Immunomääritys

Immunomääritysmenetelmä (immunokemiallinen määritys)  on biokemiallinen testi, joka mittaa makro- tai mikromolekyylien läsnäoloa tai pitoisuutta liuoksessa käyttämällä vasta- ainetta tai antigeeniä.

Testissä löydettyä molekyyliä kutsutaan analyytiksi ja se on monissa tapauksissa proteiini. Se voi kuitenkin olla erityyppisiä ja -kokoisia, kunhan vasta-aine säilyttää kyvyn tunnistaa ja sitoa tietty molekyyli.

Biologisten nesteiden, kuten seerumin tai virtsan, analyytit mitataan usein tällä menetelmällä lääketieteellisiin tai tutkimustarkoituksiin.

Immunomääritysmenetelmää sovelletaan eri muodoissa: se voidaan suorittaa heterogeenisissä (tai erottelevissa) useissa vaiheissa, lisäämällä ja pesemällä reagensseja tai erottelemalla ne eri vaiheissa, tai homogeenisissa (ei erottelevissa) ) -testejä sekoittamalla näyte reagensseihin ja tekemällä fyysinen mittaus.

Periaate

Immunomääritys perustuu vasta-aineen kykyyn tunnistaa ja sitoa spesifinen makromolekyyli, joka voi olla makromolekyylien monimutkainen seos. Immunologiassa vasta-aineen sitomaa spesifistä makromolekyyliä kutsutaan antigeeniksi ja sitä antigeenin aluetta, johon vasta-aine sitoutuu, kutsutaan epitoopiksi.

Joissakin tapauksissa antigeeniä voidaan käyttää immunomäärityksessä sellaisten vasta-aineiden havaitsemiseksi liuoksesta, jotka tunnistavat kyseisen antigeenin. Toisin sanoen joissakin immunomäärityksissä analyytti voi olla pikemminkin vasta-aine kuin antigeeni.

Sen lisäksi, että vasta-aine sitoutuu antigeeniinsä, toinen kaikkien immuunimääritysten keskeinen piirre on tapa, jolla saadaan mitattavissa oleva signaali vasteena sitoutumiseen. Useimpiin, vaikkakaan ei kaikkiin, immuunimäärityksiin liittyy vasta-aineiden tai antigeenien kemiallinen sitoutuminen johonkin havaittavissa olevaan leimaan. Nykyaikaisissa immuunimäärityksissä on suuri määrä leimoja, ja niiden avulla voit havaita ne eri tavoin. Monet leimat ovat havaittavissa, koska ne joko lähettävät säteilyä tai aiheuttavat värinmuutoksen liuoksessa, fluoresoivat altistuessaan valolle tai voivat lähettää valoa.

Muistiinpanot

• Berson SA, Yalow RS, Bauman A., Rothschild MA ja Newerly K., Insuliini-I131-metabolia ihmiskohteissa: insuliinia sitovan globuliinin esittely insuliinilla hoidettujen koehenkilöiden verenkierrossa, Journal of Clinical Investigation, voi. 35, ei. 2, 170-190 (1956)
• Yalow RS ja Berson SA, Immunoassay of endogenous plasma insuliini in man, Journal of Clinical Investigation, voi. 39, ei. 7.1157-1175 (1960)
• Yalow RS ja Berson SA, Immunoassay of plasma insuliini in man, Diabetes, voi. 10, ei. 5, 339-344 (1961)
• Wide L. ja Porath J., Proteiinien radioimmunomääritys Sephadex-kytkettyjä vasta-aineita käyttämällä, Biochimica et Biophysica Acta - General Subjects, voi. 130, ei. 1, 257-260 (1966)
• Nakane PK ja Pierce GB Jr., Entsyymileimatut vasta-aineet kudosantigeenien valo- ja elektronimikroskooppiseen paikantamiseen, Journal of Cell Biology, voi. 33, ei. 2, 307-318 (1967)
• Avrameas S., Entsyymien kytkeminen proteiineihin glutaraldehydillä. Konjugaattien käyttö antigeenien ja vasta-aineiden havaitsemiseen, Immunochemistry, voi. 6, ei. 1, 43-52 (1969)
• Engvall E. ja Perlmann P., Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Immunoglobuliini G:n kvantitatiivinen määritys, Immunochemistry, voi. 8, ei. 9, 871-874 (1971)
• van Weemen BK ja Schuurs AHWM, Immunoassay käyttäen antigeeni-entsyymi-konjugaatteja, FEBS-kirjaimet, voi. 15, ei. 3, 232-236 (1971)
• van Weemen BK ja Schuurs AHWM, Immunoassay käyttäen hapteeni-entsyymikonjugaatteja, FEBS-kirjaimet, voi. 24, nro. 1, 77-81 (1972)
• Pittman JA Jr., RIA: Historiallinen huomautus, Clinical Chemistry, voi. 19, ei. 7, 793 (1973)
• van Weemen BK ja Schuurs AHW M, Immunoassay käyttäen vasta-aine-entsyymikonjugaatteja, FEBS-kirjaimet, voi. 43, nro. 2, 215-218 (1974)
• Voller A., ​​​​Bidwell DE ja Engvall E., Entsyymi-immunosorbenttimäärityksen mikrolevymenetelmä ja sen soveltaminen malariaan, Bulletin of the World Health Organization, voi. 51, nro. 2, 209-211 (1974)
• Voller A., ​​Bidwell DE ja Bartlett A., Enzyme immunoassays in diagnostical medicine, Bulletin of the World Health Organization, voi. 53, nro. 1, 55-65 (1976)
• Yalow RS, Citation Classic, Current Contents, 14, 98 (1977)
• Yalow RS, Radioimmunoassay: koetin biologisten järjestelmien hienorakenteelle, Science, voi. 200, ei. 4347, 1236-1245 (1978)
• Engvall, E., Citation Classic, Current Contents, 12, 16 (1987)
• Voller A. ja Bidwell DE, Better Health care with microplate ELISA, Citation Classic, Current Contents, 17, 14 (1989)
• Mujumdar RB, Ernst LA, Mujumdar SR ja Wagoner AS, Syanine dye leimareagenssit, jotka sisältävät isotiosyanaattiryhmiä, Cytometry, voi. 10, ei. 1, 11-19 (1989)
• Yalow RS, Remembrance project: origins of RIA, Endocrinology, voi. 129, nro. 4, 1694-1695 (1991)
• Engvall E., Perspective on the History Note on EIA/ELISA by Dr. RM Lequin, Clinical Chemistry, voi. 51, nro. 12, 2225 (2005)
• van Weemen BK, The rise of EIA/ELISA, Clinical Chemistry, voi. 51, nro. 12, 2226 (2005)
• Lequin RM, Enzyme Immunoassay (EIA)/Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), Clinical Chemistry, voi. 51, nro. 12, 2415-2418 (2005)
• Avrameas S., EIA:n ja ELISA:n keksinnön historiallinen tausta, Clinical Chemistry, voi. 52, nro. 7, 1430-1431 (2006)
• Hammarström S., Berzins K., Biberfeld P., Engvall E., Hammarström M.-L., Holm G., Troye-Blomberg M. ja Wahlgren M., Peter Perlmann 1919-2005, Scandinavian Journal of Immunology, voi. 63, nro. 6, 487-489 (2006)

Muistiinpanot