Puhdistus

Depurinaatio on puriinideoksiribonukleosidien , deoksiadenosiinin ja deoksiguanosiinin ja ribonukleosidien , adenosiinin tai guanosiinin välinen kemiallinen reaktio , jossa β-N- glykosidisidos lohkeaa hydrolyyttisesti vapauttaen vastaavasti nukleoemäksen, adeniinin tai guaniinin . Toinen deoksiribonukleosidien ja ribonukleosidien depurinaation tuote on sokeri, 2'- deoksiriboosi ja riboosi . Monimutkaisemmat yhdisteet, jotka sisältävät nukleosiditähteitä, nukleotideja ja nukleiinihappoja, voivat myös olla herkkiä depurinaatiolle. Deoksiribonukleosidit ja niiden johdannaiset ovat huomattavasti alttiimpia depurinaatiolle kuin vastaavat ribonukleosidivastineet. Pyrimidiiniemästen ( sytosiini ja tymiini ) häviäminen tapahtuu samanlaisella mekanismilla, mutta paljon hitaammin.

Kun DNA:n depurinaatio tapahtuu , se johtaa apuriinikohdan muodostumiseen ja rakenteen muutokseen. Tutkimukset ovat arvioineet, että jopa 5 000 puriinia menetetään joka päivä tyypillisestä ihmissolusta [1] . Soluissa yksi tärkeimmistä depurinaation syistä on endogeenisten metaboliittien läsnäolo, jotka tulevat kemiallisiin reaktioihin. Apuriinikohdat kaksijuosteisessa DNA:ssa korjataan tehokkaasti osilla emäksen leikkauskorjausreittiä (BER). Replikoituvan yksijuosteisen DNA:n depurinoidut emäkset voivat johtaa mutaatioihin , koska komplementaarisen juosteen tiedon puuttuessa BER voi lisätä väärän emäksen apuriinikohtaan, mikä johtaa siirtymä- tai transversiomutaatioon [ 2] .

Tiedetään, että depurinaatiolla on tärkeä rooli syövän esiintymisessä [3] .

Hydrolyyttinen depurinaatio on yksi fossiilisen tai subfossiilisen materiaalin muinaisen DNA :n tärkeimmistä vaurioista, koska emäs pysyy pelkistymättömänä. Tämä johtaa sekä tiedon menettämiseen (emässekvenssi) että vaikeuksiin vaurioituneen molekyylin korjaamisessa ja in vitro -replikaatiossa polymeraasiketjureaktiota käyttämällä .

Reaktiokemia

Depurinaatio ei ole harvinaista, koska puriini on hyvä poistuva ryhmä 9N typen kautta (katso puriinin rakenne ). Lisäksi anomeerinen hiili on erityisen aktiivinen nukleofiiliseen substituutioon (tekeen hiili-happisidoksesta tehokkaasti lyhyemmän, vahvemman ja polaarisemman, samalla kun hiili-puriinisidoksesta tulee pidempi ja heikompi). Tämä tekee sidoksesta erityisen alttiita hydrolyysille.

Oligonukleotidien kemiallisessa synteesissä depurinaatio on yksi tärkeimmistä synteettisten oligonukleotidien pituutta rajoittavista tekijöistä [4] .

Viitteet

  1. Lindahl, T. (22. huhtikuuta 1993). "DNA:n primaarirakenteen epävakaus ja hajoaminen". luonto . 362 (6422): 709-715. Bibcode : 1993Natur.362..709L . DOI : 10.1038/362709a0 . ISSN  0028-0836 . PMID  8469282 .
  2. Carr. Depurinaatio tuottaa transversiomutaatioita . www.mun.ca/biology/scarr . Memorial University of Newfoundland (2009). Haettu: 19. elokuuta 2010.
  3. Cavalieri, E. (2012). "Syöpää aiheuttavien aineiden DNA-depurinaation mekanismi suhteessa syövän alkuun". IUBMB Life . 64 (2): 169-179. DOI : 10.1002/iub.586 . PMID  22162200 .
  4. Le Proust, EM (2010). "Pitkien (150-meeristen) oligonukleotidien korkealaatuisten kirjastojen synteesi uudella depurinaatioohjatulla menetelmällä". Nucleic Acids Res . 38 (8): 2522-2540. doi : 10.1093/nar/ gkq163 . PMID20308161 . _