Sisarkromatidin vaihto (SChO) on segmenttien vaihtoa saman kromosomin sisarkromatidien välillä . Vaihtoprosessi tapahtuu solusyklin S-vaiheen aikana homologisella rekombinaatiolla sisarkromatidien välillä, samalla kun geneettinen informaatio pysyy muuttumattomana.
Sisarkromatidivaihdot havaitaan toisen solun jakautumisen metafaaseissa sen jälkeen, kun proliferoituviin soluihin on lisätty modifioituja nukleosideja , jotka fosforylaation jälkeen voivat integroitua DNA:han replikaation aikana. Tymidiinianalogeja, kuten 5-bromideoksiuridiinia tai 5-etynyylideoksiuridiinia , käytetään tyypillisesti sellaisina nukleosideina .
Amerikkalainen geneetikko J. Herbert Taylor näki sisarkromatidivaihdot ensimmäistä kertaa vuonna 1958 liljakasvin Bellevalia romana -kasvin juuren apikaalisoluissa [1] . Hän käytti tritiumleimattua tymidiiniä tymidiinin modifioituna analogina [2] .
Sisarkromatidivaihdot tapahtuvat spontaanisti, niiden keskimääräinen esiintymistiheys ihmisen lymfosyyteissä on normaalisti 3-4 per solu. Sisarkromatidivaihdon tiheys lisääntyy, kun se altistuu tekijöille, jotka aiheuttavat replikatiivista stressiä, DNA:n silloitumista tai replikaatiohaarukan tukkeutumista [3] . Bloomin oireyhtymää sairastavien potilaiden soluissa on havaittu lisääntynyttä sisarkromatidivaihtoa [4] .
Kaavioesitys sisarkromatidivaihdosta
Sisarkromatidivaihdot HeLa-soluissa
Sisarkromatidivaihdot ihmisen ESC :issä .
Kromatidien erilaisen värjäyksen saamiseksi soluja viljellään in vitro bromideoksiuridiinin läsnä ollessa kahden solusyklin ajan . Tämän seurauksena saadaan kromosomeja, joissa tymidiini yhdessä kromatidissa korvataan bromodeoksiuridiinilla molemmissa DNA-juosteissa ja sisarkromatidissa - vain yhdessä juosteesta. Sen jälkeen tällaisista soluista saatu metafaasikromosomien valmistus värjätään valolle herkistävällä fluoresoivalla väriaineella Hoechst33258 ja säteilytetään ultraviolettivalolla , mikä johtaa DNA:n valohajoamiseen [5] . Kromatidi, jossa tymidiini on substituoitunut molemmissa DNA-juosteissa, ei kykene sitomaan Giemsa -väriä ja pysyy vaaleana värjäytyessään, kun taas kromatidi, jossa bromodeoksiuridiinia on vain yhdessä DNA-juosteessa, pystyy värjäytymään normaalin kromatiinin tapaan ja muuttuu tummaksi, kun se värjätään. tahrattu. Tuloksena olevaa väriä kutsutaan sisarkromatidien differentiaaliväriksi [1] . Sisarkromatidien differentiaalista värjäystä kutsutaan joskus harlekiinivärjäykseksi .
Kromosomit | |||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Main | |||||||||||
Luokitus | |||||||||||
Rakenne |
| ||||||||||
Rakenneuudistus ja rikkomukset | |||||||||||
Kromosomaalisen sukupuolen määritys | |||||||||||
menetelmät |