Ioninvaihtokromatografia on ionikromatografian erikoistapaus, jonka avulla voit erottaa ioneja ja polaarisia molekyylejä erotettavien molekyylien varausten perusteella .
Tämän tyyppisen kromatografian avulla voit erottaa melkein kaikki varautuneet molekyylit, mukaan lukien: suuret - proteiinit , pienet - nukleotidi- ja aminohappomolekyylit . Ioninvaihtokromatografiaa käytetään usein ensimmäisenä vaiheena proteiinien puhdistuksessa .
Ioninvaihtokromatografiassa käytetään synteettisiä polymeerejä, jotka useimmiten perustuvat polystyreeniin ja polyfenoleihin. Ioninvaihtoprosesseista vastaavat ryhmät lisätään useimmiten substituentteina monomeerien bentseenirenkaaseen. Kaupallisesti saatavilla olevat ioninvaihtohartsit ovat pieniä polymeerihelmiä, jotka on liotettava vedessä tai muussa eluentissa ennen käyttöä [1] . Ioninvaihtohartsin turpoamiseen liittyy polymeerin funktionaalisten ryhmien saatavuuden lisääntyminen johtuen makromolekyylien laajenemisesta eluenttimolekyylien vaikutuksesta, kuten polymeerin pehmittämisessä . Ioninvaihtohartsin turpoamisastetta säätelee sekä makromolekyylien pituus että polymeerimatriisin silloitusaste .
Ioninvaihtokromatografia erottaa molekyylit ionivuorovaikutusten perusteella . Stationaarifaasissa on varautuneita funktionaalisia ryhmiä , jotka ovat vuorovaikutuksessa analysoitujen vastakkaisen varauksen omaavien ionisoitujen molekyylien kanssa. Tämä kromatografian muunnos luokitellaan kahteen tyyppiin - kationi- ja anioninvaihtokromatografia:
Kromatofokusointi (CF) on ioninvaihtokromatografiamenetelmä, joka perustuu eluointiin sisäisellä (pylvään sisälle luodulla) pH-gradientilla. Tällä hetkellä käytetään kahta tekniikkaa pH-gradienttien muodostamiseen - "klassista" kromatofokusointia ja induktiota. CP:tä käytetään yleensä biologisten esineiden – proteiinien, peptidien, aminohappojen, harvemmin atsovärien ja muiden kahtaisionisten yhdisteiden – erottamiseen. 1990-luvun alussa P. N. Nesterenko ja A. V. Ivanov ehdottivat menetelmää siirtymämetallien konsentroimiseksi ja erottamiseksi yhdellä kolonnilla käyttäen kromatofokusointitekniikkaa. Perinteisesti näitä tarkoituksia varten anioninvaihtosorbenttien päälle muodostetaan laskevia pH-gradientteja.