Romanovsky-Giemsa-värjäys
Kokeneet kirjoittajat eivät ole vielä tarkistaneet sivun nykyistä versiota, ja se voi poiketa merkittävästi 15. heinäkuuta 2019 tarkistetusta versiosta . tarkastukset vaativat 2 muokkausta .Romanovsky - Giemsa - värjäys on sytologinen menetelmä mikro- organismien , solurakenteiden ja erityyppisten kudosten (mukaan lukien veri ) värjäämiseen valomikroskoopilla tutkittavaksi . Gustav Giemsan ehdottama vuonna 1904 [1] . Tekijän versiossa väriaineen nimi on "Giemsasche Lösung für die Romanowsky Färbung" (Giemsa-liuos värjäykseen Romanovskin mukaan) [2] . Se värjää asidofiilisiä muodostelmia eri punaisen sävyin, basofiilisiä muodostelmia väreissä violetista siniseen.
Väriaineen valmistelu
Ennen sivelyn värjäämistä valmis nestemäinen väriaine laimennetaan nopeudella 1-2 tippaa väriainetta 1 ml:ssa tislattua vettä. Levyt värjätään 20-25 minuuttia 37°C:ssa kosteassa kammiossa (suljettu petrimalja, jonka pohjassa on kostutettu suodatin). Värjäyksen jälkeen sivelyt pestään juoksevalla vedellä, kuivataan ilmassa ja tutkitaan öljyimmersion avulla.
Romanovsky-Giemsa-väriaineseos, joka perustuu Romanovsky-Wright-maaliin , jauheen muodossa (kaupallinen väriaine) liuotetaan seokseen, jossa on yhtä suuret määrät metyylialkoholia ja glyseriiniä (800 mg väriainetta 100 ml:ssa liuotinta). ). Väriaine liukenee huonosti, joten on parempi jauhaa se liuottimella, jonka määrä on 300 mg / 100 ml, ja sitten sekoittaen, lisää väriainetta, kunnes haluttu pitoisuus saadaan. Väriaineen valmistus kestää usein useita päiviä. On tärkeää käyttää liuottimina kemiallisesti puhdasta metyylialkoholia ja glyseriiniä, koska epäpuhtaudet heikentävät väriaineen ominaisuuksia. Metyylialkoholin sijasta voidaan käyttää 100 % etyylialkoholia. Valmistettu väriseos säilytetään viileässä kuivassa paikassa tiiviisti suljetussa astiassa.
Giemsan erityinen standardiratkaisu
- Väriaineen koostumus:
Värjäystekniikka
- Metyylialkoholiin kiinnitetyt sivelyt värjätään liuoksella (1 ml valmista nestemäistä maalia + 2 ml peruspuskuriliuosta + 47 ml tislattua vettä) 40-120 minuutin ajan (värjäyksen kesto valitaan empiirisesti). Fosfaattipuskuria käytetään, mutta puskurin pH riippuu kokeen tyypistä: luuydinnäytteessä - 5,8-6,0, verikokeessa - 6,4-6,5, alkueläinten havaitsemisessa - 6,8, malariaplasmodium - 7, 0-7.2.
- Huuhtele tislatulla vedellä, kuivaa ja tutki upottamalla.
Väritystulos
Bakteerit värjäytyvät purppuranpunaiseksi, solusytoplasman siniseksi, ytimet punaisiksi. Kun alkueläimiä värjätään, niiden sytoplasma muuttuu siniseksi ja ytimet punavioletteiksi.
Verinäytteen värjäyksen
tulokset
- lymfosyyttien sytoplasma värjäytyy sini-siniseksi, niiden ytimet - väreissä voimakkaasta violetista violettiin;
- monosyyttien sytoplasma värjäytyy samean sinertävän harmaalla värillä, niiden ytimet - vaaleammalla purppuranpunaisella, herkällä atsurofiilisellä rakeisuudella;
- basofiilien rakeet värjäytyvät voimakkaan sinivioletin värin;
- eosinofiilien rakeet värjäytyvät oranssinpunaiseksi;
- neutrofiilien rakeet värjätään väreillä violetista violettiin;
- leukosyyttien ytimet ovat väriltään purppuranpunaisia, ja niissä on selvästi näkyvä kromatiinirakenne; nukleolit erottuvat hyvin;
- verihiutaleiden granulomeerit värjäytyivät punaisiksi, hyalomeerit värjäytyivät siniseksi;
- hemoglobiinin vaaleanpunainen väri .
Katso myös
Muistiinpanot
- ↑ Giemsa G. Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenazur-Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatinfärbung. (saksa) // Centralbl f Bakt etc: magazin. - 1904. - Bd. 37 . - S. 308-311 .
- ↑ Bezrukov A. V. Väritys Romanovskin mukaan: prioriteettikysymyksestä / Romanovsky-ilmiön löytämisen 120-vuotispäivänä. -12 s. (linkki ei saatavilla)
 Sanakirjat ja tietosanakirjat |
|
|---|