Nukleosiditrifosfaatti

Nukleosiditrifosfaatit (NTP)  ovat nukleosideja , joissa on kolme fosfaattia . Luonnollisia nukleosiditrifosfaatteja ovat adenosiinitrifosfaatti (ATP), guanosiinitrifosfaatti (GTP), sytidiinitrifosfaatti (CTP), tymidiinitrifosfaatti (TTP) ja uridiinitrifosfaatti (UTP). Nämä termit tarkoittavat, että nukleotidit sisältävät sokeririboosin .

Sokerideoksiriboosia sisältävien nukleotidien nimessä on etuliite deoksi- ja lyhenteessä d-: deoksiadenosiinitrifosfaatti (dATP), deoksiguanosiinitrifosfaatti (dGTP), deoksisytidiinitrifosfaatti (dCTP), deoksitymidiinitrifosfaatti (dCTP) ja .

Yksi menetelmistä tarvittavan geenin (DNA-molekyylin) saamiseksi, joka on alttiina replikaatiolle (kloonaukselle) vapauttamalla huomattava määrä replikoita, on komplementaarisen DNA:n (cDNA) rakentaminen mRNA:lle. Tämä menetelmä edellyttää käänteiskopioijaentsyymin käyttöä, entsyymiä, jota esiintyy joissakin RNA:ta sisältävissä viruksissa ja joka saa aikaan DNA-synteesin RNA-templaatissa.

Menetelmää käytetään laajasti cDNA:n saamiseksi, ja se sisältää mRNA:n eristämisen kudoksen kokonais-mRNA:sta, joka koodaa spesifisen proteiinin (esimerkiksi interferonin, insuliinin) translaatiota ja tämän mRNA:n lisäsynteesiä tarvittavan cDNA:n templaattina käyttämällä käänteinen transkriptaasi.

Yllä olevalla menetelmällä saatu geeni (cDNA) on vietävä bakteerisoluun siten, että se integroituu sen genomiin. Tätä varten muodostetaan rekombinantti-DNA, joka koostuu cDNA:sta ja erityisestä DNA-molekyylistä, joka hallitsee johtimena tai vektorina, joka pystyy tunkeutumaan vastaanottajan soluun. Viruksia tai plasmideja käytetään vektoreina cDNA:lle. Plasmidit ovat pieniä pyöreitä DNA-molekyylejä, jotka sijaitsevat erillään bakteerisolun nukleoidista, sisältävät useita koko solun toiminnalle tärkeitä geenejä (esimerkiksi antibioottiresistenssigeenejä ja voivat replikoitua solun päägenomista (DNA) riippumatta Geenitekniikassa käyttökelpoisten plasmidien biologisesti tärkeitä ja käytännöllisesti katsoen hyödyllisiä ominaisuuksia ovat niiden kyky siirtyä solusta toiseen transformaatio- tai konjugaatiomekanismin avulla sekä kyky liittyä bakteerin kromosomiin ja replikoitua sen mukana.