Vasta-aineet

Vasta -aineet , immunoglobuliinit ovat immuunijärjestelmän plasmasolujen erittämiä  suuria pallomaisia ​​veriplasmaproteiineja , jotka neutraloivat patogeenisoluja ( bakteerit , sienet , monisoluiset loiset ) ja viruksia sekä proteiinimyrkkyjä ja joitain muita vieraita aineita. Jokainen vasta-aine tunnistaa taudinaiheuttajasta ainutlaatuisen elementin, joka puuttuu itse kehosta - antigeenin , ja tietyssä antigeenissä - tietyn osan siitä, epitoopin . Sitoutumalla patogeenien pinnalla oleviin antigeeneihin vasta-aineet voivat joko neutraloida ne suoraan tai värvätä muita immuunijärjestelmän komponentteja, kuten komplementtijärjestelmää ja fagosyyttejä tuhoamaan vieraita soluja tai viruspartikkeleita. Vasta-aineet ovat olennainen osa humoraalista spesifistä immuniteettia .

Vasta-aineet (immunoglobuliinit) muodostavat proteiinien superperheen . Vasta-ainemolekyyli on Y-muotoinen, molekyylin kahdessa päässä sijaitsee kaksi identtistä antigeeniä sitovaa kohtaa ja kolmas pää voi olla yksi useista tyypeistä, siitä riippuen vasta-aineet luokitellaan yhteen tai toiseen luokkaan. Yhden vasta-aineen koostumus sisältää useimmissa tapauksissa kaksi raskasketjua ja kaksi kevyttä ketjua . Nisäkkäillä on viisi raskasketjutyyppiä - α, γ, δ, ε ja μ, jotka vastaavat viittä vasta-aineiden isotyyppiä (luokkaa) - IgA , IgG , IgD , IgE ja IgM [1] . Kunkin isotyypin vasta-aineet eroavat muista funktioiden ja rakenteellisten ominaisuuksien osalta. Vasta-aineiden valtava vaihtelevuus saadaan aikaan raskaita ja kevyitä ketjuja koodaavien lokusten uudelleenjärjestelyillä V(D)J-rekombinaation aikana .

Normaalit kehon proteiinit tunnistavien vasta-aineiden ( autovasta -aineet ) muodostuminen on perusta autoimmuunisairauksien , kuten systeemisen lupus erythematosuksen , nivelreuman ja muiden kehittymiselle. Vasta-aineiden täydellinen tai osittainen puuttuminen johtaa immuunikatotilojen kehittymiseen .

Rakennus

Immunoglobuliini (vasta-aine) molekyylit ovat muotoiltu kirjaimella "Y" ja koostuvat kahdesta identtisestä kevyestä ja kahdesta identtisestä raskaasta polypeptidiketjusta, jotka on liitetty yhteen disulfidisidoksilla. Polypeptidiketjut "Y-kirjaimen" "ylemmissä" päissä päättyvät aminoryhmiin ja ovat antigeeniä sitovia kohtia , "jalka" - karboksyyliryhmillä [2] .

Vasta-aineiden liukoiset ja kalvomuodot tunnetaan. Kalvovasta-aineita löytyy B-lymfosyyteistä , ja niitä kutsutaan B-solureseptoreiksi . Liukoiset vasta-aineet ovat rakenteeltaan lähes identtisiä kalvovasta-aineiden kanssa, erot koskevat vain C-terminaalista (vakioosaa). Monomeerisen immunoglobuliinimolekyylin molekyylipaino on 150-170 kDa ja se koostuu neljästä polypeptidiketjusta : kahdesta kevyestä tai L-ketjusta ( englanniksi Lite ) (massa 50-60 kDa) ja kahdesta raskaasta tai H-ketjusta ( englanniksi Heavy ). ) (massa 100-120 kDa), jotka on järjestetty symmetrisesti ja yhdistetty disulfidisidoksilla . H- ja L-ketjut yhdistetään yhdellä disulfidisidoksella, joka sijaitsee lähellä kevyen ketjun C-päätä, loput disulfidisidokset pitävät H-ketjut yhdessä. Kevyiden ketjujen koostumus sisältää kaksi homologista segmenttiä ( domeenia ) ja raskasketjut - 4-5 domeenia. Domeenit koostuvat noin 110 aminohappotähteestä (a.a.) ja niillä on samanlainen avaruudellinen rakenne, joka on stabiloitu yhdellä disulfidisidoksella, mutta niiden toiminnot eroavat [3] . Nämä domeenit ovat ns. immunoglobuliinidomeeneja, jotka sisältävät luonteenomaisen rakenteellisen motiivin , joka tunnetaan immunoglobuliinilaskoksena ja jota edustaa kaksi β-kerrosta , jotka ovat vuorovaikutuksessa toistensa kanssa disulfidisidosten ja sähköstaattisten vuorovaikutusten kautta muodostaen jotain kerrosleivän kaltaista [4] . Domainit ovat vuorovaikutuksessa keskenään hydrofobisten vuorovaikutusten kautta [5] .   

Kaikkien ketjujen N-päät osallistuvat antigeenin tunnistamiseen, eli ne muodostavat kaksi identtistä antigeenin sitoutumiskohtaa. Avainrooli antigeenin tunnistusprosessissa on vastaavuudella antigeenin rakenteiden (tarkemmin sanottuna osa antigeenimolekyylistä - epitooppi ) ja vasta-aineen antigeeniä tunnistavan kohdan tai paratoopin välillä "avaimen" mukaan. -lukko" -periaate. Immunoglobuliinien spesifisyyden määräävät antigeenin tunnistusdomeenien aminohapposekvenssit, joita kutsutaan vaihteleviksi tai V-domeeneiksi (niitä kutsutaan myös F V - alueiksi). Antigeenia sitovan kohdan muodostavat raskaiden ja kevyiden ketjujen V-domeenit ( VH- ja VL - domeenit, vastaavasti). Se muodostuu β-arkkien muuttuvista silmukoista, joista kolme kuuluu VL -alueisiin ja loput kolme kuuluvat VH -alueisiin. Näitä silmukoita kutsutaan joskus komplementaarisuutta määrittäviksi alueiksi ( CDR ) [ 6 .  CDR:t tunnetaan myös hypervariaabeleina alueina. Immunoglobuliinimolekyylissä on yleensä 3 hypervariaabelia aluetta, joiden sijainti ketjussa voi olla erilainen. Lisäksi jokainen V-domeeni sisältää 4 aluetta, joiden koostumus on suhteellisen vakio (kehysalueet) [7] . CDR:ien erittäin suuri vaihtelevuus tarjoaa valtavan valikoiman immunoglobuliineja [8] .

Immunoglobuliinimolekyylin muilla domeenilla on kiinteä rakenne, joten niitä kutsutaan vakio- tai C-domeeneiksi. L-ketju sisältää yhden C-domeenin (merkitty CL: ksi ) ja H-ketju sisältää 3 tai 4 domeenia, joita merkitään CH 1, CH 2, CH 3, CH 4. C-domeenit eivät ole mukana antigeenin tunnistamisessa. ja ne ovat välttämättömiä vuorovaikutuksessa immuunisolureseptorien kanssa, komplementtijärjestelmän ja muiden efektoritoimintojen aktivoimiseksi [3] .

Hypervariaabelien asemien osuus V-domeeneissa on pieni verrattuna suhteellisen muuttumattomiin asemiin ja on 15–20 % kaikista aminohappotähteistä. Lisäksi selkärankaisten evoluutiossa V - domeenit osoittautuivat konservatiivisemmiksi kuin vakioalueet, ja niiden konservatiivisuus liittyy vakioalueisiin. Siten VL - domeenien homologia tiikeri- ja Galapagoshaiden välillä on noin 75 % ja ihmisten ja koirien välillä  noin 50 % [9] .

Vasta-ainetta kutsutaan monospesifiseksi , jos se tunnistaa vain yhden antigeenin tai epitoopin, ja bispesifiseksi, jos se sitoutuu kahteen eri antigeeniin tai kahteen eri epitooppiin yhdessä antigeenissä [10] . Joitakin vasta-aineita kutsutaan polyvalentteiksi tai epäspesifisiksi, jos ne tunnistavat useita antigeenejä [11] .

Proteaasien vaikutuksesta immunoglobuliinimolekyylit pilkkoutuvat fragmenteiksi, joilla on erityiset nimet. Joten papaiini jakaa immunoglobuliinimolekyylin kolmeen fragmenttiin: kahdeksi Fab -fragmentiksi ( englanninkielisestä  Fragmentin antigeenin sitomisesta ) ja yhdeksi Fc -fragmentiksi ( englanninkielisestä  fragmentista kiteytyvä ). Fab-fragmentit sisältävät V-domeeneja sekä CL- ja CH1-domeeneja, kun taas Fc sisältää loput C - domeenit ja niitä yhdistävät disulfidisidokset. Pepsiini katkaisee immunoglobuliinimolekyylin hieman eri tavalla ja tuottaa kaksiarvoisen antigeeniä sitovan F(ab') 2 - fragmentin ja katkaistun Fc'-fragmentin [12] .

C-domeenialue sisältää suurimman osan kohdista, jotka ovat vuorovaikutuksessa solureseptorien, kuten Fc-reseptorien , kanssa . Siten Cy2-domeeni sisältää sitoutumiskohdat komplementtikomponentille C4b sekä FcyRI- ja FcyRII-reseptoreille. FcyRIII-sitoutumiskohta on lokalisoitu Cy3-domeeniin. Vasta-aineen verenkierrossa viipymisen pituus riippuu CH 2 -domeenin rakenteesta [8] . CH1- ja CH2 - domeenien välissä on alue, joka on eripituinen eri isotyyppien H-ketjuissa ja joka ei ole osa domeeneja . Korkean proliinipitoisuuden vuoksi tämä alue on erittäin joustava ja siksi sitä kutsutaan myös sarana-alueeksi. Juuri siinä sijaitsevat kohdat immunoglobuliinien pilkkomiseen proteaasien toimesta [13] .

Vasta-ainemolekyylit käyvät läpi glykosylaatiota , eli ne ovat glykoproteiineja . L-ketjuista puuttuu stabiileja glykosylaatiokohtia, ja H-ketjuissa niitä on kaikissa domeenissa, paitsi vaihtelevassa domeenissa (useimmat ovat CH2 - domeenissa). Vasta-aineissa on enemmän N - glykosylaatiokohtia kuin O-glykosylaatiokohtia . Vasta-aineiden hiilihydraattikomponentti ei vaikuta niiden spesifisyyteen, mutta glykosylaatio on tarpeen molekyylin toiminnallisesti tärkeiden ominaisuuksien stabiloimiseksi, tarjoaa vuorovaikutuksen lektiinien kanssa , määrittää katabolian ominaisuudet ja vasta-aineiden biologiset ominaisuudet. Hiilihydraattifragmentit vasta-ainekoostumuksessa perustuvat useimmiten mannoosi- ja kitosobioositähteisiin [14] .

Luokat

Raskaat ja kevyet ketjut esiintyvät useissa muunnelmissa, jotka eroavat rakenteeltaan ja toiminnaltaan, ja siksi vasta-aineet jaetaan luokkiin tai isotyyppeihin. L-ketjuja on kahta tyyppiä (κ ja λ) ja H-ketjujen viisi isotyyppiä (μ, γ, α, δ ja ε). Yksi immunoglobuliinimolekyyli voi sisältää vain yhden tyypin H-ketjuja. Nisäkkäillä on viisi päätyyppiä vasta-aineita: IgM, IgG, IgA, IgD ja IgE ( vasta-aineluokkien nimien latinalaiset kirjaimet vastaavat kreikkalaisia ​​kirjaimia H-ketjun isotyyppien nimeämisessä). IgG- ja IgA-luokkien immunoglobuliinit jaetaan alaluokkiin (alatyyppeihin) myös H-ketjujen ominaisuuksien mukaan. Kaikkien luokkien immunoglobuliinit voivat kuulua K- ja L-tyyppeihin riippuen siitä, onko niiden koostumuksessa κ- tai λ-tyyppisiä L-ketjuja [15] . H-ketjujen eri isotyypeillä on eri määrä C-domeeneja: γ-, α- ja δ-ketjuissa kussakin on 3 C-domeenia ja μ- ja ε-ketjuissa kukin 4 C-domeenia [8] . Vasta-aineluokat eroavat myös glykosylaatioasteelta, erityisesti IgG-luokan vasta-aineet ovat vähiten glykosyloituneita [14] .

Vasta-aineluokkien pääominaisuudet on lueteltu alla olevassa taulukossa [15] .

Edellä lueteltujen nisäkäsvasta-aineluokkien lisäksi joillakin selkärankaisilla on muita vasta-aineluokkia. Esimerkiksi luisilla kaloilla on erityinen IgT/Z-vasta-aineiden luokka, kun taas sammakkoeläimillä , matelijoilla ja linnuilla on immunoglobuliinit Y (IgY), jotka koostuvat kahdesta raskaasta ja kahdesta kevyestä ketjusta ja kerääntyvät suuria määriä munankeltuaiseen [16] . Kameliperheen rustokaloilla ja nisäkkäillä on raskaan ketjun vasta -aineita, joista puuttuu kevytketju. Rusto- ja kamelien raskaan ketjun vasta-aineiden uskotaan olevan konvergentin evoluution tulosta , ja ne ilmestyivät toiminnallisten ominaisuuksien yhteydessä. Noin 50 % kamelien ja niiden sukulajien vasta-aineista on tyypillisiä nisäkkäiden neliketjuisia vasta-aineita. Ei tiedetä, onko olemassa eläimiä, joilla on vain raskaan ketjun vasta-aineita [17] .

Toiminnot

Vasta-aineiden tärkeimmät toiminnot immuunijärjestelmässä ovat:

• neutralointi , jonka aikana neutraloivat vasta-aineet estävät osan bakteerisolun tai virionin pinnasta ja tekevät niistä inaktiivisia;
• agglutinaatio , jossa vasta-aineet "liimaavat" vieraita soluja kokkareiksi, jotka tuhoutuvat fagosytoosilla ;
• saostus , jonka aikana vasta-aineet keräävät plasmaliukoisia antigeenejä klustereihin, jotka saostuvat ja läpikäyvät fagosytoosin;
• komplementin aktivaatio, jossa vasta-aineet kiinnittyvät patogeenisen solun pintaan, minkä seurauksena komplementtijärjestelmän komponentit voivat hyökätä siihen, aiheuttaa sen hajoamista ja laukaista tulehdusta [18] .

Vieraan solun pintaan sitoutuvat vasta-aineet aktivoivat komplementtikaskadin ensimmäisen komponentin Fc-alueidensa kautta; tätä komplementtiaktivaatiotapaa kutsutaan klassiseksi komplementin aktivaatioreitiksi [19] . Tämän seurauksena vasta-aineilla päällystetty solu voi kuolla kahdella tavalla. Ensinnäkin vasta-aineiden ja komplementin komponenttien sitoutuminen solun pintaan merkitsee sen kohteena fagosyyttien tuhoamiselle, joita jotkin komplementtikaskadin komponentit houkuttelevat soluun. Toiseksi komplementtikomponentit muodostavat solun pinnalle kalvohyökkäyskompleksin, joka aiheuttaa sen kuoleman hajoamisen seurauksena [ 20] .

Estääkseen solunulkoisten patogeenien lisääntymisen vasta-aineet "liimaavat" patogeeniset solut yhteen, mikä saa ne agglutinoitumaan [21] . Koska vasta-aineen minimivalenssi (eli samanaikaisesti sitoutuneiden antigeenien lukumäärä) on kaksi, se voi sitoa kaksi eri soluissa sijaitsevaa antigeenimolekyyliä ja siten yhdistää ne. Päällystämällä patogeenin pinnan vasta-aineet houkuttelevat siihen efektoriimmuunisoluja Fc-alueiden avulla. Soluilla, jotka tunnistavat vasta-aineiden Fc-alueet, on erikoistuneita Fc-reseptoreita (FcR), jotka voivat sitoutua IgA:n, IgG:n ja IgE:n Fc-alueisiin. Solun Fc-reseptorin sitoutuminen vasta-aineella aktivoi sen, mikä fagosyyteissä ilmenee fagosytoosin käynnistämisenä, syöttösoluissa ja neutrofiileissä - degranulaatio , luonnolliset tappajat - sytokiinien ja sytotoksisten molekyylien  vapautuminen , mikä lopulta johtaa mikro- organismin tuhoamiseen . Luonnollisten tappajasolujen aktivoituminen vasta-aineilla laukaisee mekanismin, joka tunnetaan vasta-aineista riippuvaisena soluvälitteisenä sytotoksisuudena [ ( ADCC ) .  Tämä mekanismi saattaa selittää monoklonaalisten vasta-aineiden tehokkuuden syövän hoidossa . Koska Fc-reseptorit ovat spesifisiä vain tietyn isotyypin vasta-aineille, immuunijärjestelmällä on riittävä joustavuus laukaista tietyn tyyppinen immuunivaste tietylle patogeenille [22] .

Ihmisten ja korkeampien kädellisten veriplasmassa on jatkuvasti niin kutsuttuja luonnollisia vasta aineita , jotka muodostuvat ilman aikaisempaa infektiota , rokotusta tai muuta altistumista. Näiden vasta-aineiden ansiosta komplementtijärjestelmä voi laukaista mikro-organismisolujen ja vaipallisten virusvirionien hajoamisen ilman adaptiivisen immuniteetin aiempaa aktivoitumista . Monet luonnolliset vasta-aineet ovat spesifisiä disakkaridigalaktoosi -α(1,3) -galaktoosille (α-Gal), joka on glykosyloituneiden solun pintaproteiinien terminaalinen sokeri . Näiden vasta-aineiden tuotanto käynnistyy vasteena symbioottisten suolistobakteerien α-Gal-synteesiin [23] . Ksenograftin hyljintä voidaan osittain selittää vastaanottajan luonnollisten vasta-aineiden vaikutuksella, jotka hyökkäävät siirteen proteiineissa olevaa α-Gal:ia vastaan ​​[24] .

Aktivoidut B-solut erilaistuvat vasta-aineita erittäviksi plasmasoluiksi tai muisti-B-soluiksi , jotka säilyvät elimistössä pitkään ja tallentavat muistin kehon aiemmin kohtaamista antigeeneistä [18] . Prenataal- ja neonataalikaudella vasta - aineet tulevat vauvan kehoon äidiltä. Oman vasta-aineen tuotannon alkaminen vaihtelee vasta-aineluokkien välillä ja tapahtuu yleensä ensimmäisten elinvuosien aikana [19] .

Edellä mainittujen immuunijärjestelmän toimintojen lisäksi vasta-aineet voivat suorittaa muita, ei-kanonisia rooleja. Joissakin vasta-aineissa aminohappotähteiden koostumus antigeenia sitovassa kohdassa on hyvin samanlainen kuin joidenkin entsyymien aktiivisessa kohdassa , joten vasta-aineet voivat katalysoida tiettyjä kemiallisia reaktioita . Katalyyttistä aktiivisuutta omaavia vasta-aineita kutsutaan abtsyymeiksi . On osoitettu, että katalyyttisen aktiivisuuden omaavien vasta-aineiden synteesi alkaa immunisoinnin jälkeen vastaavien reaktioiden välituotteilla. Kuitenkin katalyyttisen aktiivisuuden suhteen abtsyymit ovat paljon huonompia kuin "todelliset" entsyymit. Ihmisillä, sekä normaaleissa että patologisissa olosuhteissa , havaitaan usein proteolyyttisesti aktiivisia vasta-aineita , jotka pilkkovat patogeeneille spesifisiä molekyylejä. Proteolyyttiset vasta-aineet kuuluvat luokkiin IgG, IgA ja IgM. Jotkut IgM- ja IgG-luokkien vasta-aineet voivat tappaa mikro-organismisoluja yksinään ilman muiden efektorimekanismien osallistumista, mutta niiden vaikutusmekanismi tunnetaan vain harvoissa tapauksissa. Erityisesti on osoitettu, että monoklonaalisten IgM- ja IgG-vasta-aineiden inaktivoituminen aiheuttaa muutoksia geenien ilmentymiseen ja aineenvaihduntaan patogeenisessä sienessä Cryptococcus neoformans sitoutuessaan sen solujen pintaan. Vasta-aineiden sitoutuminen patogeenisen bakteerin Borrelia burgdorferi pintaan aiheuttaa huokosten muodostumista ja solukuolemaa osmoottisen shokin seurauksena . Joskus erilaiset vasta-aineet inaktivoivat patogeenin synergistisellä toiminnalla ilman ylimääräisten efektorireittien osallistumista. IgA-luokan vasta-aineille on kuvattu spesifisiä ei-kanonisia toimintoja. Siten ne voivat välittää bakteerien transepiteliaalista kuljetusta hiiren suolistossa ja säädellä bakteerien metaboliittien pääsyä isäntäsoluihin. Lisäksi vasta-aineet voivat toimia chaperoneina ja erilaisten yhdisteiden kantajina terveessä kehossa [25] .

Monimuotoisuus

Lähes kaikki mikro-organismit voivat saada aikaan immuunivasteen. Patogeenien onnistunut tunnistaminen ja tuhoaminen vaatii laajan valikoiman vasta-aineita, jotka tunnistavat erilaisia ​​antigeenejä [26] . Joidenkin arvioiden mukaan ihmiskehossa muodostuu 10 miljardia erilaista vasta-ainetta, joista jokainen tunnistaa ainutlaatuisen epitoopin [27] . Vaikka jokaisessa yksilössä tuotetaan valtava määrä vasta-aineita, niitä koodaavien geenien määrää rajoittaa genomin koko . On olemassa useita mekanismeja, joiden avulla selkärankaiset voivat saada valtavan määrän erilaisia ​​vasta-aineita suhteellisen pienestä määrästä geenejä [28] .

Verkkotunnuksen vaihtelu

Vasta-aineiden komponentteja koodaavat alueet sijaitsevat useissa ihmisen kromosomeissa . Kromosomissa 14 kootaan raskaan ketjun muunnelmia koodaavat geenit, kevyet ketjut κ ja λ koodataan kromosomeihin 22 ja 2 . Sekä kevyen että raskaan ketjun alueiden muodostamat vaihtelevat domeenit eroavat eri plasmasolujen muodostamien vasta-aineiden välillä. Erot vaihtelevien domeenien välillä vaikuttavat kolmeen silmukkaan, jotka tunnetaan hypervariaabelina alueina (HV-1, HV-2 ja HV-3) tai komplementaarisuuden määräävinä alueina (CDR1, CDR2 ja CDR3). Raskasketjun lokus koodaa 65 vaihtelevaa domeenia erilaisilla CDR:illä. Kunkin näiden varianttien yhdistelmä muita raskaan ketjun domeeneja koodaavien geenien lineaarisessa ryhmässä tarjoaa valtavan valikoiman vasta-aineita. Tämä yhdistelmä syntyy V(D)J-rekombinaation seurauksena, jonka mekanismi on kuvattu alla [29] .

V(D)J-rekombinaatio

V(D)J-rekombinaatioprosessin aikana muodostuu ainutlaatuinen DNA -alue , joka koodaa vaihtelevaa domeenia. Raskaan tai kevyen ketjun variaabelia aluetta koodaa lokus, joka on jaettu useisiin fragmentteihin - alageeneihin, jotka on merkitty V:ksi ( englanninkielisestä  muuttujasta ), D:ksi ( englanniksi  diversity ) ja J ( englanniksi  joining ) [28] . V-, D- ja J-alageenit koodaavat raskaan ketjun vaihtelevaa aluetta, kun taas kevyen ketjun vaihteleva alue koodaa alageenejä V ja J. Kutakin alageeniä edustavat useat variantit, jotka on järjestetty peräkkäin peräkkäin kromosomiin . Luuytimessä B - solun kypsymisen aikana sen vaihtelevia domeeneja koodaavissa lokuksissa tapahtuu uudelleenjärjestelyjä, joiden seurauksena lokukseen jää yksi variantti V-, D- ja J-alageenistä ja loput variantit pysyvästi. poistettu genomista. Koska jokainen alageeni on läsnä useissa muunnelmissa, niiden yhdistelmät tuottavat vasta-aineita, joilla on erilaiset antigeenispesifisyydet. Tärkeä rooli V(D)J-rekombinaatiossa on RAG -proteiineilla , jotka aiheuttavat katkoksia tietyille alueille, ja niiden puuttuessa V(D)J-rekombinaatio on mahdotonta [30] . Kun yksittäinen toiminnallinen geeni, joka koodaa B-solugenomin raskaiden ja kevyiden ketjujen variaabelia domeenia, on kypsynyt, loput vaihtelevia domeeneja koodaavat lokukset lakkaavat ilmentymästä ( alleelinen poissulkeminen ), joten jokainen B-solu voi tuottaa vasta-aineita vain yhdellä muuttuva verkkotunnus [22] [31] .

Somaattinen hypermutaatio

Kun B-solut aktivoituvat antigeenillä, ne lisääntyvät nopeasti . Samanaikaisesti raskaiden ja kevyiden ketjujen hypervariaabelia domeeneja koodaavien lokusten toistuvien jakautumisen kanssa havaitaan lisääntynyttä pistemutaatioiden esiintymistiheyttä . Tätä prosessia kutsutaan somaattiseksi hypermutaatioksi . Somaattista hypermutaatiota tapahtuu noin yhden mutatoidun vaihtelevan domeenin nukleotidin nopeudella solujakautumista kohti [32] . Tämän prosessin seurauksena jakautumisesta syntyvät tytärsolut tuottavat vasta-aineita, joilla on hieman erilaiset vaihtelevat domeenit. Näin ollen somaattinen hypermutaatio toimii toisena mekanismina vasta-aineiden monimuotoisuuden lisäämiseksi ja vaikuttaa vasta-aineiden affiniteetiin antigeeniin [33] . Jotkut mutaatiot vähentävät vasta-aineen affiniteettia tiettyyn antigeeniin, kun taas toiset päinvastoin lisäävät [34] . Ne B-solut, jotka ilmentävät vasta-aineita, joilla on korkea affiniteetti antigeeniin, saavat voimakkaita eloonjäämissignaaleja vuorovaikutuksessa muiden solujen kanssa, eivätkä ne joudu apoptoosiin . Tästä syystä B-soluilla, jotka koodaavat vasta-aineita, joilla on korkea affiniteetti antigeeniin, on kilpailuetu B-soluihin, jotka koodaavat vasta-aineita alhaisemmalla affiniteetilla, ja affiniteetti antigeeniin kasvaa jokaisen B-solun jakautumisen myötä. Antigeeniaffiniteetin asteittainen lisääntyminen ja parhaan affiniteetin omaavien B-solujen valinta tapahtuu T-auttajien osallistuessa V(D)J-rekombinaation jälkeen [35] .

Luokkien vaihto

Vasta-aineluokkien vaihto tapahtuu B-solun aktivoitumisen jälkeen ja mahdollistaa sen, että se voi tuottaa eri luokkien vasta-aineita (IgA, IgE tai IgG) [30] . Eri luokkien vasta-aineiden väliset erot liittyvät raskaan ketjun C-domeeneihin. Aluksi naiivit B-solut vain IgM- tai IgD-pinnan immunoglobuliineja, joilla on sama antigeenispesifisyys. Koska jokainen isotyyppi liittyy tiettyyn toimintoon, plasmasolun täytyy aktivoituaan tuottaa IgG-, IgA- tai IgE-vasta-aineita vastustaakseen tehokkaasti patogeeniä. Luokanvaihdon kautta samasta B-solusta peräisin olevat eri tytärsolut voivat tuottaa eri isotyyppisiä vasta-aineita. Luokanvaihdon aikana muutoksia tapahtuu vain raskaan ketjun C-alueissa. Siksi yhden B-solun jälkeläiset voivat tuottaa eri luokkien vasta-aineita, mutta joilla on sama antigeenispesifisyys. Luokkavaihto tapahtuu tiettyjen sytokiinien vaikutuksesta [36] .

Luokkavaihdon aikana tapahtuu uudelleenjärjestelyjä raskaita ketjuja koodaavassa lokuksessa. Prosessi vaatii konservoituneita nukleotidimotiiveja , jotka tunnetaan S-kohtina ( englanninkielisestä  kytkimestä ), jotka sijaitsevat kunkin raskaita ketjuja koodaavan lokuksen yläpuolella (ainoat poikkeukset ovat δ-tyypit). Lisäksi erityiset entsyymit tekevät DNA:ssa kaksi katkosta kahdessa S-kohdassa [37] [38] . Tämän seurauksena kahden katkoksen välinen fragmentti poistetaan ja kaksisäikeinen katkeaminen vakioalueella korjataan käyttämällä ei-homologista pääteliitosta [39] .

Koulutus ja eritys

Vasta-aineita erittävät erityiset B-solut - plasmasolut. Kuten useimmat eritetyt proteiinit , immunoglobuliinin raskaita ja kevyitä ketjuja syntetisoivat ribosomit , jotka sijaitsevat karkeassa endoplasmisessa retikulumissa (ER). Synteesin aikana syntynyt polypeptidiketju menee ER-onteloon, jossa se käy läpi glykosylaation. Raskaiden ketjujen oikeaa laskostumista ja sitoutumista kevyisiin ketjuihin vasta-aineiden muodostamiseksi säätelevät EPR-chaperonit, kuten calnexin ja BiP . Ne sitoutuvat äskettäin syntetisoituihin immunoglobuliinipolypeptideihin ja suojaavat niitä hajoamiselta niin kauan kuin ne saavat oikean rakenteen. Myös ER-ontelossa vasta-aine kootaan johtuen disulfidisidosten muodostumisesta raskaiden ja kevyiden ketjujen välille. Kokoamisen jälkeen vasta-ainemolekyylit vapautuvat chaperoneista ja siirtyvät Golgin laitteeseen , jossa niiden hiilihydraattijäännökset käsitellään lisäkäsittelyssä. Kypsiä vasta-aineita sisältävät rakkulat irtoavat Golgin laitteesta ja fuusioituvat solukalvon kanssa, minkä jälkeen vasta-aineiden kalvomuodot jäävät ankkuroituina solukalvoon ja vapaat vasta-aineet tulevat solujen väliseen tilaan [40] .

Kun B-solut kypsyvät luuytimessä, immunoglobuliinin ilmentyminen käy läpi sarjan muutoksia. B-solulinjan varhaisimmat solut, pre-B-solut, syntetisoivat vain kalvoon sitoutuneita muotoja μ-luokan raskaista ketjuista. Nämä ketjut muodostavat kompleksin proteiinien kanssa, joita kutsutaan korvikekevyiksi ketjuiksi, ja muodostavat pre-B-solureseptorin , josta pieni osa paljastuu B-solun pinnalla. Epäkypsät ja kypsät B-solut syntetisoivat κ- ja λ-luokkien kevyitä ketjuja, jotka yhdistettynä μ-luokan raskaisiin ketjuihin muodostavat IgM-vasta-aineita. Kypsät B-solut ilmentävät IgM- ja IgD-kalvomuotoja, jotka toimivat reseptoreina, jotka tunnistavat antigeenejä ja laukaisevat B-soluaktivaation. Pre-B-solureseptorit ja B-solureseptorit liittyvät ei-kovalenttisesti integriineihin , joiden signalointitoiminnot ovat välttämättömiä IgM:n ja IgD:n pintamuotojen ilmentymiselle [41] .

Kun B-solut aktivoituvat antigeenien ja muiden ärsykkeiden vaikutuksesta, ne muuttuvat vasta-aineita erittäviksi plasmasoluiksi. Siirtyessään plasmasoluihin erittyneiden immunoglobuliinien osuus kalvosoluihin verrattuna kasvaa dramaattisesti. Lisäksi samaan aikaan tapahtuu vasta-aineluokan vaihtoa ja solu lakkaa syntetisoimasta IgM:tä ja IgD:tä, mutta alkaa erittää IgA:ta, IgE:tä tai IgG:tä [42] .

Evoluutio

Mukautuva immuniteetti ja vasta-aineet kehittyivät selkärankaisilla noin 500 miljoonaa vuotta sitten [43] . Vanhimmat vasta-aineluokat ovat luultavasti IgM ja IgD, ja IgD-vasta-aineita, joita löytyy melkein kaikista selkärankaisista, jopa rustokaloista, pidetään vanhimpana vasta-aineluokkana (rustokalojen IgD-vasta-aineita kutsutaan joskus IgW:ksi; W vastaa kreikan kieltä kirjain ω ). On kuitenkin myös selkärankaisia, jotka ovat menettäneet IgD:n, kuten linnut ja useat nisäkäslajit . Samaan aikaan nisäkkäille tyypillisiä IgA-, IgE- ja IgG-luokkia ei ole kaikissa selkärankaisten ryhmissä. Erityisesti luisista kaloista puuttuu IgA, IgE ja IgD, mutta on olemassa lisäluokka IgT (tai IgZ) vasta-aineita, joita muilta selkärankaisilla puuttuu. Vasta-aineet IgT (T vastaa kreikkalaista kirjainta τ ) todennäköisesti suojaavat kalojen limakalvoja [44] . Epätavallisia vasta-aineluokkia on myös muissa selkärankaisissa, kuten raskaan ketjun vasta-aineita rustokaloissa ja kamelikoissa, sekä IgY sammakkoeläimissä, matelijoissa ja linnuissa [16] [17] .

Vasta-aineiden rakenteen ennustaminen ja tietokonesuunnittelu

Jotta vasta-aineita voidaan käyttää lääketieteessä ja biotekniikassa , on tiedettävä niiden rakenne korkealla resoluutiolla . Tietoa vasta-aineiden rakenteesta käytetään laajalti vasta-aineiden proteiinimuokkauksessa, niiden kykyä sitoa antigeenejä modifioinnissa ja yksittäisten vasta-aineepitooppien tunnistamisessa. Yksi laajalti käytetty vasta-ainerakenteiden määrittämiseen käytetty menetelmä on röntgendiffraktioanalyysi , mutta vasta-aineiden kiteytys on kuitenkin erittäin pitkä ja työläs prosessi, minkä vuoksi vasta-ainerakenteiden ennustaminen laskennallisilla menetelmillä on laajalle levinnyt. Ennuste ei kuitenkaan anna tarkkaa tietoa rakenteesta. Muuttuvan domeenin rakenteiden tietokonemallinnus voidaan suorittaa käyttämällä WAM (Web Antibody Modeling) [45] ja Prediction of Immunoglobulin Structure (PIGS) [46] ohjelmia . Vaihtelevien domeenien rakennetta voidaan ennustaa myös Rosetta-palvelulla, jossa CDR:iä vastaavien silmukoiden pituus minimoidaan erikoismenetelmin ennustamisen aikana, kevyiden ja raskaiden ketjujen sijainti suhteessa toisiinsa optimoidaan ja mallit ovat rakennettu, joka ennustaa vasta-aineiden telakoitumista ainutlaatuisiin antigeeneihinsä [47] . On olemassa useita ohjelmia, jotka suorittavat tietokoneavusteisen vasta-aineiden suunnittelun CDR:ien bioinformaattisten tutkimusten tulosten perusteella [48] [49] [50] .

Yksi tehokkaimmista menetelmistä tunnistaa peptidejä ja proteiineja, mukaan lukien vasta-aineet, on nestekromatografia , joka liittyy tandem - massaspektrometriaan [51] . Korkean suorituskyvyn menetelmät vasta-aineiden aminohapposekvenssien sekvensointiin vaativat erityisiä laskennallisia lähestymistapoja tietojen analysointiin , mukaan lukien de novo -sekvensointi massaspektrometriatiedoista [52] , sekä lähestymistavat proteiinisekvenssejä sisältävien tietokantojen etsimiseen [53] . [54] . Aminohapposekvensoinnille erityisen tärkeä on haulikkomenetelmä, jonka kattavuutta lisää fragmentointi CID/HCD/ETD-menetelmillä [55] . On olemassa menetelmiä aminohapposekvenssien määrittämiseksi, jotka vaativat samankaltaisten proteiinien sekvenssejä [56] tai tunnetun genomisekvenssin [57] . Nykyaikaisilla sekvensointitekniikoilla voidaan koota proteiinisekvenssejä erittäin tarkasti yhdistämällä de novo -peptidisekvensointi , intensiteetti ja sijaintiluottamuspisteet, jotka on saatu tietokannan homologihauista [58] .

Lääketieteelliset sovellukset

Diagnostiikka

Spesifisten vasta-aineiden havaitseminen ja pitoisuuden määrittäminen veressä on melko yleinen lääketieteellisen diagnoosin menetelmä [59] . Esimerkiksi Lymen tautia aiheuttavan Epstein-Barr-viruksen tai Borrelia burgdorferi -bakteerin esiintyminen kehossa määräytyy niitä vastaan ​​olevien vasta -aineiden tiitterin perusteella. Jos vastaavia vasta-aineita ei pystytty havaitsemaan, potilas ei ole joko koskaan tavannut näitä taudinaiheuttajia tai on tavannut niitä hyvin pitkään, ja niitä vastaan ​​vasta-aineita tuottavat plasmasolut ovat jo kadonneet [60] .

Kliinisessä immunologiassa potilaan vasta-aineprofiilia karakterisoidaan määrittämällä eri luokkien vasta-ainepitoisuudet nefelometrian avulla [61] . Joidenkin vasta-aineluokkien lisääntyminen voi olla hyödyllistä maksavaurion syiden tunnistamisessa, kun tarkkaa diagnoosia ei voida tehdä. Siten kohonnut IgA-pitoisuus viittaa alkoholiperäiseen maksakirroosiin, IgM-tason nousu puhuu virushepatiitin ja primaarisen maksakirroosin puolesta ja IgG-tason nousu virushepatiitissa, autoimmuunisairauksissa ja kirroosissa [62 ] .

Autoimmuunitautien kehittyminen liittyy vasta-aineiden muodostumiseen, jotka tunnistavat organismin epitoopit (autovasta-aineet). Ne voidaan havaita verikokeella. Punasolujen pinta-antigeenejä vastaan ​​vaikuttavat vasta -aineet aiheuttavat hemolyyttistä anemiaa ja ne voidaan havaita Coombsin testillä . Coombsin reaktio suoritetaan myös vasta-aineiden seulonnassa verensiirroissa ja raskaana oleville naisille [63] .

Antigeenien ja vasta-aineiden välisen vuorovaikutuksen periaatetta käytetään immunodiagnostisissa menetelmissä, kuten entsyymi-immunomääritys , immunofluoresenssianalyysi , Western blot , immunodiffuusio , immunoelektroforeesi ja magneettinen immunomääritys . Vasta-aineiden merkitseminen radioaktiivisella fluori - 18F -isotoopilla mahdollistaa niiden käytön syöpäkasvainten visualisoinnissa positroniemissiotomografialla [64] .

Sairauksien hoito

Monoklonaalisia vasta-aineita käytetään nivelreuman [65] , multippeliskleroosin [66] , psoriaasin [67] ja monien syöpien, mukaan lukien non-Hodgkinin lymfoomien [68] , paksusuolensyövän , pään ja kaulan syövän sekä rintasyövän [69] , hoitoon .

Monet immuunipuutokset, kuten Brutonin tauti ja hypogammaglobulinemia , liittyvät täydelliseen tai osittaiseen vasta-aineiden puuttumiseen [70] . Näistä sairauksista kärsiville potilaille tarjotaan passiivinen immuniteetti antamalla keinotekoisesti vasta-aineita [71] .

Prenataalinen terapia

Ihmisillä Rh- tekijänä (Rh) tunnettu antigeeni on läsnä punasoluissa. Synnytyksen tai raskauden komplikaatioiden aikana sikiön veri voi päästä äidin verenkiertoon, ja jos lapsi on Rh-positiivinen ja äiti negatiivinen, äidin elimistöön muodostuu vasta-aineita Rh-tekijää vastaan. Myöhemmissä raskauksissa, joissa on Rh-positiivinen sikiö, he voivat hyökätä siihen, mikä johtaa vastasyntyneen hemolyyttiseen keltaisuuteen [72] . Rh- konfliktin estämiseksi Rh-negatiivisia naisia, jotka ovat raskaana Rh-positiivisen sikiön kanssa, ruiskutetaan keinotekoisesti Rh-tekijän vasta-aineita ( Rho (D)-immunoglobuliini ). Rho(D)-immunoglobuliinin käyttöönotto on tehtävä ennen kuin sikiön Rh-tekijä aktivoi äidin B-soluja ja laukaisee adaptiivisen immuunivasteen ja muisti -B-solujen muodostumisen [73] .

Sovellus tieteellisessä tutkimuksessa

Tietylle antigeenille spesifisiä vasta-aineita voidaan saada viemällä antigeeni nisäkkääseen (hiiri, rotta , kani , vuohi , lammas , hevonen ) ja sitten eristämällä siitä suuri määrä vasta-aineita. Immunisoidusta eläimestä eristetty veri sisältää polyklonaalisia vasta-aineita , eli useita eri vasta-aineita, jotka ovat spesifisiä samalle antigeenille. Polyklonaalisia vasta-aineita voidaan saada myös ruiskuttamalla antigeeni kehittyvän kananmunan munankeltuaiseen [ 76] . Jotta saataisiin vasta-aineita, jotka tunnistavat tiukasti määritellyn epitoopin antigeenin koostumuksesta, plasmasolut, jotka erittävät vasta-aineita antigeenille, eristetään eläimestä ja tehdään kuolemattomaksi ne syöpäsolujen kanssa . Soluja, jotka on saatu fuusioimalla plasmasolut syöpäsolujen kanssa, kutsutaan hybridoomiksi , ja ne erittävät jatkuvasti haluttuja vasta-aineita lisääntyen soluviljelmässä. Yksittäisistä hybridoomista saadaan identtisiä vasta-aineita, joita kutsutaan monoklonaaliksi [77] . Polyklonaaliset ja monoklonaaliset vasta-aineet puhdistetaan usein käyttämällä proteiini A/G:tä tai affiniteettikromatografiaa [78] .

Puhdistetut vasta-aineet ovat löytäneet monia käyttötarkoituksia tutkimusprosessissa. Monien antigeenien vasta-aineita voi ostaa kaupallisilta yrityksiltä. Tutkimuksessa vasta-aineita käytetään yleisimmin lokalisoimaan solun ja solunulkoisia proteiineja. Niitä käytetään myös virtaussytometriassa solujen erottamiseen sen perusteella, mitä proteiineja ne ilmentävät [79] . Vasta-aineita käytetään erottamaan proteiineja ja niihin liittyviä molekyylejä muusta solulysaatista immunosaostuksella [80] , tunnistamaan geelielektroforeesilla erotettuja proteiineja Western blot -menetelmällä [81] . Vasta-aineet muodostavat perustan immunofluoresenssille ja immunohistokemialle , jotka tutkivat kiinnostavien proteiinien ilmentymistä ja lokalisoitumista soluissa ja kudoksissa [79] [82] . Vasta-aineita voidaan käyttää havaitsemaan ja arvioimaan proteiinien pitoisuutta erityisesti käyttämällä entsyymi-immunomääritystä ja ELISpot-menetelmää [83] [84] .

Lukuisista sovelluksista huolimatta vasta-aineiden kanssa työskentely on melko työlästä, koska kokeen tulokseen vaikuttavat monet tekijät, joita on kontrolloitava, erityisesti jotka vaikuttavat vasta-aineen affiniteettiasteeseen antigeenin pH :ta kohtaan , liuottimeen, kudostilaan ja muut. On ollut monia yrityksiä parantaa tapaa, jolla tutkijat validoivat vasta-aineita [85] [86] . Vasta-aineiden kanssa työskentelevien tutkijoiden on kirjattava huolellisesti koeolosuhteet, jotta muut tutkijat voivat toistaa ne [87] .

Vasta-ainemimeetit

Vasta-ainemimeetit ovat orgaanisia yhdisteitä , jotka, kuten vasta-aineet, voivat sitoa spesifisesti antigeenejä. Yleensä vasta-ainemimeetit ovat keinotekoisia peptidejä, joiden massa on 3-20 kDa. Joskus nukleiinihapot ja pienet molekyylit toimivat vasta-ainemimeetteinä, mutta ne eivät voi olla keinotekoisia vasta-aineita, vasta-ainefragmentteja tai niiden kovalenttisesti kytkettyjä yhdistelmiä. Toisin kuin vasta-aineilla, niiden jäljittelijöillä on yleensä parempi liukoisuus, parempi kudosten tunkeutuminen, parempi stabiilisuus lämpötilaa ja entsyymejä vastaan, ja ne ovat halvempia kuin todelliset vasta-aineet. Jotkut vasta-ainemimeetit, kuten Affimer ja DARPin , on rekisteröity käytettäväksi tutkimus-, terapeuttisissa ja diagnostisissa sovelluksissa [88] .

Opiskeluhistoria

Termi "vasta-aine" ( saksa:  Antikörper ) esiintyy ensimmäisen kerran Paul Ehrlichin kirjoituksissa . Erityisesti termi " Antikörper " löytyy hänen lokakuussa 1891 ilmestyneen artikkelinsa "An Experimental Study of Immunity" päätöksestä. Tässä työssä todetaan, että "jos kaksi ainetta aiheuttavat kahden erilaisen Antikörperin vapautumisen, ne ovat myös erilaisia." Termi Antikörper ei kuitenkaan vallannut aluksi, ja vasta-aineille ehdotettiin useita muita termejä: Immunkörper, Amboceptor, Zwischenkörper, substanssi sensibilisatrice, copula, Desmon, philocytasase, fixateur ja Immunisin [89] .

Vasta-aineiden tutkimus alkoi vuonna 1890, kun Kitasato Shibasaburo ja Emil Adolf von Behring kuvasivat kurkkumätä- ja tetanustoksiinin vasta-aineiden vaikutuksia [90] . Shibasaburo kehitti humoraalisen immuniteetin teorian ja ehdotti, että veriseerumissa on tietty välittäjä, joka voi olla vuorovaikutuksessa vieraiden antigeenien kanssa [91] . Paul Ehrlich esitti Sibasaburon ajatusten pohjalta vuonna 1897 sivuketjujen teorian selittäen vasta-aineiden ja antigeenien vuorovaikutuksen periaatteet. Hän ehdotti, että solun pinnalla olevat reseptorit ("sivuketjut") voivat olla spesifisesti vuorovaikutuksessa toksiinien kanssa "key-lock"-periaatteen mukaisesti, ja reseptorin vuorovaikutus toksiinin kanssa laukaisee vasta-aineiden tuotannon [92] . Muut tutkijat ovat ehdottaneet, että vasta-aineet liikkuvat vapaasti verenkierrossa. Vuonna 1904 Almroth Wright ehdotti, että vasta-aineet peittävät bakteerisolujen pinnan ohjaten ne fagosytoosiin ja tuhoutumiseen; tämä prosessi tunnetaan nykyään nimellä opsonointi [93] .

1920-luvulla Michael Heidelberg ja Oswald Avery pystyivät havaitsemaan, että vasta-aineet voivat saostaa antigeenejä, ja osoittivat, että vasta-aineet ovat proteiinipitoisia [94] . John Marrak [95] tutki yksityiskohtaisesti vasta-aineiden ja antigeenien vuorovaikutuksen biokemiallisia piirteitä 1930-luvun lopulla . Vuonna 1937 immunoglobuliinit eräänlaisina proteiineina tunnistettiin geelielektroforeesilla veriseerumin γ- ja β-globuliinien fraktioista [90] . 1940-luvulla Linus Pauling vahvisti Ehrlichin hypoteesin antigeenien ja vasta-aineiden välisestä lukko-avain-vuorovaikutuksesta ja osoitti, että vasta-aineen ja antigeenin välinen vuorovaikutus riippuu enemmän antigeenin tilakonfiguraatiosta kuin sen kemiallisesta koostumuksesta [96] . Vuonna 1948 Astrid Fagreus osoitti, että plasmasolut, eräänlainen B-lymfosyytti, erittävät vasta-aineita [97] .

Jatkotutkimus keskittyi vasta-aineiden rakenteen tutkimiseen. 1960-luvun alussa Gerald Edelman ja Joseph Galli kuvasivat vasta-aineen kevytketjua [98] ja osoittivat, että kevyt ketju on Bence Jones -proteiini , jonka Henry Bence Jones kuvasi vuonna 1845 [99] . Myöhemmin Edelman osoitti, että vasta-aineet koostuvat kahdesta raskaasta ja kahdesta kevyestä ketjusta, joita pitävät yhdessä disulfidisidokset. Suunnilleen samaan aikaan Rodney Porter kuvasi Fab- ja Fc-alueita IgG-molekyyleissä [100] . Yhdessä nämä tutkijat kuvasivat IgG:n rakenteen ja täydellisen aminohapposekvenssin, josta heille myönnettiin fysiologian tai lääketieteen Nobel-palkinto vuonna 1972 [100] . Fv-fragmentin puhdisti ja kuvasi David Givol [101] . Varhainen vasta-ainetutkimus keskittyi IgG:hen ja IgM:ään, ja uusia immunoglobuliini-isotyyppejä tunnistettiin 1960-luvulla. Thomas Tomashi kuvasi erittäviä IgA-vasta-aineita [102] , David Rove ja John Fey löysivät IgD :n [103] ja Kimishige Ishizaka ja Teruko Ishizaka löysivät IgE:n ja havaitsivat, että nämä vasta-aineet osallistuvat allergisten reaktioiden kehittymiseen [104] ] . Vuonna 1976 Suzumi Tonegawa aloitti sarjan kokeita, jotka osoittivat, että vasta-aineita koodaavat geenit käyvät läpi uudelleenjärjestelyjä, jotka luovat valtavan valikoiman vasta-aineita [105] . Vuonna 1987 Tonegawa sai Nobelin fysiologian tai lääketieteen palkinnon vasta-aineiden monimuotoisuuden mekanismien löytämisestä [106] .

1970-luvulla homogeenisten kasvainantigeenien tutkimuksen tuloksena kehitettiin hybridoomatekniikka, jonka ansiosta oli mahdollista saada tietyn spesifisyyden omaavia monoklonaalisia vasta-aineita [3] .

Katso myös

• Monoklonaaliset vasta-aineet
• Vasta-aineriippuvainen infektion lisääntyminen

Muistiinpanot

1. ↑ Roit et ai., 2000 .
2. ↑ Roit et al., 2000 , Immunoglobuliinit ovat erityinen proteiiniperhe.
3. ↑ 1 2 3 Yarilin, 2010 , s. 232.
4. ↑ Barclay AN Kalvoproteiinit, joissa on immunoglobuliinin kaltaisia ​​domeeneja – vuorovaikutusmolekyylien pääsuperperhe.  (Englanti)  // Seminaarit Immunologiassa. - 2003. - elokuu ( osa 15 , nro 4 ). - s. 215-223 . - doi : 10.1016/s1044-5323(03)00047-2 . — PMID 14690046 .
5. ↑ Yarilin, 2010 , s. 235.
6. ↑ Al-Lazikani B. , Lesk AM , Chothia C. Standardikonformaatiot immunoglobuliinien kanonisille rakenteille.  (Englanti)  // Journal Of Molecular Biology. - 1997. - 7. marraskuuta ( nide 273 , nro 4 ). - s. 927-948 . - doi : 10.1006/jmbi.1997.1354 . — PMID 9367782 .
7. ↑ Yarilin, 2010 , s. 238.
8. ↑ 1 2 3 Yarilin, 2010 , s. 239.
9. ↑ Galaktionov, 2004 , s. 61.
10. ↑ Spiess C. , Zhai Q. , ​​Carter PJ Bispesifisten vasta-aineiden vaihtoehtoiset molekyylimuodot ja terapeuttiset sovellukset.  (englanniksi)  // Molecular Immunology. - 2015. - lokakuu ( osa 67 , nro 2 Pt A ). - s. 95-106 . - doi : 10.1016/j.molimm.2015.01.003 . — PMID 25637431 .
11. ↑ Farlex-sanakirja > moniarvoinen. Lainaus: American Heritage Medical Dictionary. 2004_ _ Haettu 17. huhtikuuta 2020. Arkistoitu alkuperäisestä 21. maaliskuuta 2021. (määrätön)
12. ↑ Yarilin, 2010 , s. 232-233.
13. ↑ Yarilin, 2010 , s. 239-240.
14. ↑ 1 2 Yarilin, 2010 , s. 240.
15. ↑ 1 2 Yarilin, 2010 , s. 234-235.
16. ↑ 1 2 Lanzarini NM , Bentes GA , Volotão EM , Pinto MA Kanan immunoglobuliini Y:n käyttö yleisessä virologiassa.  (Englanti)  // Journal Of Immunoassay & Immunochemistry. - 2018. - Vol. 39 , ei. 3 . - s. 235-248 . - doi : 10.1080/15321819.2018.1500375 . — PMID 30044696 .
17. ↑ 12 nanokappaletta . _ Nanobody.org. Haettu 29. toukokuuta 2022. Arkistoitu alkuperäisestä 16. helmikuuta 2021. (määrätön)
18. ↑ 1 2 Borghesi L. , Milcarek C. B-solusta plasmasoluun: V(D)J-rekombinaation ja vasta-aineerityksen säätely.  (englanniksi)  // Immunologic Research. - 2006. - Voi. 36 , ei. 1-3 . - s. 27-32 . - doi : 10.1385/IR:36:1:27 . — PMID 17337763 .
19. ↑ 1 2 Ravetch JV , Bolland S. IgG Fc-reseptorit.  (englanniksi)  // Annual Review Of Immunology. - 2001. - Voi. 19 . - s. 275-290 . - doi : 10.1146/annurev.immunol.19.1.275 . — PMID 11244038 .
20. ↑ Rus H. , Cudrici C. , Niculescu F. Komplementtijärjestelmän rooli synnynnäisessä immuniteetissa.  (englanniksi)  // Immunologic Research. - 2005. - Voi. 33 , ei. 2 . - s. 103-112 . - doi : 10.1385/IR:33:2:103 . — PMID 16234578 .
21. ↑ Pier GB, Lyczak JB, Wetzler LM Immunologia, infektiot ja immuniteetti . - A.S.M. Press, 2004. - ISBN 978-1-55581-246-1 .
22. ↑ 1 2 Murphy, Weaver, 2017 , s. 399-445.
23. ↑ Racaniello, Vincent. Luonnollinen vasta-aine suojaa virusinfektiolta . Virologiablogi (6. lokakuuta 2009). Käyttöpäivä: 22. tammikuuta 2010. Arkistoitu alkuperäisestä 20. helmikuuta 2010. (määrätön)
24. ↑ Milland J. , Sandrin MS ABO veriryhmä ja siihen liittyvät antigeenit, luonnolliset vasta-aineet ja transplantaatio.  (englanniksi)  // Tissue Antigens. - 2006. - Joulukuu ( osa 68 , nro 6 ). - s. 459-466 . - doi : 10.1111/j.1399-0039.2006.00721.x . — PMID 17176435 .
25. ↑ Dimitrov JD , Lacroix-Desmazes S. Ei- kanoniset vasta-aineiden toiminnot.  (englanti)  // Trends In Immunology. - 2020 - 6 huhtikuuta. - doi : 10.1016/j.it.2020.03.006 . — PMID 32273170 .
26. ↑ Mian IS , Bradwell AR , Olson AJ Vasta-aineen sitoutumiskohtien rakenne, toiminta ja ominaisuudet.  (Englanti)  // Journal Of Molecular Biology. - 1991. - 5. tammikuuta ( nide 217 , nro 1 ). - s. 133-151 . - doi : 10.1016/0022-2836(91)90617-f . — PMID 1988675 .
27. ↑ Fanning LJ , Connor AM , Wu GE Immunoglobuliinirepertuaarin kehittäminen.  (englanti)  // Kliininen immunologia ja immunopatologia. - 1996. - huhtikuu ( osa 79 , nro 1 ) . - s. 1-14 . - doi : 10.1006/clin.1996.0044 . — PMID 8612345 .
28. ↑ 1 2 Nemazee D. Reseptorien muokkaus lymfosyyttien kehityksessä ja keskustoleranssi.  (englanniksi)  // Luontoarvostelut. Immunologia. - 2006. - lokakuu ( osa 6 , nro 10 ). - s. 728-740 . doi : 10.1038 / nri1939 . — PMID 16998507 .
29. ↑ Peter Parham. Immuunijärjestelmä . - 2. painos - New York: Garland Science, 2005. - P.  47-62 .
30. ↑ 1 2 Market E. , Papavasiliou FN V(D)J rekombinaatio ja adaptiivisen immuunijärjestelmän kehitys.  (englanniksi)  // PLoS-biologia. - 2003. - lokakuu ( osa 1 , nro 1 ). - s. 16-16 . - doi : 10.1371/journal.pbio.0000016 . — PMID 14551913 .
31. ↑ Bergman Y. , Cedar H. Vaiheittainen epigeneettinen prosessi kontrolloi immunoglobuliinin alleelista poissulkemista.  (englanniksi)  // Luontoarvostelut. Immunologia. - 2004. - lokakuu ( osa 4 , nro 10 ). - s. 753-761 . - doi : 10.1038/nri1458 . — PMID 15459667 .
32. ↑ Diaz M. , Casali P. Somatic immunoglobulin hypermutation.  (englanniksi)  // Current Opinion In Immunology. - 2002. - huhtikuu ( osa 14 , nro 2 ) . - s. 235-240 . - doi : 10.1016/s0952-7915(02)00327-8 . — PMID 11869898 .
33. ↑ Honjo T. , Habu S. Immuunimonimuotoisuuden alkuperä: geneettinen variaatio ja valinta.  (Englanti)  // Annual Review Of Biochemistry. - 1985. - Voi. 54 . - s. 803-830 . - doi : 10.1146/annurev.bi.54.070185.004103 . — PMID 3927822 .
34. ↑ Or-Guil M. , Wittenbrink N. , Weiser AA , Schuchhardt J. Sukukeskuksen B-solujen kierrätys: monitasoinen valintastrategia vasta-aineen kypsymiseen.  (englanniksi)  // Immunological Reviews. - 2007. - huhtikuu ( osa 216 ). - s. 130-141 . - doi : 10.1111/j.1600-065X.2007.00507.x . — PMID 17367339 .
35. ↑ Neuberger MS , Ehrenstein MR , Rada C. , Sale J. , Batista FD , Williams G. , Milstein C. Muisti B-soluosastossa: vasta-aineaffiniteettikypsyminen.  (englanniksi)  // Lontoon kuninkaallisen seuran filosofiset tapahtumat. Sarja B, biologiset tieteet. - 2000. - 29. maaliskuuta ( nide 355 , nro 1395 ). - s. 357-360 . - doi : 10.1098/rstb.2000.0573 . — PMID 10794054 .
36. ↑ Stavnezer J. , Amemiya CT Evolution of isotype switching.  (Englanti)  // Seminaarit Immunologiassa. - 2004. - elokuu ( osa 16 , nro 4 ) - s. 257-275 . - doi : 10.1016/j.smim.2004.08.005 . — PMID 15522624 .
37. ↑ Durandy A. Aktivaation aiheuttama sytidiinideaminaasi: kaksoisrooli luokanvaihtorekombinaatiossa ja somaattisessa hypermutaatiossa.  (Englanti)  // European Journal Of Immunology. - 2003. - elokuu ( osa 33 , nro 8 ). - s. 2069-2073 . - doi : 10.1002/eji.200324133 . — PMID 12884279 .
38. ↑ Casali P. , Zan H. Luokanvaihto ja Myc-translokaatio: miten DNA hajoaa?  (englanniksi)  // Nature Immunology. - 2004. - marraskuu ( osa 5 , nro 11 ). - s. 1101-1103 . - doi : 10.1038/ni1104-1101 . — PMID 15496946 .
39. ↑ Lieber MR , Yu K. , Raghavan SC Ei-homologisen DNA-pään liittämisen roolit, V(D)J-rekombinaatio ja luokanvaihtorekombinaatio kromosomaalisissa translokaatioissa.  (englanniksi)  // DNA Repair. - 2006. - 8. syyskuuta ( osa 5 , nro 9-10 ). - s. 1234-1245 . - doi : 10.1016/j.dnarep.2006.05.013 . — PMID 16793349 .
40. ↑ Abbas, Lichtman, Pillai, 2015 , s. 97.
41. ↑ Abbas, Lichtman, Pillai, 2015 , s. 97-98.
42. ↑ Abbas, Lichtman, Pillai, 2015 , s. 98.
43. ↑ Schroeder Jr. HW Vasta-ainevalikoiman kehitys ja kehitys.  (englanti)  // Frontiers In Immunology. - 2015. - Vol. 6 . - s. 33-33 . - doi : 10.3389/fimmu.2015.00033 . — PMID 25699050 .
44. ↑ Fillatreau S. , Six A. , Magadan S. , Castro R. , Sunyer JO , Boudinot P. Ig-luokkien ja B-solujen repertuaarien hämmästyttävä monimuotoisuus teleost-kaloissa.  (englanti)  // Frontiers In Immunology. - 2013. - Vol. 4 . - s. 28-28 . - doi : 10.3389/fimmu.2013.00028 . — PMID 23408183 .
45. ↑ Web Antibody Modeling (WAM) (17. heinäkuuta 2011). (määrätön)
46. ↑ Marcatili P. , Rosi A. , Tramontano A. PIGS: automaattinen vasta-ainerakenteiden ennustaminen.  (englanti)  // Bioinformatiikka. - 2008. - 1. syyskuuta ( osa 24 , nro 17 ). - P. 1953-1954 . - doi : 10.1093/bioinformatics/btn341 . — PMID 18641403 .
47. ↑ Weitzner BD , Jeliazkov JR , Lyskov S. , Marze N. , Kuroda D. , Frick R. , Adolf-Bryfogle J. , Biswas N. , Dunbrack Jr. RL , Gray JJ Vasta-ainerakenteiden mallinnus ja telakointi Rosettalla.  (englanniksi)  // Nature Protocols. - 2017. - Helmikuu ( osa 12 , nro 2 ). - s. 401-416 . - doi : 10.1038/nprot.2016.180 . — PMID 28125104 .
48. ↑ Adolf-Bryfogle J. , Kalyuzhniy O. , Kubitz M. , Weitzner BD , Hu X. , Adachi Y. , Schief WR , Dunbrack Jr. RL RosettaAntibodyDesign (RAbD): Yleiset puitteet laskennalliseen vasta-ainesuunnitteluun.  (englanti)  // PLoS Computational Biology. - 2018. - huhtikuu ( osa 14 , nro 4 ). - P. e1006112-1006112 . - doi : 10.1371/journal.pcbi.1006112 . — PMID 29702641 .
49. ↑ Lapidoth GD , Baran D. , Pszolla GM , Norn C. , Alon A. , Tyka MD , Fleishman SJ AbDesign: Algoritmi kombinatoriseen rungon suunnitteluun, jota ohjaavat luonnolliset konformaatiot ja sekvenssit.  (englanniksi)  // Proteiinit. - 2015. - elokuu ( osa 83 , nro 8 ). - s. 1385-1406 . - doi : 10.1002/prot.24779 . — PMID 25670500 .
50. ↑ Li T. , Pantazes RJ , Maranas CD OptMAVEn – uusi kehys spesifisiin antigeeniepitooppeihin kohdistavien vasta-aineen vaihtelevan alueen mallien de novo -suunnitteluun.  (englanniksi)  // PloS One. - 2014. - Vol. 9 , ei. 8 . - P. e105954-105954 . - doi : 10.1371/journal.pone.0105954 . — PMID 25153121 .
51. ↑ Pham V. , Henzel WJ , Arnott D. , Hymowitz S. , Sandoval WN , Truong BT , Lowman H. , Lill JR . OX40-ligandia vastaan ​​nostetun monoklonaalisen vasta-aineen de novo proteominen sekvensointi.  (englanniksi)  // Analyyttinen biokemia. - 2006. - 1. toukokuuta ( nide 352 , nro 1 ). - s. 77-86 . - doi : 10.1016/j.ab.2006.02.001 . — PMID 16545334 .
52. ↑ Ma B. , Zhang K. , Hendrie C. , Liang C. , Li M. , Doherty-Kirby A. , Lajoie G. PEAKS: tehokas ohjelmisto peptidien de novo -sekvensointiin tandemmassaspektrometrialla.  (englanti)  // Rapid Communications In Mass Spectrometry : RCM. - 2003. - Voi. 17 , ei. 20 . - s. 2337-2342 . - doi : 10.1002/rcm.1196 . — PMID 14558135 .
53. ↑ Zhang J. , Xin L. , Shan B. , Chen W. , Xie M. , Yuen D. , Zhang W. , Zhang Z. , Lajoie GA , Ma B. PEAKS DB: de novo sekvensointiavusteinen tietokantahaku herkille kohteille ja tarkka peptidin tunnistus.  (eng.)  // Molecular & Cellular Proteomics : MCP. - 2012. - huhtikuu ( osa 11 , nro 4 ). - P. 111-010587 . - doi : 10.1074/mcp.M111.010587 . — PMID 22186715 .
54. ↑ Perkins DN , Pappin DJ , Creasy DM , Cottrell JS Todennäköisyyspohjainen proteiinitunnistus etsimällä sekvenssitietokannoista massaspektrometriatietoja käyttäen.  (englanniksi)  // Elektroforeesi. - 1999. - joulukuu ( osa 20 , nro 18 ). - P. 3551-3567 . - doi : 10.1002/(SICI)1522-2683(19991201)20:18<3551::AID-ELPS3551>3.0.CO;2-2 . — PMID 10612281 .
55. ↑ Bandeira N. , Tang H. , Bafna V. , Pevzner P. Shotgun-proteiinin sekvensointi tandemmassaspektrikokoonpanolla.  (englanniksi)  // Analyyttinen kemia. - 2004. - 15. joulukuuta ( nide 76 , nro 24 ). - P. 7221-7233 . - doi : 10.1021/ac0489162 . — PMID 15595863 .
56. ↑ Liu X. , Han Y. , Yuen D. , Ma B. Automaattinen proteiinien (uudelleen)sekvensointi MS/MS:n ja homologisen tietokannan kanssa tuottaa lähes täyden kattavuuden ja tarkkuuden.  (englanti)  // Bioinformatiikka. - 2009. - 1. syyskuuta ( osa 25 , nro 17 ). - s. 2174-2180 . - doi : 10.1093/bioinformatics/btp366 . — PMID 19535534 .
57. ↑ Castellana NE , Pham V. , Arnott D. , Lill JR , Bafna V. Template-proteogenomiikka: kokonaisten proteiinien sekvensointi epätäydellistä tietokantaa käyttäen.  (eng.)  // Molecular & Cellular Proteomics : MCP. - 2010. - Kesäkuu ( osa 9 , nro 6 ). - s. 1260-1270 . - doi : 10.1074/mcp.M900504-MCP200 . — PMID 20164058 .
58. ↑ Tran NH , Rahman MZ , He L. , Xin L. , Shan B. , Li M. Complete De Novo Assembly of Monoclonal Antibody Sequences.  (englanniksi)  // Tieteelliset raportit. - 2016. - 26. elokuuta ( osa 6 ). - P. 31730-31730 . - doi : 10.1038/srep31730 . — PMID 27562653 .
59. ↑ Animoituja kuvauksia vasta-aineiden käytöstä ELISA-määrityksissä (linkki ei saatavilla) . Cellular Technology Ltd. – Eurooppa . Haettu 8. toukokuuta 2007. Arkistoitu alkuperäisestä 14. kesäkuuta 2011. (määrätön) 
60. ↑ Animoituja kuvauksia vasta-aineiden käytöstä ELISPOT-määrityksissä (linkki ei saatavilla) . Cellular Technology Ltd. – Eurooppa . Haettu 8. toukokuuta 2007. Arkistoitu alkuperäisestä 16. toukokuuta 2011. (määrätön) 
61. ↑ Stern P. Turbidimetrian ja nefelometrian nykyiset mahdollisuudet  // Klin Biochem Metab. - 2006. - Voi. 14, nro 3 . - s. 146-151.
62. ↑ Rhoades RA, Pflanzer RG Human Physiology . – 5. — Thomson Learning, 2002. - S.  584 . - ISBN 978-0-534-42174-8 .
63. ↑ Dean, Laura. Luku 4: Vastasyntyneen hemolyyttinen sairaus // Veriryhmät ja punasoluantigeenit. - NCBI Bethesda (MD): National Library of Medicine (USA), 2005.
64. ↑ Rodriguez EA , Wang Y. , Crisp JL , Vera DR , Tsien RY , Ting R. Uusi dioksaborolaanikemia mahdollistaa (18)F-positroneja emittoivan, fluoresoivan (18)F-multimodaalisuuden biomolekyylien generoinnin kiinteästä vaiheesta.  (englanniksi)  // Bioconjugate Chemistry. - 2016. - 18. toukokuuta ( osa 27 , nro 5 ). - s. 1390-1399 . - doi : 10.1021/acs.bioconjchem.6b00164 . — PMID 27064381 .
65. ↑ Feldmann M. , Maini RN Nivelreuman anti-TNF-alfa-hoito: mitä olemme oppineet?  (englanniksi)  // Annual Review Of Immunology. - 2001. - Voi. 19 . - s. 163-196 . - doi : 10.1146/annurev.immunol.19.1.163 . — PMID 11244034 .
66. ↑ Doggrell SA Onko natalitsumabi läpimurto multippeliskleroosin hoidossa?  (Englanti)  // Asiantuntijan lausunto farmakoterapiasta. - 2003. - Kesäkuu ( osa 4 , nro 6 ). - s. 999-1001 . - doi : 10.1517/14656566.4.6.999 . — PMID 12783595 .
67. ↑ Krueger GG , Langley RG , Leonardi C. , Yeilding N. , Guzzo C. , Wang Y. , Dooley LT , Lebwohl M. , CNTO 1275 Psoriasis Study Group. Ihmisen interleukiini-12/23 monoklonaalinen vasta-aine psoriaasin hoitoon.  (Englanti)  // The New England Journal Of Medicine. - 2007. - 8. helmikuuta ( nide 356 , nro 6 ). - s. 580-592 . - doi : 10.1056/NEJMoa062382 . — PMID 17287478 .
68. ↑ Plosker GL , Figgitt DP Rituksimabi: katsaus sen käyttöön non-Hodgkinin lymfoomassa ja kroonisessa lymfaattisessa leukemiassa.  (englanniksi)  // Huumeet. - 2003. - Voi. 63 , no. 8 . - s. 803-843 . - doi : 10.2165/00003495-200363080-00005 . — PMID 12662126 .
69. ↑ Vogel CL , Cobleigh MA , Tripathy D. , Gutheil JC , Harris LN , Fehrenbacher L. , Slamon DJ , Murphy M. , Novotny WF , Burchmore M. , Shak S. , Stewart S. Ensilinjan Herceptin-monoterapia metastaattisessa rintasyövässä .  (englanniksi)  // Onkologia. - 2001. - Voi. 61 Supple 2 . - s. 37-42 . - doi : 10.1159/000055400 . — PMID 11694786 .
70. ↑ LeBien T.W. Ihmisen B-soluprekursorien kohtalot.  (englanniksi)  // Veri. - 2000. - 1. heinäkuuta ( nide 96 , nro 1 ). - s. 9-23 . — PMID 10891425 .
71. ↑ Ghaffer A. Rokotus . Immunologia - Luku 14 . University of South Carolina School of Medicine (26. maaliskuuta 2006). Haettu 6. kesäkuuta 2007. Arkistoitu alkuperäisestä 18. lokakuuta 2010. (määrätön)
72. ↑ Urbaniak SJ , Greiss MA RhD sikiön ja vastasyntyneen hemolyyttinen sairaus.  (englanniksi)  // Blood Reviews. - 2000. - maaliskuu ( osa 14 , nro 1 ) . - s. 44-61 . - doi : 10.1054/blre.1999.0123 . — PMID 10805260 .
73. ↑ Fung Kee Fung K. , Eason E. , Crane J. , Armson A. , De La Ronde S. , Farine D. , Keenan-Lindsay L. , Leduc L. , Reid GJ , Aerde JV , Wilson RD , Davies G . , Désilets VA , Summers A. , Wyatt P. , Young DC , Maternal-Fetal Medicine Committee, Genetics Committee. Rh-alloimmunisaation ehkäisy.  (englanniksi)  // Journal Of Obstetrics And Gynecology Canada : JOGC = Journal D'obstetrique Et Gynecologie Du Canada : JOGC. - 2003. - syyskuu ( osa 25 , nro 9 ). - s. 765-773 . - doi : 10.1016/s1701-2163(16)31006-4 . — PMID 12970812 .
74. ↑ Sytokromi P450 -välitteinen lääke- ja karsinogeeniaineenvaihdunta monoklonaalisia vasta-aineita käyttämällä . home.ccr.cancer.gov . Haettu 2. huhtikuuta 2018. Arkistoitu alkuperäisestä 15. joulukuuta 2018. (määrätön)
75. ↑ Gelboin HV , Krausz KW , Gonzalez FJ , Yang TJ Ihmisen sytokromi P450 -entsyymejä estävät monoklonaaliset vasta-aineet: uusi tapa lääkekehitykseen.  (Englanti)  // Farmakologisten tieteiden suuntaukset. - 1999. - marraskuu ( osa 20 , nro 11 ). - s. 432-438 . - doi : 10.1016/s0165-6147(99)01382-6 . — PMID 10542439 .
76. ↑ Tini M. , Jewell UR , Camenisch G. , Chilov D. , Gassmann M. Kananmunan keltuaisten vasta-aineiden luominen ja käyttö.  (englanti)  // Comparative Biochemistry and Physiology. Osa A, Molecular & Integrative Physiology. - 2002. - maaliskuu ( osa 131 , nro 3 ) . - s. 569-574 . - doi : 10.1016/s1095-6433(01)00508-6 . — PMID 11867282 .
77. ↑ Cole SP , Campling BG , Atlaw T. , Kozbor D. , Roder JC Ihmisen monoklonaaliset vasta-aineet.  (englanniksi)  // Molecular and Cellular Biochemistry. - 1984. - Kesäkuu ( osa 62 , nro 2 ). - s. 109-120 . - doi : 10.1007/bf00223301 . — PMID 6087121 .
78. ↑ Kabir S. Immunoglobuliinin puhdistus affiniteettikromatografialla käyttämällä proteiini A -mimeettisiä ligandeja, jotka on valmistettu kombinatorisella kemiallisella synteesillä.  (englanniksi)  // Immunologiset tutkimukset. - 2002. - elokuu ( osa 31 , nro 3-4 ). - s. 263-278 . - doi : 10.1081/imm-120016245 . — PMID 12472184 .
79. ↑ 1 2 Brehm-Stecher BF , Johnson EA Yksisoluinen mikrobiologia: työkalut, teknologiat ja sovellukset.  (Englanti)  // Mikrobiologian ja molekyylibiologian arvostelut : MMBR. - 2004. - syyskuu ( osa 68 , nro 3 ) . - s. 538-559 . - doi : 10.1128/MMBR.68.3.538-559.2004 . — PMID 15353569 .
80. ↑ Williams N.E. Immunosaostusmenetelmät.  (Englanti)  // Solubiologian menetelmät. - 2000. - Voi. 62 . - s. 449-453 . — PMID 10503210 .
81. ↑ Kurien BT , Scofield RH Western blotting.  (englanti)  // Methods (San Diego, Kalifornia). - 2006. - huhtikuu ( osa 38 , nro 4 ) - s. 283-293 . - doi : 10.1016/j.ymeth.2005.11.007 . — PMID 16483794 .
82. ↑ Scanziani E. Kiinteiden kudosten immunohistokemiallinen värjäys.  (Englanti)  // Methods In Molecular Biology (Clifton, NJ). - 1998. - Voi. 104 . - s. 133-140 . - doi : 10.1385/0-89603-525-5:133 . — PMID 9711649 .
83. ↑ Reen DJ Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).  (Englanti)  // Methods In Molecular Biology (Clifton, NJ). - 1994. - Voi. 32 . - s. 461-466 . - doi : 10.1385/0-89603-268-X:461 . — PMID 7951745 .
84. ↑ Kalyuzhny AE ELISPOT-määrityksen kemia ja biologia.  (Englanti)  // Methods In Molecular Biology (Clifton, NJ). - 2005. - Voi. 302 . - s. 15-31 . - doi : 10.1385/1-59259-903-6:015 . — PMID 15937343 .
85. ↑ Saper CB Avoin kirje lukijoillemme vasta-aineiden käytöstä.  (Englanti)  // The Journal Of Comparative Neurology. - 2005. - 26. joulukuuta ( nide 493 , nro 4 ). - s. 477-478 . - doi : 10.1002/cne.20839 . — PMID 16304632 .
86. ↑ NOT-OD-16-011: Tiukan ja läpinäkyvyyden toteuttaminen NIH- ja AHRQ-tutkimusapurahahakemuksissa . grants.nih.gov . Haettu 17. huhtikuuta 2020. Arkistoitu alkuperäisestä 12. helmikuuta 2020. (määrätön)
87. ↑ Vasilevsky NA , Brush MH , Paddock H. , Ponting L. , Tripathy SJ , Larocca GM , Haendel MA Tieteen toistettavuudesta: tutkimusresurssien ainutlaatuinen tunnistaminen biolääketieteellisessä kirjallisuudessa.  (englanniksi)  // PeerJ. - 2013. - Vol. 1 . - s. e148-148 . - doi : 10.7717/peerj.148 . — PMID 24032093 .
88. ↑ Gebauer M. , Skerra A. Suunnitellut proteiinirungot seuraavan sukupolven vasta-aineterapeuttisina aineina.  (englanniksi)  // Current Opinion in Chemical Biology. - 2009. - Kesäkuu ( osa 13 , nro 3 ) - s. 245-255 . - doi : 10.1016/j.cbpa.2009.04.627 . — PMID 19501012 .
89. ↑ Lindenmann J. Termien "vasta-aine" ja "antigeeni" alkuperä.  (Englanti)  // Scandinavian Journal Of Immunology. - 1984. - huhtikuu ( osa 19 , nro 4 ) . - s. 281-285 . - doi : 10.1111/j.1365-3083.1984.tb00931.x . — PMID 6374880 .
90. ↑ 1 2 Yarilin, 2010 , s. 231.
91. ↑ A.G. N. Edesmennyt paroni Shibasaburo Kitasato.  (Englanti)  // Canadian Medical Association Journal. - 1931. - elokuu ( osa 25 , nro 2 ) . - s. 206-206 . — PMID 20318414 .
92. ↑ Winau F. , Westphal O. , Winau R. Paul Ehrlich - taikaluotia etsimässä.  (englanniksi)  // Mikrobit ja infektio. - 2004. - Heinäkuu ( osa 6 , nro 8 ). - s. 786-789 . - doi : 10.1016/j.micinf.2004.04.003 . — PMID 15207826 .
93. ↑ Silverstein A.M. Solullinen vs. humoraalinen immunologia: vuosisadan mittainen kiista.  (englanniksi)  // Nature Immunology. - 2003. - Toukokuu ( osa 4 , nro 5 ). - s. 425-428 . - doi : 10.1038/ni0503-425 . — PMID 12719732 .
94. ↑ Van Epps HL Michael Heidelberger ja vasta-aineiden mystifikaatio.  (Englanti)  // The Journal Of Experimental Medicine. - 2006. - 23. tammikuuta ( nide 203 , nro 1 ). - s. 5-5 . - doi : 10.1084/jem.2031fta . — PMID 16523537 .
95. ↑ Marrack JR. Antigeenien ja vasta-aineiden kemia. – 2. painos. - Lontoo: Hänen Majesteettinsa paperitavaratoimisto, 1938.
96. ↑ Linus Pauling Papers: Miten vasta-aineet ja entsyymit toimivat . Haettu 5. kesäkuuta 2007. Arkistoitu alkuperäisestä 5. joulukuuta 2010. (määrätön)
97. ↑ Silverstein A.M. Leimatut antigeenit ja vasta-aineet: maagisten merkkien ja taikaluotien kehitys.  (englanniksi)  // Nature Immunology. - 2004. - Joulukuu ( osa 5 , nro 12 ). - s. 1211-1217 . doi : 10.1038 / ni1140 . — PMID 15549122 .
98. ↑ Edelman GM , Gally JA Bence-Jones-proteiinien luonne. Kemialliset yhtäläisyydet myeloomaglobuliinien ja normaalien gammaglobuliinien polypeptidiketjujen kanssa.  (Englanti)  // The Journal Of Experimental Medicine. - 1962. - 1. elokuuta ( nide 116 ). - s. 207-227 . - doi : 10.1084/jem.116.2.207 . — PMID 13889153 .
99. ↑ Stevens FJ , Solomon A. , Schiffer M. Bence Jones -proteiinit: tehokas työkalu proteiinikemian ja patofysiologian perustutkimukseen.  (englanti)  // Biokemia. - 1991. - 16. heinäkuuta ( nide 30 , nro 28 ). - P. 6803-6805 . - doi : 10.1021/bi00242a001 . — PMID 2069946 .
100. ↑ 1 2 Raju TN Nobelin kronikat. 1972: Gerald M Edelman (s. 1929) ja Rodney R Porter (1917-85).  (Englanti)  // Lancet (Lontoo, Englanti). - 1999. - 18. syyskuuta ( nide 354 , nro 9183 ). - s. 1040-1040 . - doi : 10.1016/s0140-6736(05)76658-7 . — PMID 10501404 .
101. ↑ Hochman J. , Inbar D. , Givol D. Aktiivinen vasta-ainefragmentti (Fv), joka koostuu raskaiden ja kevyiden ketjujen vaihtelevista osista.  (englanti)  // Biokemia. - 1973. - 13. maaliskuuta ( osa 12 , nro 6 ). - s. 1130-1135 . - doi : 10.1021/bi00730a018 . — PMID 4569769 .
102. ↑ Tomasi TB Erittävän IgA:n ja limakalvojen immuunijärjestelmän löytö.  (englanniksi)  // Immunology Today. - 1992. - lokakuu ( osa 13 , nro 10 ). - s. 416-418 . - doi : 10.1016/0167-5699(92)90093-M . — PMID 1343085 .
103. ↑ Preud'homme JL , Petit I. , Barra A. , Morel F. , Lecron JC , Lelièvre E. Kalvon ja erittyneen IgD:n rakenteelliset ja toiminnalliset ominaisuudet.  (englanniksi)  // Molecular Immunology. - 2000. - lokakuu ( osa 37 , nro 15 ). - s. 871-887 . - doi : 10.1016/s0161-5890(01)00006-2 . — PMID 11282392 .
104. ↑ Johansson SG Immunoglobuliini E:n löytö.  //  Allergy And Asthma Proceedings. - 2006. - maaliskuu ( osa 27 , no. 2 Suppl 1 ). - s. 3-6 . — PMID 16722325 .
105. ↑ Hozumi N. , Tonegawa S. Todisteet vaihtelevia ja vakioalueita koodaavien immunoglobuliinigeenien somaattisesta uudelleenjärjestelystä.  (englanniksi)  // Amerikan yhdysvaltojen kansallisen tiedeakatemian julkaisut. - 1976. - lokakuu ( osa 73 , nro 10 ). - P. 3628-3632 . - doi : 10.1073/pnas.73.10.3628 . — PMID 824647 .
106. ↑ MIT 150: 150 ideaa, keksintöä ja innovaattoria, jotka auttoivat muotoilemaan maailmaamme . Boston Globe (15. toukokuuta 2011). Haettu 8. elokuuta 2011. Arkistoitu alkuperäisestä 4. maaliskuuta 2016. (määrätön)

Kirjallisuus

• Galaktionov V. G. Immunologia. - M . : Kustantaja. Keskus "Akatemia", 2004. - 528 s. — ISBN 5-7695-1260-1 .
• Yarilin A.A. Immunology. - M. : GEOTAR-Media, 2010. - 752 s. — ISBN 978-5-9704-1319-7 .
• Abul K. Abbas, Andrew H. Lichtman, Shiv Pillai. Solu- ja molekyyliimmunologia . - Philadelphia: Elsevier Saunders, 2015. - ISBN 978-0-323-22275-4 .
• Kenneth Murphy, Casey Weaver. Janewayn immunobiologia. - Garland Science, 2017. - ISBN 978-0-8153-4505-3 .
• Roit, A. Gl. 6. Vasta-aineet ja niiden solureseptorit // Immunology / A. Roit, J. Brostoff, D. Mail. - 5. painos - M  .: Mir, 2000. - 592 s. Kanssa. : sairas. - 7000 kappaletta.  - 28,073 BBK  . - UDC 57.083.3 . — ISBN 5-03-003305-X . 

Linkit

Sanakirjat ja tietosanakirjat	Suuri tanskalainen Suuri tanskalainen Suuri katalaani iso kiinalainen Iso venäläinen Britannica (verkossa) Treccani Moderni Ukraina
Bibliografisissa luetteloissa	BNF : 11940273f GND : 4002290-0 NKC : ph134994