Kulttuuri (mikrobiologia)

Kylvö ( bakposev ) on yksi kiinteistä menetelmistä mikro-organismien viljelyyn ravintoalustalla, jota käytetään lääketieteellisen mikrobiologian kulttuuridiagnostiikassa sekä biokemiallisten ja biologisten ominaisuuksien tutkimiseen erilaisiin bioteknisiin tarkoituksiin. Riippuen tutkittujen bakteerien pitoisuudesta näytteessä, siirrostus suoritetaan tiheään ravintoalustaan ​​(eristettyjen pesäkkeiden saamiseksi ja viljelmän puhtauden määrittämiseksi). Jos testimateriaalin mikro-organismien pitoisuus on merkityksetön, siirrostus suoritetaan nestemäisille rikastusaineille. Kylvömenetelmiä on erilaisia ​​[1] .

Ravintoaineet

Yksinkertainen

Special

Erikoismenetelmille on ominaista tietyn komponentin lisääminen tai pohjan vaihtaminen.

Valinnaiset

Elektiivisille menetelmille on tunnusomaista se, että saadaan aikaan vain mielenkiinnon kohteena olevan mikro-organismin kasvu.

Differentiaalidiagnostiikka

Salli yksittäisten bakteerityyppien, lajien ja ryhmien tunnistaminen.

Kylvötekniikka

Viljoille [2] käytetään mikrobiologisia silmukoita , harvemmin neuloja ja lastaa. Useimmiten viljelyyn käytetään koeputkea ja petrimaljaa . Bakteerisilmukka on universaali työkalu kylvöviljelyyn . Sen lisäksi kylvössä käytetään erityistä bakteerineulaa ruiskeella ja petrimaljoille kylvämiseen metalli- tai lasilastat . Nestemäisten materiaalien inokulointiin käytetään silmukan lisäksi asteikolla varustettuja ja Pasteur - pipettejä.

Kylvö kiinteille ravintoalustoille (in vitro)

Kylväessään he ottavat koeputken vasempaan käteen ja oikealla, sulkemalla korkin tiukasti neljännellä ja viidennellä sormella, poistavat sen. Pitämällä silmukkaa saman käden muilla sormilla ensin vaaka- ja sitten pystyasennossa , se saatetaan avotuleen ja poltetaan punaiseksi . Inokulaatti kerätään jäähdytetyllä silmukalla, jonka jälkeen koeputki suljetaan korkilla pitäen koeputken reunaa aiemmin alkoholilampun liekin päällä . Korkkia ei saa polttaa. Sitten koeputkeen, jossa on vinoagar, syötetään ymppiä sisältävä silmukka, joka laskee sen väliaineen alaosassa olevaan kondensaattiin, ja materiaali jaetaan siksak-liikkeellä agarin vinopinnalle. Polta silmukan poistamisen jälkeen koeputken reuna ja sulje se korkilla. Silmukka flamboidaan polttimen liekissä ja asetetaan jalustaan ​​kahva alaspäin. Viljelyputket allekirjoitetaan etukäteen , jolloin ilmoitetaan rokotuspäivämäärä, tutkimuksen numero ja viljelmän nimi.

Kylvö tiheälle ravintoalustalle (petrimaljassa)

Vilja "nurmikon", joka tuotetaan tiheällä ravintoalustalla petrimaljassa. Tätä varten, kun kansi on avattu hieman vasemmalla kädellä, siirroste levitetään silmukalla tai pipetillä ravinneagarin pinnalle Drygalsky-menetelmän mukaisesti. Istutuksen inkubaation jälkeen bakteerien tasainen jatkuva kasvu ilmaantuu niiden jakautuessa pesäkkeisiin. Eristettyjen bakteeriviljelmien tunnistaminen suoritetaan tutkimalla bakteerien morfologiaa, niiden kulttuurisia, biokemiallisia ja muita kullekin lajille ominaisia ​​ominaisuuksia.

Pesäke  on yhden tyyppisten mikro-organismien edustajien näkyvä eristetty kerääntymä, joka muodostuu yhden pesäkkeitä muodostavan yksikön ( CFU ) lisääntymisestä kiinteällä ravintoalustalla (pinnalla tai sen syvyydessä). Eri lajien bakteeripesäkkeet eroavat toisistaan ​​morfologialtaan, väriltään ja muilta kulttuuriominaisuuksiltaan.

Mikro-organismien kulttuurinen erilaistuminen

Pesäkkeet [3] eroavat koon, muodon, värin, koostumuksen, reunan muodon, rakenteen ja pinnan luonteen suhteen:

Nestemäisessä ravintoalustassa jotkut bakteeriviljelmät antavat hajanaista sameutta, kun taas toisille on ominaista lähellä pohjaa oleva parietaalinen kasvu. Jotkut viljelmät muodostavat kalvoja alustan pinnalle, toiset muodostavat sakan putken pohjalle.

Anaerobien viljely eroaa merkittävästi aerobien viljelystä : koska ilmakehä sisältää huomattavan määrän happea , sen poistamiseksi ympäristöstä käytetään erityisiä kylvötekniikoita, väliaineita ja anaerostaattia [3] .

Katso myös

Muistiinpanot

  1. Prozorkina N.V., Rubashkina L.A. Mikrobiologian, virologian ja immunologian perusteet. - Rostov-on-Don: "Phoenix", 2002. - S. 135.
  2. K.D. Pyatkin. Mikrobiologia virologian ja immunologian kanssa. - M: "Lääketiede", 1971. - S. 84.
  3. 1 2 L.B. Borisov. Opas lääketieteellisen mikrobiologian, virologian ja immunologian laboratoriotutkimuksiin. - Medicine, 1992. - S. 31-44. — ISBN 5-2225-00897-6 .