Kasvutekijät X ja V ( X-factor ja V-factor, englanniksi X-factor ja V-factor, kasvutekijät X ja V ) ovat tekijöitä, jotka ovat välttämättömiä Haemophilus -suvun edustajien ja joidenkin muiden bakteerien kasvulle ravintoalustalla . Ne eivät ole veren hyytymistekijöitä , kun taas "X" ja "V" nimessä ovat latinalaisia kirjaimia , eivät roomalaisia numeroita .
Termit "tekijä X" ja "tekijä V" ottivat ensimmäisenä käyttöön Theodor Thjøtta ja Oswald Theodore Avery , jotka totesivat, että kaksi kasvutekijää ovat välttämättömiä H. influenzae -bakteerin kasvulle, joista toinen (tekijä X) löytyy vain veressä ja kestää sterilointia autoklaavissa , ja toinen ("vitamiinimainen" tekijä V) voi olla läsnä myös muissa substraateissa, erityisesti hiivauute, kestää kiehumista, mutta tuhoutuu autoklaavissa [1] .
Tekijä X on yleisnimitys ryhmälle tetrapyrroliyhdisteitä , jotka muodostavat rautaa sisältäviä pigmenttejä (esimerkiksi hemiiniä , hematiinia). Kasvutekijä X:ää vaativat lajit eivät pysty syntetisoimaan protoporfyriiniä δ - aminolevuliinihaposta [2] . Factor X on lämpöstabiili, joten se ei hajoa autoklaavissa steriloitaessa.
Kasvutekijä X:n lähteitä ravintoalustassa voivat olla veri, mukaan lukien korkeassa lämpötilassa hajotettu veri ( suklaaagar ) tai entsyymit [3] , hemoglobiini, kiteinen hemiini tai hematiini.
V-tekijä on minimaalisesti ekvivalentti nikotiiniamidimononukleotidin (NMN) tai nikotiiniamidiribosidin (NR) kanssa, mutta yleisesti käytetään nikotiiniamidiadeniinidinukleotidia (NAD) , jossa bakteerien sytoplasmiset entsyymit pilkkovat NAD:n muodostaen NMN:n tai NR:n. Pyridiiniyhdisteille, jotka voivat toimia tekijä V:nä, on tunnusomaista ehjä pyridiini-riboosisidos β-konfiguraatiossa ja pyridiinikarboksamidisidos asemassa 3 [4] .
Kasvutekijä V on lämpölabiili, ts. hajoaa korkeassa lämpötilassa, joten sitä ei löydy viljelyväliaineista tai substraateista, jotka on steriloitu autoklaavissa. Verta tai kiteistä NAD:ta käytetään tämän kasvutekijän lähteenä ravintoalustojen valmistuksessa. Veressä V-tekijä sijaitsee punasolujen sisällä, lisäksi monien nisäkkäiden , myös ihmisten, veri sisältää entsyymejä , jotka hajottavat tätä kasvutekijää , joten tavallinen veri-agar ei tue mikro-organismien kasvua, jotka tarvitsevat V-tekijä. Kasvutekijä V:n vapauttamiseksi erytrosyyteistä ja entsyymien inaktivoimiseksi verta lämmitetään 70–80 °C: n lämpötilaan [5] . Aikaisemmin V-tekijän lähteenä käytettiin porkkana-, peruna-, tomaatti- tai hiivauutteita [6] .
X-tekijän, V-tekijän tai molempien kasvutekijöiden tarpeesta riippuen Haemophilus -suvun edustajat eristetään aluksi lajeittain.
Näytä | Tekijä X | Tekijä V |
---|---|---|
H. influenzae | ||
H. influenzae biovar aegypticus | ||
H. haemolyticus | ||
H. parainfluenzae | ||
H. parahaemolyticus | ||
H. paraphrophilus | ||
H. segnis | ||
H. ducreyi |
Kasvutekijä X:n tarve eri bakteereissa voi olla erilainen, esimerkiksi H. influenzaen kasvu edellyttää kiteisen hemiinin lisäämistä ravintoalustaan 0,1-10 μg/ml ja H. 200 μg/ml . ducreyi . V-tekijän tarve vaihtelee myös lajeittain, joten H. influenzaen kohdalla ravintoalustassa on oltava kiteistä NAD:ta 0,2-1,0 μg/ml, H. parainfluenzaen 1,0-5,0 μg/ml ja joitakin kannat vaativat jopa 25 µg/ml [4] .
Haemophilus -sukuun kuuluvien bakteerien lisäksi muut Pasteurellaceae -suvun jäsenet voivat olla riippuvaisia kasvutekijä V:stä , kuten jotkin Actinobacillus pleuropneumoniae-, Avibacterium paragallinarum- ja Aggregatibacter aphrophilus -kannat.