Pyörivän renkaan replikointi

Kokeneet kirjoittajat eivät ole vielä tarkistaneet sivun nykyistä versiota, ja se voi poiketa merkittävästi 13. heinäkuuta 2019 tarkistetusta versiosta . vahvistus vaatii 1 muokkauksen .

Pyörivä ympyräreplikaatio on yksisuuntainen nukleiinihapporeplikaatioprosessi , jonka  aikana syntetisoituu nopeasti useita kopioita pyöreästä DNA- tai RNA - molekyylistä , esimerkiksi plasmideja , bakteriofagigenomeja ja viroidista sirkulaarista RNA:ta . Jotkut eukaryoottivirukset myös replikoivat genomiaan tällä tavalla .

Pyöreä DNA:n replikaatio

Pyörivän rengas-DNA:n replikaation käynnistää erityinen proteiini - entsyymi , jota koodaa plasmidin tai bakteriofagin DNA, joka katkaisee yhden kaksijuosteisen pyöreän molekyylin ketjuista DSO:n ( kaksisäikeisen alkuperän ) kohdalla .  Initiaattoriproteiini sitoutuu katkenneen juosteen 5'- fosfaattipäähän , ja vapaa 3'- OH-ryhmä toimii alukkeena DNA- polymeraasi III : n DNA- synteesille . Käytettäessä katkeamatonta juostetta templaattina, koko pyöreä DNA-molekyyli replikoituu ja korvaa katkenneen juosteen, joka edustaa yksijuosteista DNA:ta. Katkenneen ketjun korvaaminen suoritetaan vastaanottajan koodaamalla PcrA - helikaasilla plasmidin koodaaman replikaation aloitustekijän läsnä ollessa.

Jatkuva DNA-synteesi tuottaa monia alkuperäisen DNA:n yksijuosteisia lineaarisia kopioita pitkinä DNA-sekvensseinä, joita kutsutaan konkatemeereiksi . Lineaariset kopiot voidaan muuntaa kaksijuosteiseksi pyöreäksi molekyyliksi seuraavan prosessin avulla.

Ensinnäkin initiaattoriproteiini tuottaa toisen katkaisun, mikä lopettaa toisen (johtavan) juosteen synteesin. RNA-polymeraasi ja DNA-polymeraasi III replikoivat sitten yksijuosteisen SSO-DNA:n ( yksijuosteinen alkuperä ) muodostaen uuden kaksijuosteisen renkaan .  Sen jälkeen DNA-polymeraasi I korvaa alukkeen DNA:lla ja DNA-ligaasi liittää päät muodostaen siten lopullisen kaksijuosteisen DNA:n.

Pyörivä rengasreplikaatio on löytänyt laajaa käyttöä sekä akateemisessa tutkimuksessa että biotekniikassa , ja mekanismia on käytetty menestyksekkäästi DNA:n monistamiseen erittäin pienistä DNA-määristä lähtönäytteestä.

Virologia

Jotkut virukset replikoivat DNA:taan isäntäsolussa pyörivän rengasreplikaation kautta. Esimerkiksi ihmisen herpesvirus tyyppi 6 (HHV-6) ilmentää sarjaa "varhaisia ​​geenejä", joiden uskotaan osallistuvan tähän prosessiin [1] . Tämän replikaation aikana muodostuneet pitkät konkatemeerit erotetaan ribotsyymeillä HHV-6:n pac-1- ja pac-2-alueiden välillä yksittäisten virionien muodostumisen aikana [2] .

Muistiinpanot

  1. Arbuckle, Jesse. Ihmisen herpesvirus-6-latenssin ja telomeeriintegraation molekyylibiologia  (englanniksi)  // Mikrobit ja infektio : lehti. — Voi. 13 , ei. 8-9 . - doi : 10.1016/j.micinf.2011.03.006 . — PMID 21458587 .
  2. Ihmisen herpesviruksen 6A genomin kloonaus bakteerien keinotekoisiin kromosomeihin ja DNA:n replikaation välituotteiden tutkimus  (englanniksi)  : lehti.

Linkit