Kromatografinen pylväs - kromatografialaite , jota käytetään sekä manuaaliseen työhön että osana erityistä yksikköä, kromatografia .
Kromatografisessa pylväässä alkuperäinen monikomponentti seos erotetaan binaariseosten sarjaan, joka koostuu neste- tai kantajakaasusta ( kaasukromatografiasta ) ja yhdestä erotettavista komponenteista. Erottelu voi tapahtua sekä erottavien aineiden väliaikaisten sidosten muodostumisesta että pylvään paikallaan olevasta vaiheesta ( adsorptiokromatografia ) että muiden periaatteiden (esimerkiksi koon poissulkemisen kromatografia ) mukaan. Tarkemmin sanottuna, kunkin komponentin poistumisajan arvot sarakkeesta asetetaan kalibroinnin aikana .
Kolonnille on tunnusomaista materiaali, josta stationaarifaasi koostuu, sisähalkaisija ja pituus. Kolonnien koko riippuu erotettavien aineiden määrästä ja kromatografian tyypistä. Erikaliiperisilla kolonneilla voidaan erottaa sekä mikrogrammia että kilogrammoja erilaisia aineita.
Pylväiden täyttämiseen kiintoaineilla on kaksi päämenetelmää, kuiva ja märkä. Ensimmäisessä tapauksessa kolonni täytetään ensin kuivalla jauheella, minkä jälkeen liikkuva faasi (neste tai kaasu) johdetaan sen läpi. Toisessa tapauksessa kolonni täytetään täyteaineen suspensiolla liikkuvassa faasissa. Jos liikkuva faasi on nestemäistä, tulee molemmissa tapauksissa varmistaa, että valmiissa kolonnissa ei ole ilmakuplia, jotka voivat vaikuttaa kromatografian laatuun tai tukkia sen kokonaan. Lisäksi on aina olemassa vaara, että kolonni rikkoutuu kelpaamattomien aineiden takia (liukenemattomat aineet tai liian aktiiviset molekyylit, jotka tukkivat kolonnikanavan), joita ei poisteta näytteen valmistuksen aikana .
Kiinteänä faasina voidaan käyttää materiaaleja, kuten silikageeliä , alumiinioksidia , mikrokiteistä selluloosaa , agaroosia ja muita materiaaleja, erityisesti selluloosan tai agaroosin erityisellä prosessoimalla koon poissulkemista , ioninvaihtoa tai affiniteettikromatografiaa varten .
Kromatografian aikana kolonniin levitetyn seoksen yksittäiset komponentit poistuvat siitä eri nopeuksilla. Ne kerätään jakeittain määrittämällä odotettavissa olevien aineiden pitoisuus kussakin fraktiossa. Värilliset aineet näkyvät myös kolonnin lasiseinien läpi.
| Kemialliset erotusmenetelmät | |
|---|---|