| Ditiotreitoli | |
|---|---|
| Kenraali | |
| Systemaattinen nimi |
( 2S,3S )-1,4-bis(sulfanyyli)butaani-2,3-dioli |
| Chem. kaava | C4H10O2S2 _ _ _ _ _ _ _ |
| Fyysiset ominaisuudet | |
| Osavaltio | valkoinen kiinteä aine |
| Moolimassa | 154,253 g/ mol |
| Lämpöominaisuudet | |
| Lämpötila | |
| • sulaminen | 42 - 43 °C |
| • kiehuva | 125 - 130 °C |
| Luokitus | |
| Reg. CAS-numero | 3483-12-3 |
| PubChem | 446094 |
| Reg. EINECS-numero | 222-468-7 |
| Hymyilee | C([C H]([C H](CS)O)O)S |
| InChI | InChI = 1S/C4H10O2S2/c5-3(1-7)4(6)2-8/h3-8H,1-2H2/t3-,4-/m1/s1VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N |
| CHEBI | 42170 |
| ChemSpider | 393541 |
| Tiedot perustuvat standardiolosuhteisiin (25 °C, 100 kPa), ellei toisin mainita. | |
| Mediatiedostot Wikimedia Commonsissa | |
Ditiotreitoli (dithiothreit, DTT, englanti DTT ) on alhaisen molekyylipainon vähentävä aine, joka tunnetaan myös nimellä Clelandin reagenssi . Molekyylin nimi tulee neljän hiilen sokeri- treoosista .
Ditiotreitoli on erittäin vahva pelkistävä aine, joka pystyy muodostamaan kuusijäsenisen renkaan muodostamalla molekyylinsisäisen disulfidisidoksen . pH : ssa 7 sen pelkistyspotentiaali on −0,33 V. Disulfidisidosten pelkistys tapahtuu kahdella peräkkäisellä tioli-disulfidivaihdolla (katso alla). Välituote on epästabiili, koska toisella tioliryhmällä on taipumus sulkea rengas ja muodostaa hapettunutta DTT:tä, jolloin muodostuu kaksi pelkistettyä disulfidisidosta. DTT osoittaa pelkistävää aktiivisuutta vain pH:ssa noin 7, koska vain negatiivisesti varautunut tiolaatti voi muodostaa aktiivisen -S- : n, kun taas protonoitu tiolimuoto -SH on inaktiivinen. Tioliryhmän happamuusvakio on pH-arvojen välillä 9,2 - 10,1.
Ditiotreitolia käytetään "poistamaan" tioloidusta DNA:sta. Tioloidun DNA:n terminaalinen atomi liuoksessa pyrkii muodostamaan dimeerejä , erityisesti hapen läsnä ollessa . Dimerisaatio vähentää suuresti myöhempien kytkentäreaktioiden tehokkuutta, kuten DNA:n immobilisoinnin tapauksessa kullalle biosensoreissa . Tyypillisesti DTT sekoitetaan DNA-liuoksen kanssa ja annetaan reagoida, sitten DTT poistetaan suodattamalla tai kromatografialla . DTT:n poistamista kutsutaan suolanpoistoksi.
Ditiotreitolia käytetään biokemiassa usein palauttamaan disulfidisidoksia proteiinimolekyyleihin ja erityisesti molekyylinsisäisiin ja molekyylien välisiin sidoksiin kysteiinitähteiden välillä . DTT ei kuitenkaan voi pelkistää disulfidisidoksia, jotka ovat syvällä proteiinirakenteessa (ei ole kosketuksissa liuottimen kanssa), joten SS-sidosten pelkistys suoritetaan usein denaturoivissa olosuhteissa (esimerkiksi kuumentamalla tai vahvan denaturointiaine 6 M guanidiinihydrokloridia , 8 M ureaa tai 1 % natriumdodekyylisulfaattia ). Ja vastaavasti disulfidisidosten läsnäoloa proteiinin pinnalla voidaan tutkia niiden pelkistymisellä DTT:n läsnä ollessa.
DTT:tä käytetään myös hapettavana aineena. DTT:n etuna on, että se ei muodosta sekoitettuja disulfidisidoksia, mikä eroaa glutationista . Hyvin harvinaisissa tapauksissa DTT voi muodostaa additiotuotteita, esimerkiksi kaksi rikkiatomia voi muodostaa disulfidisidoksia muiden rikkiatomien kanssa; näissä tapauksissa DTT ei voi syklisoitua.
DTT hapettuu helposti ilmakehän hapen vaikutuksesta ja on siksi suhteellisen epästabiili kemiallinen yhdiste. Koska protonoidut rikkiatomit ovat vähemmän nukleofiilisiä , DTT on heikompi pelkistävä aine happamassa pH :ssa .