Daxx ( kuolemaan liittyvä proteiini 6 ) on DAXX - geenin ihmisissä koodaama proteiini [ 1] [2] .
Daxx, Death -domeeniin liittyvä proteiini , löydettiin ensimmäisen kerran havainnoimalla sytoplasmista vuorovaikutusta klassisen Fas -kuolemareseptorin kanssa . Se on yhdistetty heterokromatiiniin ja PML-NB:hen (nukleaarinen promyelosyyttinen leukemia) ja se on osallisena monissa ydinprosesseissa, mukaan lukien transkriptio ja solusyklin säätely .
Tämä geeni koodaa monifunktionaalista proteiinia , joka sijaitsee useissa paikoissa - tumassa ja sytoplasmassa . Daxx toimii erityisenä kumppanina H3.3-histonille, joka on vuorovaikutuksessa H3.3/H4-dimeerien kanssa [3] . Se on vuorovaikutuksessa monien eri proteiinien kanssa, kuten apoptoosiantigeenin Fas, proteiini C -sentromeerin ja erytroblastoosiviruksen E26 onkogeenin homologin transkriptiotekijä 1:n ( ETS1 ) kanssa. Koodatun proteiinin ytimessä se toimii tehokkaana transkription repressorina , joka sitoutuu SUMO-lyloituihin transkriptiotekijöihin. Sen tukahduttamista voidaan vähentää sitomalla tämä proteiini ydinelinten tai tumasolujen promyeloidiseen leukemiaan . Tämä proteiini sitoutuu myös sentromeereihin G2 - faasissa . Sytoplasmassa koodattu proteiini voi toimia apoptoosin säätelijänä . Tämän proteiinin subsellulaarista lokalisointia ja toimintoja moduloidaan translaation jälkeisissä modifikaatioissa, mukaan lukien SUMO- laatio [ , fosforylaatio ja polyubiquitinaatio [4] .
Daxx ilmentyy tasaisesti koko kehossa, lukuun ottamatta kiveksiä ja kateenkorvaa , joilla on erityisen korkea proteiiniekspressio . Solutasolla Daxx löytyy sytoplasmasta vuorovaikutuksessa Fas-reseptoreiden tai muiden sytoplasmisten molekyylien kanssa, ja myös tumassa , jossa se on vuorovaikutuksessa joidenkin subnukleaaristen rakenteiden kanssa. Useita muita vuorovaikutuksessa olevia proteiineja tunnetaan, mutta tämän vuorovaikutuksen erityistä toimintaa ja merkitystä ei aina ymmärretä.
Kun PML-NB:t puuttuvat tai ne ovat tuhoutuneet, Daxx siirretään ja apoptoosia ei tapahdu. Tämä vuorovaikutus osoitettiin, kun PML-NB:n hajotetut solut prosessoitiin ja Daxx lokalisoitiin uudelleen PML-NB:llä. ATRX , heterokromatiinin sentromeerikomponentti, kolokalisoituu Daxx:n kanssa. Tämä kumppanuus löytyy ensisijaisesti solusyklin S-vaiheesta . Daxx-ekspression puute ei johda S-vaiheen toimintahäiriöön eikä estä kaksitumaisten solujen muodostumista. Toinen sentromeerikomponentti , CENP-C, liittyy Daxx:iin interfaasissa . Vaikka ensimmäistä Daxxia on kuvattu "kuoleman proteiiniksi", assosioinnin sentromeerikomponenttien kanssa oletetaan johtavan Daxxin erilaiseen toimintaan.
Fas-reseptorin stimulaatio indusoi Daxx :n siirtymisen tumasta sytoplasmaan . Glukoosin hajoaminen tuottaa reaktiivisia happilajeja ( ROS ). Ne indusoivat solunulkoisen Daxxin siirtymisen sytoplasmaan, minkä jälkeen yhdistyvät ASK1 :een (kinaasi 1:n apoptoosin säätelysignaali). Toinen Daxx-ulkoinen tuontimekanismi sisältää CRM1:n . Tämä kuljetusmekanismi riippuu fosforylaatiosta. Ei kuitenkaan tiedetä, stimuloiko Fas-reseptoria ROS-indusoitu ASK1:n yli-ilmentyminen vai välittämä CRM1- vienti .
Fas-stimulaation jälkeen Daxx aktivoituu ja sillä on roolinsa pro-apoptoottisena proteiinina N-terminaalisen c-Jun -kinaasireitin ( JNK ) aktivoinnissa. Tämä reitti säätelee normaalisti stressin aiheuttamaa solukuolemaa. Se on myös tärkeä ohjelmoidun solukuoleman kehittymiselle hermostossa. Varsinainen apoptoosiprosessi alkaa tämän reitin aktivoitumisen jälkeen. Daxx ei aktivoi itse JNK:ta, vaan pikemminkin ylävirran JNK-kinaasia, ASK1-kinaasia. Myös eräänlainen positiivinen palautejärjestelmä löydettiin; JNK aktivoi HIPK2 :n , mikä johtaa tuman Daxx:n siirtymiseen sytoplasmaan. Daxx puolestaan aktivoi ASK1:n.
TGF-β säätelee monia erilaisia solujen kehitysprosesseja, mukaan lukien kasvua, erilaistumista , proliferaatiota ja solukuolemaa. Daxx on vuorovaikutuksessa TGF-β tyypin II reseptorin kanssa sitoutumalla proteiinin C-terminaaliseen domeeniin. Kun soluja käsitellään TGF-β:lla, HIPK2:lla, tumakinaasilla, Daxx fosforyloituu ja aktivoitu Daxx puolestaan aktivoi JNK-reitin (katso kuva Daxx-reitti).
Glukoosin hajoaminen tuottaa ROS :a, joka johtaa Daxx:n tuotantoon ja uudelleensijoittumiseen, mikä aktivoi JNK-reitin; puolestaan. toinen induktori tuottaa Daxx:a altistuessaan UV-valolle. ASK1 kuljetetaan tumaan, kun UV-säteilyä käytetään solujen hoitoon. Vielä ei tiedetä, saako UV-säteily Daxxin sitoutumaan ASK1:een. Toinen Daxxin tärkeä solukuolemaominaisuus on sen yhteys PML-NB:n kanssa. Daxxin on havaittu liittyvän PML:ään vain, kun se altistuu korkealle oksidatiiviselle stressille tai UV-altistukselle. Toinen tutkimus osoitti Daxx-pro-apoptoottisen toiminnan menettämisen mutantilla ilman PML:ää.
Daxxin hämmästyttävä ominaisuus on sen apoptoottinen toiminta. Kun Daxx ei ilmene tai tuhoudu alkion kehityksen aikana, se johtaa varhaiseen kuolleisuuteen. Muut tutkimukset ovat osoittaneet, että Daxx -geenin puuttuminen aiheutti korkeamman apoptoottisen määrän alkion kantasoluissa . Vain Daxxin sitoutuminen PML:ään johtaa apoptoosin lisääntymiseen ; oletetaan, että siihen liittyvä sytoplasminen Daxx näyttelee anti-apoptoottisen molekyylin roolia.
Daxxin läsnäolo solutumassa viittaa siihen, että proteiini voi toimia myös transkriptiotekijänä . Vaikka se ei sisällä mitään tunnettuja DNA :ta sitovia domeeneja , Daxx voi olla vuorovaikutuksessa useiden transkriptiotekijöiden, kuten p53 :n , p73 :n ja NF-kB :n, kanssa ja vaimentaa niitä . Transkriptiotekijöiden lisäksi Daxx voi estää tai estää myös muita proteiineja, kuten TGF-β-reitin säätelijä Smad4, mikä antaa Daxxille tärkeän roolin TGF-β-signalointissa.