N-pää

Kokeneet kirjoittajat eivät ole vielä tarkistaneet sivun nykyistä versiota, ja se voi poiketa merkittävästi 28. elokuuta 2017 tarkistetusta versiosta . tarkastukset vaativat 2 muokkausta .

N - Terminus ( englanniksi  N-terminus ), myös amino-terminus  , on ensimmäisen aminohapon aminoryhmä , josta proteiinimolekyyli taipeptidi alkaa [1] .

Jokaisella aminohapolla on aminoryhmä ja karboksyyliryhmä . Aminohapot sitoutuvat toisiinsa dehydraatioreaktion kautta lisäämällä yhden aminohapon karboksyyliryhmän toisen aminohapon aminoryhmään. Näin ollen polypeptidiketjut päättyvät vapaaseen karboksyyliryhmään, C-päähän , ja alkavat aminoryhmällä, N-päähän [1] .

Menetelmät N-terminaalisen aminohapon määrittämiseksi

N-terminaalisen aminohapon luonteen määrittämiseksi on ehdotettu useita menetelmiä, erityisesti Sangerin menetelmää (F. Sanger), joka perustuu polypeptidin 2,4-dinitrofluoribentseeni (DNFB) arylaatioreaktioon. johtaa keltaisen 2,4-dinitrofenyylijohdannaisen N-terminaalisen aminohapon muodostumiseen. Polypeptidiliuos käsitellään DNFB:llä, joka on vuorovaikutuksessa peptidin N-terminaalisen aminohapon vapaan NH2 -ryhmän kanssa.

Reaktiotuotteen, dinitrofenyylipeptidin, happohydrolyysin jälkeen vain yksi N-terminaalinen aminohappo sitoutuu reagenssiin 2,4-dinitrofenyyliaminohapon muodossa (stabiili hydrolyysin aikana). Toisin kuin muut vapaat aminohapot, jotka muodostuvat polypeptidin hydrolyysin aikana, se on keltainen. Se tunnistetaan kromatografialla.

N-terminaalisen aminohapon määrittämiseksi fenyylitiohydantoiini Edman -menetelmää käytetään paljon laajemmin sen korkean herkkyyden ja usean käyttömahdollisuuden vuoksi samassa näytteessä. Fenyyli-isotiosyanaatti reagoi polypeptidin N-terminaalisen aminohapon vapaan a-NH2-ryhmän kanssa muodostaen fenyylitiokarbamoyylipeptidiä .

Muistiinpanot

  1. 1 2 Nelson, Cox, 2011 , s. 128.

Kirjallisuus