiin. Jokaiselle maanäytteelle on parempi tehdä 2-3 sivelyä ja yksi kontrollinäyte.
Mikro-organismien gramvärjäys tulee tehdä seuraavasti:
Värjäyksen tulos: gram -positiiviset bakteerit värjätään pääväriaineella tumman purppuravärillä, gram-negatiiviset bakteerit, jotka havaitsevat lisäväriä, saavat kirkkaan karmiininpunaisen värin.