Fenyylimetyylisulfonyylifluoridi

Fenyylimetaanisulfonyylifluoridi (PMSF)
Kenraali
Chem. kaava C7H7FO2S _ _ _ _ _ _
Lämpöominaisuudet
Lämpötila
 •  sulaminen 93 °C [1]
Luokitus
Reg. CAS-numero 329-98-6
PubChem 4784
Reg. EINECS-numero 206-350-2
Hymyilee   C1=CC=C(C=C1)CS(=O)(=O)F
InChI   InChI = 1S/C7H7FO2S/c8-11(9,10)6-7-4-2-1-3-5-7/h1-5H, 6H2YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N
RTECS XT8040000
CHEBI 8102
ChemSpider 4620
Tiedot perustuvat standardiolosuhteisiin (25 °C, 100 kPa), ellei toisin mainita.
 Mediatiedostot Wikimedia Commonsissa

Biokemiassa fenyylimetaanisulfonyylifluoridi tai fenyylimetyylisulfonyylifluoridi ( PMSF , lyhenne sanoista fenyylimetaanisulfonyylifluoridi tai fenyylimetyylisulfonyylifluoridi ) on seriiniproteaasi - inhibiittori , jota käytetään laajalti proteiiniuutteiden eristämiseen eri soluista . PMSF ei estä kaikkia seriiniproteaaseja [ lähde? ] . Se hajoaa nopeasti vedessä, joten kantaliuokset ("varasto") käyttävät yleensä vedetöntä etanolia , isopropanolia , maissiöljyä tai DMSO :ta liuottimena . Proteolyyttisten entsyymien esto tapahtuu PMSF-pitoisuuksilla, jotka ovat alueella 0,1-1 mM . Puoliintumisaika vesiliuoksissa (25 °C:ssa) on 110 minuuttia pH-arvossa 7, 55 minuuttia pH-arvossa 7,5 ja 35 minuuttia pH-arvossa 8. [2]

PMSF sitoutuu spesifisesti seriiniproteaasien aktiivisen kohdan seriinitähteisiin , mutta se ei sitoudu mihinkään muihin seriinitähteisiin entsyymissä . Tämä on seurausta tämän seriinitähteen hyperaktiivisuudesta, joka johtuu spesifisistä ympäristöolosuhteista entsyymin aktiivisessa kohdassa. Koska PMSF on sitoutunut kovalenttisesti entsyymiin, kompleksi voidaan visualisoida käyttämällä röntgenkristallografiaa ; siksi PMSF:ää voidaan käyttää kemiallisena leimana seriinin tunnistamiseksi entsyymin aktiivisessa kohdassa.

Entsyymi_(aktiivinen)-Ser-OH + F-SO 2 CH 2 C 6 H 5 → Entsyymi-Ser-O-SO 2 CH 2 C 6 H 5 + HF Seriiniproteaasi + PMSF → irreversiibeli entsyymi-PMS-kompleksi + HF

LD 50 on alle 500 mg/kg [3] . PMSF on sytotoksinen kemikaali, ja sitä tulee käsitellä vain vetokaapissa.

Muistiinpanot

  1. ↑ Bradley J. , Williams A. , Andrew SID Lang Jean-Claude Bradley avoimen sulamispisteen tietojoukko // Figshare - 2014. - doi:10.6084/M9.FIGSHARE.1031637.V2
  2. ↑ GT James. Proteaasi-inhibiittorin fenyylimetyylisulfonyylifluoridin inaktivointi puskureissa   // Analyyttinen biokemia : päiväkirja. - 1978. - Voi. 86 , no. 2 . - s. 574-579 . - doi : 10.1016/0003-2697(78)90784-4 . — PMID 26289 .
  3. ↑ Roche Applied Science . Proteaasin eston täydellinen opas. https://iti.stanford.edu/content/dam/sm/iti/documents/himc/immunoassays/ProteaseInhibitionGuide.pdf Arkistoitu 17. toukokuuta 2017 Wayback Machinessa

Katso myös

Serpiinit ovat ryhmä seriiniproteaasin estäjäproteiineja .

Ulkoiset linkit