Suklaa-agar ( vanhentunut lämminverinen agar ) on korkeassa lämpötilassa hajotettua verta tai hemoglobiinia rikastettu ravintoalusta , jota käytetään korkean ravitsemustarpeen omaavien patogeenisten bakteerien eristämiseen ja viljelemiseen [1] [2] . Ravintoalusta on nimetty sen ominaisvärin vuoksi, eikä se sisällä suklaata tai kaakaota . Perinteisesti suklaaagaria voidaan kutsua eräänlaiseksi veriagariksi , mutta nämä väliaineet eroavat toisistaan tarkoituksen ja valmistustavan suhteen.
Suklaaagarin perustana käytetään laajaa valikoimaa mikrobiologiassa käytettyjä tiheitä ravintoalustoja [3] . 5-10 % eläimen verta lisätään sulaan steriiliin pohjaan ja kuumennetaan vesihauteessa noin 80 °C:n lämpötilassa 5 minuuttia punasolujen hajottamiseksi ja kasvutekijä V :tä tuhoavien entsyymien inaktivoimiseksi . Joissain tapauksissa, esimerkiksi käytettäessä sikojen tai vuohien verta, lämpenemislämpötila voi olla 100 °C ja lämpenemisaika nostetaan 15 minuuttiin [4] .
Usein suklaaagarin valmistukseen käytetään veren sijasta kuivasta hemoglobiinista valmistettua autoklaavissa steriloitua suspensiota . Koska hemoglobiini ei ole täydellinen korvike verelle, synteettisiä kasvuravinteita lisätään ravintoalustaan, joka sisältää NAD :ta, joka on välttämätön Haemophilus -suvun bakteerien kasvulle , sekä vitamiineja ja aineita, jotka stimuloivat veren kasvua . gonokokit ja meningokokit [3] [5] .
Suklaaagaria käytetään vaativien bakteerien , kuten gonokokkien ( Neisseria gonorrhoeae ) ja meningokokkien ( Neisseria meningitidis ) kasvattamiseen [6] . Lisäksi jotkin patogeeniset bakteerit (erityisesti Haemophilus influenzae ) vaativat lisäkasvutekijöitä V ja X [7] , joita löytyy punasoluista ( erytrosyyteistä ). Tällaisten bakteerien onnistunut viljely edellyttää hajotettuja (hitaalla kuumennuksella tuhoutuneita) punasoluja. 80 °C:n lämpötila inaktivoi myös entsyymejä , jotka voivat metaboloida NAD:ta ( Nicotinamide Adenine Dinucleotide ).
Toisin kuin veriagar, hemolyysiä ei tapahdu, kun mikro-organismeja viljellään suklaa-agarilla . Samaan aikaan jotkut α- ja β-hemolysoivat mikro-organismit, jotka tuottavat vetyperoksidia , muodostavat vihreitä vyöhykkeitä suklaagariin, samanlaisia kuin α-hemolyysi [8] .
Basitrasiinin lisääminen suklaaagariin tekee siitä elektiivisen viljelyalustan, joka on selektiivinen Haemophilus -suvun suhteen . Thayer-Martin- suklaaagarvariantti sisältää useita antibiootteja ja on valinnainen viljelyalusta erilaisten Neisseria - suvun gramnegatiivisten diplokokkien viljelyyn .