Rajoitussivusto

Kokeneet kirjoittajat eivät ole vielä tarkistaneet sivun nykyistä versiota, ja se voi poiketa merkittävästi 16. maaliskuuta 2013 tarkistetusta versiosta . tarkastukset vaativat 2 muokkausta .

Restriktiokohta (tunnistuskohta) on lyhyt sekvenssi nukleotideja DNA - molekyylissä , jonka restriktiomodifikaatioendonukleaasientsyymi ( restriktioentsyymi ) tunnistaa. Restriktioentsyymi sitoutuu DNA-molekyyliin restriktiokohdan sijainnissa ja katkaisee nukleotidiketjun kohdassa tai sen välittömässä läheisyydessä.

Bakteerit tuottavat restriktioentsyymejä evoluution aikana tuhotakseen vieraan DNA:n, joka voi päästä soluun ja aiheuttaa sen transformaation. Eri restriktaasien restriktiokohdan koko on yleensä 4-6 nukleotidia. Kohdassa olevien emästen lukumäärä vaikuttaa suoraan sen esiintymistiheyteen genomissa. (voidaan laskea oletuksena typpipitoisten emästen yhtäläisestä esiintymistiheydestä) Kohdat ovat yleensä palindromisia, eli ne ovat molemmilta puolilta samanlaisia ​​tai sisältävät käänteisiä toistoja. Itse bakteerin DNA:n restriktiokohdat peitetään tähteiden A ja C metylaatiolla [1] . Tämän suorittaa DNA-metyylitransferaasi, restriktio-modifikaatiokompleksin modifioiva osa.

Esimerkiksi restriktioentsyymi EcoRI tunnistaa GAATTC-sekvenssin käänteisellä toistolla ja katkaisee ketjun G- ja A-nukleotidien välillä jättäen päällekkäiset AATT-alueet päihin [1] .

Kaikkiaan eri lajien bakteereista on löydetty useita satoja restriktioentsyymejä. Alla olevat kuviot esittävät nukleotidiketjun restriktiokohdat ja leikkauslinjat useille tunnetuille restriktioentsyymeille [1] .

Restriktiokohdat ovat tärkeitä helpottamaan kohdegeenien insertiota erilaisiin rakenteisiin, kuten plasmideihin . Geenitekniikassa käytettyjen plasmidien tyypillinen piirre on polylinkkerin, lyhyen segmentin, jossa on useita (noin 20) eri restriktiokohtia, läsnäolo.

Katso myös

Linkit

Muistiinpanot

  1. 1 2 3 Alberts B., Bray D., Lewis J., Raff M, Roberts C., Watson J. Molecular Biology of the Cell: In 3 vols . - M . : Mir, 1994. - T. 1. - 517 s. — ISBN 5-03-001985-5 .. Arkistoitu 20. marraskuuta 2010 Wayback Machinessa