Ravintoaine

Kokeneet kirjoittajat eivät ole vielä tarkistaneet sivun nykyistä versiota, ja se voi poiketa merkittävästi 27. joulukuuta 2021 tarkistetusta versiosta . tarkastukset vaativat 6 muokkausta .

Ravintoalusta  on yksi- tai monikomponenttinen substraatti, jota käytetään mikro- organismien tai korkeampien organismien soluviljelmien viljelyyn.

Ravintoalustojen vaatimukset

• olla ravitsevaa , eli sisältää helposti sulavassa muodossa kaikki ravinto- ja energiatarpeen tyydyttämiseen tarvittavat aineet. Kun viljellään useita mikro-organismeja, kasvutekijöitä viedään väliaineisiin  - vitamiineja, joitain aminohappoja, joita solu ei pysty syntetisoimaan.
• niillä on optimaalinen vetyionipitoisuus - pH , koska vain ympäristön optimaalisella reaktiolla, joka vaikuttaa kuoren läpäisevyyteen, mikro-organismit voivat imeä ravinteita.

Useimmille patogeenisille bakteereille heikosti emäksinen ympäristö (pH 7,2-7,4) on optimaalinen. Poikkeuksena on vibrio cholerae  - sen optimi on alkalisella vyöhykkeellä (pH 8,5-9,0) ja tuberkuloosin aiheuttajalla , joka tarvitsee lievästi happaman reaktion (pH 6,2-6,8). Jotta mikro-organismien kasvun aikana niiden elintärkeän toiminnan happamat tai emäksiset tuotteet eivät muuta pH:ta, väliaineilla on oltava puskurointi , eli ne sisältävät aineita, jotka neutraloivat aineenvaihduntatuotteita.

• olla isotoninen mikrobisolulle; eli väliaineen osmoottisen paineen on oltava sama kuin kennon sisällä. Useimmille mikro-organismeille optimaalinen ympäristö on 0,5 % natriumkloridiliuos .
• olla steriili , koska vieraat mikrobit estävät tutkittavan mikrobin kasvun, sen ominaisuuksien määrittämisen ja muuttavat ympäristön ominaisuuksia.
• tiheän väliaineen tulee olla kosteaa ja optimaalisen konsistenssi mikro-organismeille.
• niillä on tietty redox -potentiaali, eli elektroneja luovuttavien ja vastaanottavien aineiden suhde RH 2 -indeksinä ilmaistuna . Esimerkiksi anaerobit lisääntyvät suhteellisella kosteudella , joka on korkeintaan 5, ja aerobit, kun RH 2 on  vähintään 10 .
• oltava mahdollisimman yhtenäisiä eli sisältävät vakiomäärän yksittäisiä ainesosia.

On toivottavaa, että alustat ovat läpinäkyviä  - on helpompi seurata viljelmien kasvua, on helpompi havaita ympäristön saastuminen vierailla mikro-organismeilla.

Luokitus

• Alkuperäiset ainesosat:
  • luonnolliset alustat - valmistettu eläin- ja kasviperäisistä tuotteista (liha, askites, luujauho, rehuhiiva, verihyytymät jne.)
  • synteettiset väliaineet - valmistettu tietyistä kemiallisesti puhtaista orgaanisista ja epäorgaanisista yhdisteistä, otettu tarkasti määriteltyinä pitoisuuksina ja liuotettuna kahdesti tislattuun veteen .
• Valmiusasteen mukaan:
  • valmiita ravintoalustoja (petrimaljoissa, pulloissa)
  • kuivat seokset
• Sakeuden mukaan (tiheysaste):
  • nestettä (liemet)
  • puolinestemäinen
  • tiheä

Tiheät ja puolinestemäiset väliaineet eroavat nestemäisistä geelinmuodostusaineen ( agar-agar , harvemmin gelatiini) läsnä ollessa. Lisäksi kiinteinä väliaineina käytetään koaguloituja kananmuna- tai heraproteiineja, perunoita ja silikageeliväliaineita. Jotkut mikro-organismit käyttävät gelatiinia ravintoaineena - kasvaessaan väliaine nesteytyy.

• Koostumuksessa:
  • yksinkertainen: liha-peptoniliemi (MPB), liha-peptoni-agar (MPA), ravitseva gelatiini,
  • kompleksi - monikomponenttiset väliaineet, jotka voivat sisältää aminohappoja, vitamiineja, hivenaineita ja muita aineita.
• Ajanvarauksella:
  • tärkeimpiä käytetään useimpien mikro-organismien viljelyyn, esimerkiksi MPB, MPA, liemi , suklaa-agar , peptonivesi.
  • erityiset - käytetään sellaisten mikro-organismien eristämiseen ja kasvattamiseen, jotka eivät kasva yksinkertaisella alustalla.
  • valinnainen (selektiivinen) - palvelee tietyn tyyppisten mikrobien eristämistä, joiden kasvua ne suosivat, hidastaen tai tukahduttaen sukulaisten mikro-organismien kasvua. Väliaineista tulee valinnaisia, kun niihin lisätään tiettyjä antibiootteja, suoloja ja pH-muutoksia. Nestemäisiä elektiivisiä väliaineita kutsutaan akkumulaatioaineiksi .
  • differentiaalidiagnostiikka - voit erottaa yhden mikrobityypin toisesta entsymaattisen aktiivisuuden avulla.
  • kuljetus - suunniteltu ensikylvöyn ja testimateriaalin kuljetukseen.

Median valmistelu

Ruoanlaittovälineet

Välineiden valmistusastiat eivät saa sisältää vieraita aineita, kuten tietyntyyppisten lasien vapauttamia alkaleja tai rautaoksideja, jotka voivat päästä väliaineeseen, kun sitä keitetään ruosteisissa pannuissa. On parempi käyttää lasi-, emali- tai alumiiniastioita. Ennen käyttöä astiat on pestävä, huuhdeltava ja kuivattava huolellisesti. Uusia lasitavaroita keitetään alustavasti 30 minuuttia 1-2 % suolahappoliuoksessa , minkä jälkeen niitä huuhdellaan juoksevalla vedellä tunnin ajan.

Raaka-aineet

Useimpien väliaineiden valmistuksen lähtöraaka-aineet ovat eläin- ja kasviperäisiä tuotteita sekä valmiita puolivalmiita tuotteita.

Keittovaiheet

1. panimo : väliaineet keitetään avoimella tulella, bain-mariessa , autoklaavissa tai keittimessä.
2. pH-asetus : tehdään karkeasti käyttäen indikaattoripaperia . Tarkkaa määritystä varten käytä potentiometriä tai vertailulaitetta. Steriloinnin aikana pH laskee 0,2, joten ensin valmistetaan alkalisempi liuos.
3. selkeytys suoritetaan, jos materiaali samenee tai tummuu kypsennyksen aikana. Tätä varten käytetään munaproteiinia tai veriseerumia.
4. nestemäisen ja sulan hyytelömaisen väliaineen suodatus suoritetaan märän paperin tai kangassuodattimien läpi. Agar-alustan suodatus on vaikeaa - ne jähmettyvät nopeasti. Yleensä ne suodatetaan puuvilla-harsosuodattimen läpi.
5. kaada materiaali enintään ¾ astiaan, koska steriloinnin aikana tulpat voivat kastua ja väliaine menettää steriiliytensä.
6. sterilointi : sterilointitapa riippuu alustan koostumuksesta ja on ilmoitettu sen reseptissä.
7. ohjata

• alustan steriiliyden säätelemiseksi ne asetetaan termostaattiin 2 päiväksi , minkä jälkeen niitä tarkastellaan.
• kemiallinen säätö lopulta asettaa pH:n, kokonais- ja aminotyppipitoisuuden, peptonin, kloridit.
• biologista kontrollia varten useita elatusainenäytteitä siirrostetaan erityisesti valituilla viljelmillä, ja niiden kasvua käytetään arvioitaessa alustan ravitsemuksellisia ominaisuuksia.

Ravinnealustojen tyypit

• Keskityypin AGV (TU 9229-083-00419785-97).
• Agar-hiiva-maito-suola-alusta (ADMS)
• Baird-Parkerin väliaine (agar)
• Blaurock-elatusaine (agar)
• Bushnell-Haas medium (agar)
• Wilson-Blair medium (agar)
• Hampurin medium (agar)
• Gause-1 elatusaine (agarisoitu)
• Carey-Blair-elatusaine (agar) tai Carey-Blair-elatusaine (Carey-Blair).
• Keskikokoinen Kitt Tarozzi (agar)
• Lowenstein-Jensen-media.
• Keskiviikkona Levin-GRM
• Leonianin elatusaine (agar, käytetty mykologiassa)
• McConkeyn medium (agar)
• Murashige-Skoog medium (agar)
• Muller-Hinton keskikokoinen (tiheä)
• Keskikokoinen MPC-2 (agar)
• Elatusainetyyppi MRS (agar) (GOST 51331-99) - latinalainen lyhenne edellisestä alustasta
• Keskityyppinen Neogen
• Cattail medium (agar)
• Sabouraud-elatusaine (agar, dekstroosi , mykologiassa käytetty, SDA)
• Keskiviikkona Smirnova A.M.
• Sotonin medium (agar)
• Medium SR-15 (agar)
• Street's medium (agar)
• Stuartin meedio (kuljetus)
• Tryptoni-soijaagar (TSA) -alusta
• Hayflick Medium (agar) tai Hayflick Liquid Medium
• Chapekin väliaine (agar)
• Schenck-Hildebrandt-media
• Amies Medium (kuljetus) tai Amies Liquid Medium
• Endo medium (agar)
• Ashby-elatusaine (agar) [1] [2]
• Ympäristö LB

Kuvat

• Koeputket nestemäisillä ravintoaineilla (vas. 6) mikro-organismien tunnistamiseen niiden kyvyn perusteella vaihtaa väliainetta

• Koeputket, joissa on tiheä vino ravintoalusta (kolmen sokerin rauta-agar), johon on ympätty erilaisia ​​mikro-organismeja

• Sienen microsporia pesäke vinossa tiheässä kasvualustassa

• Puhdas Escherichia coli -viljelmä tiheällä elektiivisellä ravintoalustalla (Endo-elatusaine) petrimaljalla

• Pernaruton puhdasviljelmä tiheällä elektiivisellä ravintoalustalla ( veriagar ) petrimaljalla

• Petrimaljoja kiinteällä viljelyalustalla

Katso myös

• Solu- ja kudosviljely
• Biotekniikka
• suklaa-agar
• agar agar

Muistiinpanot

1. ↑ Smirnov A. M. Eristettyjen juurien kasvu ja aineenvaihdunta steriilissä viljelmässä. M.: Nauka, 1970. 455 s.
2. ↑ Butenko R.G. Eristettyjen kudosten viljely ja kasvien morfogeneesin fysiologia. M.: Nauka, 1964. 272 ​​s.

Kirjallisuus

• Zamchuk L. A. Kulttuurimedia Arkistoitu 18. tammikuuta 2021 Wayback Machinessa // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. - M.: Neuvostoliiton tietosanakirja. - T. 19.
• Kalina G.P. Synteettiset ravintoaineet Arkistoitu 11. elokuuta 2017 Wayback Machinessa // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. - M.: Neuvostoliiton tietosanakirja. - T. 23.
• Birger M. O. Differentiaalidiagnostiikkamedia Arkistokopio 29. elokuuta 2017 Wayback Machinessa // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. - M.: Neuvostoliiton tietosanakirja. - T. 7.
• Belokrysenko S. S. Bakteeriviljely Arkistoitu 9. joulukuuta 2020 Wayback Machinessa // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. - M.: Neuvostoliiton tietosanakirja. - T. 2.
• Belokrysenko S. S. Hemoculture Arkistokopio päivätty 12. heinäkuuta 2017 Wayback Machinessa // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. - M.: Neuvostoliiton tietosanakirja. - T. 5.
• Belokrysenko S. S. Biological assay in Microbiology Arkistokopio päivätty 11. heinäkuuta 2017 Wayback Machinessa // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. - M.: Neuvostoliiton tietosanakirja. - T. 3.
• Ignatova T. N., Pospelova T. V., Gubin V. A., Dobrynin Ya. V., Chertkov I. L. Solu- ja kudosviljelmät (ravinteet solu- ja kudosviljelmille) Arkistokopio 26. lokakuuta 2020 Wayback Machinessa // Great Medical Encyclopedia , 3. painos. - M.: Neuvostoliiton tietosanakirja. - T. 12.
• [bse.sci-lib.com/article110808.html Bakteeritiitteri] // Suuri Neuvostoliiton tietosanakirja  : [30 nidettä]  / ch. toim. A. M. Prokhorov . - 3. painos - M .  : Neuvostoliiton tietosanakirja, 1969-1978.