Chetverin, Aleksanteri Borisovich
Alexander Borisovich Chetverin (s . 20. toukokuuta 1953 ) on venäläinen molekyylibiologi , biologisten tieteiden tohtori vuodesta 1995 , molekyylibiologian professori, Venäjän tiedeakatemian vastaava jäsen fysikaalisen ja kemiallisen biologian osastolla 30. toukokuuta 1997 lähtien, Virus - RNA :n biokemian laboratorion johtaja Institute of Protein RAS: ssa vuodesta 1998 , akateemikko Spirin A.S.:n opiskelija.
Tieteellinen toiminta
Chetverin työskenteli geenitekniikan alalla ( uuden tyyppisten vektorien luominen matriisin ribonukleiinihapon kloonaukseen - mRNA ).
Vuonna 1991 Institute of Protein RAS:ssa Chetverin ja hänen kollegansa keksivät molekyylipesäkemenetelmän , jonka ydin on, että kun sopivat olosuhteet luodaan, RNA tai DNA lisääntyy geelikerroksessa , minkä ansiosta jokaisen jälkeläiset. molekyyli muodostaa pesäkkeen , eikä leviä reaktiotilavuuden läpi. Koska geelimatriisi estää sen sisältämän nesteen konvektiota ja rajoittaa nukleiinihappojen diffuusiota , lisääntymistuotteet eivät leviä reaktioväliaineessa, vaan muodostavat enemmän tai vähemmän kompakteja molekyylipesäkkeitä, kuten ravinteiden pinnalla kasvavia bakteeripesäkkeitä . agar. Jos lisääntyminen suoritetaan ohuessa geelikerroksessa, muodostuu kaksiulotteinen pesäkkeiden kuvio, joista jokainen edustaa lukuisia kopioita ( klooneja ) yhdestä alkuperäisestä RNA- tai DNA-molekyylistä.
Molekyylipesäkkeiden menetelmä mahdollisti templaattien lähteen määrittämisen niin kutsutussa "templaattomassa" RNA-synteesissä, joka suoritettiin Qβ-replikaasilla ( bakteriofagin Qβ :n RNA-riippuvainen RNA-polymeraasi [1] ) soluttomassa järjestelmässä, sekä tutkia in vitro äärimmäisen harvinaisia RNA-molekyylien välisiä rekombinaatioreaktioita , jotka johtivat RNA-molekyylien kyvyn löytämiseen spontaanisti järjestelemään uudelleen nukleotidisekvenssinsä fysiologisissa olosuhteissa . Nämä kokeet tarjoavat epäsuoraa näyttöä RNA-maailman hypoteesin puolesta .
Chetverinin laboratoriossa on myös kehitetty erilaisia käytännön sovelluksia molekyylipesäkemenetelmälle, mukaan lukien solunulkoinen kloonaus ja geeniseulonta , sekä digitaalinen diagnostiikka, joka mahdollistaa yhden DNA-molekyylin ja kahden RNA-molekyylin luotettavan havaitsemisen 100 µl:ssa kokoverta . virus- ja onkologisten sairauksien ultraherkkää diagnostiikkaa varten .
Palkinnot ja palkinnot
Vuonna 1995 Chetverin A.B. Hänestä tuli A. N. Belozersky -palkinnon voittaja sarjasta RNA:n replikaatiota, ilmentämistä ja kloonausta varten soluttoman järjestelmän luomista.
Julkaisut
Chetverin A.B. on seuraavien julkaisujen
toinen kirjoittaja :
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 2002. Tarkka diagnoosi molekyylipesäkkeillä. Molekyyli. biologia. 36.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 2003. PCR-diagnostiikan ongelmien voittaminen molekyylipesäkkeiden menetelmällä. Molekyyli. lääkettä. 2.
- Chetverina E.V., Chetverin A.B. 2008. Nanokoloniat: yksittäisten molekyylien löytäminen, kloonaus ja analysointi. Menestystä biol. kemia. 48.
- Chetverin AB, Chetverina HV 2008. Molekyylipesäketekniikka: uusi työkalu biolääketieteelliseen tutkimukseen ja kliiniseen käytäntöön. Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 82.
- Chetverin AB, Chetverina HV, Munishkin AV Qb-replikaasilla tapahtuvan spontaanin RNA-synteesin luonteesta // J. Mol. Biol. 1991. V. 222. S. 3-9.
- Chetverina HV, Chetverin AB RNA-molekyylien kloonaus in vitro // Nucleic Acids Research. 1993. V. 21. P. 2349-2353. [2] PMID 7685078 .
- Chetverina HV, Demidenko A.A., Ugarov VI, Chetverin AB Spontaanit uudelleenjärjestelyt RNA-sekvensseissä // FEBS Letters. 1999. V. 450. S. 89-94.
- Munishkin AV, Voronin LA, Ugarov VI, Bondareva LA, Chetverina HV ja Chetverin AB Tehokkaat templaatit Qb-replikaasille muodostetaan rekombinaatiolla heterologisista sekvensseistä. - J. Mol. Biol., 1991, v. 221, s. 463-472.
- Morozov I.Yu., Ugarov VI, Chetverin AB ja Spirin AS Synergismi lähetti-RNA:n replikaatiossa ja translaatiossa soluttomassa järjestelmässä. - Pros. Natl. Acad. sci. USA, 1993, v. 90, s. 9325-9329.
- Chetverin AB ja Kramer FR -oligonukleotidiryhmät: uusia konsepteja ja mahdollisuuksia. - Bio/Technology, 1994, v. 12, s. 1093-1099.
- Chetverin AB ja Spirin AS Replikoituvat RNA-vektorit: Soluttoman geenin monistamisen, ilmentämisen ja kloonauksen näkymät. - Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 1995, v. 51, s. 225-270.
- Chetverin AB, Chetverina HV, Demidenko AA ja Ugarov VI Ei-homologisen RNA:n rekombinaatio soluttomassa järjestelmässä: todisteita sekundaarirakenteen ohjaamasta transesteröintimekanismista. – Cell, 1997, v. 88, s. 503-513.
- Chetverin AB ja Chetverina HV Menetelmä nukleiinihappojen monistamiseen kiinteissä väliaineissa. US-patentti 5, 1997, v. 616, s. 478.
- Chetverin AB RNA-rekombinaation palapeli. FEBS Lett., 1999, v. 460, s. 1-5.
- Gmyl AP, Belousov EV, Maslova SV, Khitrina EV, Chetverin AB ja Agol VI Ei-replikatiivinen RNA-rekombinaatio polioviruksessa. - J. Virol., 1999, v. 73, s. 8958-8965.
- Vasilyev NN, Kutlubaeva ZS, Ugarov VI, Chetverina HV, Chetverin AB Ribosomaalinen proteiini S1 toimii lopetustekijänä RNA-synteesissä Qβ-faagireplikaasilla. - Nat. Communi., 2013, v. 4, artikkelinumero 1781.
Patentit
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1995. Menetelmä nukleiinihappojen lisäämiseksi, menetelmä niiden ilmentämiseksi ja väliaine niiden toteuttamiseksi. RF-patentti nro 2048522.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1998. Menetelmä nukleiinihappojen kloonaamiseksi. RF-patentti nro 2114175.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1998. Menetelmä nukleiinihappojen diagnosoimiseksi. RF-patentti nro 2114915.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1997. Menetelmä nukleiinihappojen monistamiseksi kiinteässä väliaineessa. US-patentti 5,616,478.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1999. Menetelmä nukleiinihappojen monistamiseksi kiinteissä väliaineissa ja sen käyttö nukleiinihappojen kloonauksessa ja diagnostiikassa. US-patentti 5,958,698.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1999. Kiinteä elatusaine nukleiinihappojen monistamiseen ja ilmentämiseen pesäkkeinä. US-patentti 6 001 568.
Lähteet