Blottaus

Blottaus ( englanniksi  Blot ) on yleisnimi molekyylibiologisille menetelmille, joilla siirretään tiettyjä proteiineja tai nukleiinihappoja liuoksesta, joka sisältää monia muita molekyylejä, jonkinlaiselle kantajalle ( nitroselluloosa , PVDF tai nailonkalvo ) myöhempää analyysiä varten. Joissakin tapauksissa molekyylit altistetaan alustavasti geelielektroforeesille , toisissa ne siirretään suoraan kalvolle. Blotauksen jälkeen molekyylit visualisoidaan useilla eri menetelmillä:

• Värjäys (esimerkiksi proteiinien värjäys hopealla).
• Autoradiografinen kuvantaminen.
• Spesifinen leimaus immunokemiallisilla menetelmillä tai hybridisaatiolla.

Luokitus

Menetelmien luokitus tutkittavan aineen mukaan:

• Southern blot on DNA -  sekvenssin määrittäminen näytteestä.
• Southwestern blotting ( eng.  Southwestern blot ) - DNA:han liittyvien proteiinien määritys.
• Northern blot ( englanniksi  Northern blot ) - RNA-sekvenssin määritys näytteestä.
• Western blot ( eng.  Western blot ) - spesifisten proteiinien määritys näytteestä.
• Eastern blotting ( englanniksi  Eastern blotting ) - proteiinien translaation jälkeisten modifikaatioiden määritys .

Menetelmän nimeäminen

Southern blotting -menetelmä on nimetty menetelmän kirjoittajan Edwin Southernin mukaan . Loput nimet annettiin ensin epävirallisesti analogisesti (sukunimi voidaan kääntää "eteläiseksi"), sitten ne saivat virallisen aseman [1] . Toisin kuin muut, nimi "Southern blotting" on isolla kirjaimella.

Katso myös

• Immunokemia
• Elektroforeesi polyakryyliamidigeelissä
• Autoradiografia

Muistiinpanot

1. ↑ Murray R., Grenner D., Mace P., Rodwell W. Human Biochemistry. M.: Mir, 1993