Gene knockdown

Gene knockdown on tekniikka ,  joka vähentää yhden tai useamman geenin ilmentymistä muuttamalla vastaavaa nukleotidisekvenssiä tai käyttämällä lyhyttä oligonukleotidia , joka on komplementaarinen vastaavalle mRNA - molekyylille . Geenin knockdown - menetelmällä tarkoitetaan käänteisgenetiikan menetelmiä . Kun geenin sekvenssi muuttuu, organismin sanotaan häviävän kyseisestä geenistä. Jos käytetään lyhyitä oligonukleotideja, jotka ovat komplementaarisia vastaavan mRNA:n kanssa tai sitoutuvat DNA :ssa olevaan nukleotidisekvenssiin, geenin kaatuminen johtaa tilapäiseen muutokseen geenin ilmentymisen parametreissä muuttamatta kromosomien rakennetta ja geenin DNA-sekvenssiä.

Jos kyseessä on lyhytaikainen knockdown, oligonukleotidin sitoutuminen geeniin tai transkripteihin vähentää ilmentymistä johtuen transkription , translaation tai mRNA:n hajoamisen estämisestä (esimerkiksi RNA-interferenssireitin kautta), myös pre-mRNA- silmukointi voi olla heikentynyt . [1] [2] Tutkijat tutkivat geenin sammuttamisen tai sen ilmentymisen vähentämisen vaikutusta organismin fenotyyppiin ja vertaavat sitä normaaleihin yksilöihin. Lyhytaikaisia ​​geenien tyrmäyksiä käytetään usein kehitysbiologiassa, koska oligonukleotidit voidaan helposti viedä tsygoottiin ja ne siirtyvät kaikkiin tytärsoluihin alkion kehityksen aikana. [3]

Muistiinpanot

  1. Summerton, J. Morpholino, siRNA ja S-DNA Verrattu: Rakenteen ja toimintamekanismin vaikutus kohteen ulkopuolisiin vaikutuksiin ja sekvenssispesifisyyteen  //  Med Chem. : päiväkirja. - 2007. - Voi. 7 , ei. 7 . - s. 651-660 .
  2. Summerton, J. Morpholino Antisense Oligomers: The Case for an RNase-H Independent Structural Type  //  Biochimica et Biophysica Acta : päiväkirja. - 1999. - Voi. 1489 , no. 1 . - s. 141-158 . — PMID 10807004 .
  3. Nasevicius, A; Ekker SC Tehokas kohdennettu geeni "knockdown" seeprakalassa  (englanniksi)  // Nature Genetics  : Journal. - 2000. - Voi. 26 , nro. 2 . - s. 216-220 . - doi : 10.1038/79951 . — PMID 11017081 .

Katso myös