L-asparaginaasi ( EC 3.5.1.1 ), L - asparagiiniamidohydrolaasi on hydrolaasiluokan entsyymi , joka katalysoi pääasiassa L-asparagiinin hydrolyysiä . Sitä käytetään kasvainten vastaisena sytostaattisena aineena tiettyjen leukemioiden hoidossa [1] [2] sekä ruoanlaitossa [3] .
Tuotettu käyttämällä Escherichia colia tai Erwinia chrysanthemi [4] .
Asparaginaasi on neljän kohdan homotetrameeri, jonka molekyylipaino vaihtelee 140 - 150 kDa eri lähteiden mukaan. Jokainen monomeeri koostuu noin 330 aminohappotähteestä, jotka muodostavat 14 p-laskosta ja 8 a-heliksiä , jotka muodostavat kaksi helposti erotettavaa domeenia : suuremman N-terminaalin ja C-terminaalin. Aktiivinen kohta muodostuu monomeerien väliin. Huolimatta siitä, että dimeerissä on jo kaikki katalyysiin tarvittava , vain tetrameerinen muoto on aktiivinen useimmille bakteeriasparginaaseille [5] .
Lukuisat L-asparaginaasin vaikutusmekanismin selventämiseksi tehdyt työt ovat osoittaneet kaksivaiheisen ping-pong-mekanismin, joka on sama kuin seriiniproteaasin , sillä ainoalla poikkeuksella, että seriini (Ser), vaan treoniini (Thr ) ei toimi nukleofiili L-asparaginaasissa. ), joka sijaitsee aktiivisen kohdan liikkuvan silmukan alueella. Mobiilisilmukan sijainnin mukaan erotetaan kaksi päärakennetta: suljettu ja avoin. Substraatin sitoutuminen aktiiviseen kohtaan käynnistää liikkuvan silmukan siirtymisen suljettuun konformaatioon, mikä tuo katalysoivan nukleofiilin lähemmäksi substraattia [5] .
Asparagiinin pilkkominen asparaginaasilla johtaa sen pitoisuuden laskuun solunulkoisessa tilassa. Normaaleissa soluissa asparagiinisyntetaasi aktivoituu palauttamaan asparagiinipitoisuudet ; leukemiasoluissa asparagiinisyntetaasin ilmentyminen vähenee. Siten asparaginaasi pystyy asparagiinin pilkkoutumisesta johtuen estämään proteiinisynteesin ja siten aiheuttamaan kasvainsolujen apoptoosia [2] [6] .