Hepatiitti delta -virus

hepatiitti delta -virus
tieteellinen luokittelu
Ryhmä:Virukset [1]Valtakunta:RibozyviriaPerhe:KolmioviridaeSuku:DeltavirusNäytä:hepatiitti delta -virus
Kansainvälinen tieteellinen nimi
Deltavirus italia
Synonyymit
Hepatiitti delta virus HDV
Baltimore Group
V: (-)ssRNA-virukset
Systematiikka Wikispeciesissä Kuvahaku Wikimedia Commonsista NCBI   12475 EOL   539833

Delta-hepatiittivirus [2] tai hepatiitti D-virus [3] ( lat.  Deltavirus italiense ) on tartuntatauti, joka aiheuttaa hepatiitti D :n ihmisillä. Tarkkaan ottaen tämä pieni RNA:ta sisältävä tartuntatauti on satelliittivirus , koska se vaatii solujen infektoimista hepatiitti B -viruksella (HBV) , jotta se lisääntyy soluissa ja voi saada tartunnan. HDV käyttää hepatiitti B -viruksen ( HBsAg ) vaippaproteiineja genominsa pakkaamiseen [4] [5] .

Delta-hepatiittivirus kuvattiin alun perin potilaille, joilla on vakavampi hepatiitti B. Hepatiitti D -infektio voi ilmetä joko hepatiitti B -infektion yhteydessä ( yhteisinfektio ) tai kroonisen hepatiitti B:n päälle ( superinfektio ). Molemmissa tapauksissa potilailla on vakavampia oireita kuin pelkällä hepatiitti B:llä. Näihin kuuluvat muun muassa loppuvaiheen maksan vajaatoiminnan kehittyminen akuutin infektion seurauksena, maksakirroosin nopea kehittyminen ja kroonisten infektioiden tapauksessa , lisääntynyt hepatosellulaarisen karsinooman todennäköisyys [6] .

Hepatiitti delta -virus on ainutlaatuinen ihmisten ja eläinten patogeenien joukossa, koska sillä on useita yhteisiä ominaisuuksia sekä kasviviroidien [ 7] että kasvien viroideja muistuttavien satelliitti-RNA:iden kanssa. Tämä veren välityksellä leviävä patogeeni replikoituu maksassa ja voi aiheuttaa akuutin hepatiitin sekä kädellisillä että ei-kädellisillä nisäkkäillä (vaikka vain ihmiset ovat viruksen luonnollinen isäntä). Maailmanlaajuisesti yli 15 miljoonaa ihmistä on saanut delta-hepatiittiviruksen, mikä tekee siitä tärkeän kansanterveysongelman [5] .

Opiskeluhistoria

Delta-hepatiitti raportoitiin ensimmäisen kerran vuoden 1977 puolivälissä. Sen löysi Mario Rizzetto ja kollegat, jotka tutkivat ryhmää potilaita, jotka olivat saaneet B-hepatiittiviruksen tartunnan ja jotka kärsivät erityisen akuutista hepatiittimuodosta. Sitä on kuvattu B-hepatiittiviruksen uudeksi ydinantigeeniksi [8] ja se on nimetty delta-antigeeniksi (δ, HDAg) [9] . Myöhemmät simpansseilla tehdyt kokeet osoittivat, että delta-antigeeni oli itse asiassa patogeenin rakennuspalikka, joka vaati hepatiitti B -viruksen replikoitumista. 1980-luvulle asti delta-hepatiittivirusta ei pidetty tartunnan aiheuttajana. Kuitenkin pian sen jälkeen, kun hepatiitti delta -virus tunnistettiin taudinaiheuttajaksi, sille kehitettiin tehokkaita testejä. Lisäksi aloitettiin epidemiologisen tiedon kerääminen hepatiitti D:stä (se aloitettiin Etelä- Italiassa ) [10] . Hepatiittideltaviruksen genomi kloonattiin ja sekvensoitiin vuonna 1986 [11] [12] . Kansainvälinen virustaksonomiakomitea rekisteröi viruksen vuonna 1993, ja se sijoitettiin monotyyppiseen Deltavirus - sukuun [13] .

Evoluutio ja alkuperä

HDV:n luonnollinen isäntä on vain ihminen. Fylogeneettisten tutkimusten tiedot osoittavat hepatiitti delta -viruksen olevan afrikkalainen alkuperä [14] . HDV:lle on ominaista korkea geneettinen heterogeenisyys. Uskotaan, että HDV:n kehittymiseen on kolme päämekanismia: mutaatiot , editointi ja rekombinaatio . Mutaationopeus on eri arvioiden mukaan 3⋅10 -2 - 3⋅10 -3 substituutiota per genomi vuodessa. Se riippuu infektion vaiheesta (korkein akuutissa vaiheessa), genomin alueesta (korkea ei - konservoituneilla alueilla ja alhainen konservatiivisilla alueilla, esimerkiksi ribotsyymin alueella ) ja kasvaa terapeuttisen paineen myötä. HDV:n mutaationopeus on suurempi kuin useimpien RNA-virusten . Tästä mutaationopeudesta johtuen oletetaan, että HDV kiertää yhdessä tartunnan saaneessa isännässä useana kvasilajina [15] . On havaittu, että jopa 70 % vaihdoista voi johtua muokkaamisesta. Rekombinaatio HDV:ssä kuvattiin ensimmäisen kerran vuonna 1999; sitten pääteltiin, että se tapahtuu eri genotyyppien virusinfektion tapauksessa. Rekombinaatio tapahtuu homologisen rekombinaation polkua pitkin [16] . Oletetaan, että isäntäsolun RNA-polymeraasi osallistuu HDV:n rekombinaatioon [9] .

Aluksi kuvattiin 3 tämän viruksen genotyyppiä (I-III). Genotyyppi I on eristetty Euroopasta , Pohjois-Amerikasta , Afrikasta ja osista Aasiaa . Genotyyppi II löytyy Japanista , Taiwanista ja myös Jakutiasta . Genotyyppi III tunnetaan yksinomaan Etelä-Amerikassa ( Peru , Kolumbia ja Venezuela ). Nyt tiedetään, että hepatiittideltaviruksella on ainakin 8 genotyyppiä (HDV-1 - HDV-8). Kaikki ne HDV-1:tä lukuun ottamatta rajoittuvat tiukasti määritellyille maantieteellisille alueille. HDV-2 (aiemmin HDV-IIa) löydettiin Japanista, Taiwanista ja Jakutiasta; HDV-4 (HDV-IIb) Japanissa ja Taiwanissa; HDV-3 - Amazonin alueella; HDV-5, HDV-6, HDV-7 ja HDV-8 Afrikassa [17] .

Tällä hetkellä on olemassa kaksi pääteoriaa hepatiitti delta -viruksen alkuperästä. Heidän mukaansa HDV on peräisin kasviviroideista ja/tai isäntäsolun pre-mRNA- silmukoinnin . HDV-RNA:lla on yhteisiä rakenteellisia ja replikaatiopiirteitä kummankin tällä hetkellä tunnetun viroidiperheen ( Pospiviroidae ja Avsunviroidae ) kanssa . Pospiviroidaen kanssa tätä virusta yhdistää sauvan muotoinen RNA-rakenne ja replikaatio ytimessä , ja Avsunviroidaen kanssa ribotsyymin ja symmetrisen pyörivän renkaan replikaation  läsnäolo . Lisäksi HDV ja kasviviroidi-RNA ovat vuorovaikutuksessa homologisten soluproteiinien kanssa , ja vuoden 2012 kokeelliset tiedot (joskaan ei täysin vahvistettu) osoittavat, että HDV voi replikoitua ja lisääntyä sen jälkeen, kun se on viety tomaatin taimien lehtiin , mikä on toinen vahvistus HDV:n läheisyydestä. ja viroidit. Tämä hypoteesi ei kuitenkaan vastaa kysymykseen delta-antigeenin alkuperästä ja HDV:n suhteesta HBV:hen [9] .

Toinen teoria, joka voi täydentää ensimmäistä, on, että HDV on voinut syntyä isäntäsolun transkriptomista . Tätä näkemystä tukevat tutkimukset, jotka osoittavat, että ihmissolut sisältävät ribotsyymin ( CPEB3 -geenin intronissa ), joka on sekundaarirakenteeltaan ja biokemiallisilta ominaisuuksiltaan samanlainen kuin HDV-ribotsyymi . Ribotsyymejä, joissa oli pseudoknot-rakenneelementti, löydettiin kuitenkin myöhemmin kaikista elävien organismien valtakunnista arkeaa lukuun ottamatta ja myös hyönteisviruksista . Delta-antigeenin odotetaan myös olevan peräisin isäntäsolusta. Aluksi DIPA-proteiinia ( delta interacting protein A ) pidettiin delta-antigeenin mahdollisena esi-isänä . Vaikka näiden proteiinien ei myöhemmin havaittu olevan homologisia, DIPA voi olla vuorovaikutuksessa HDAg:n kanssa [9] .  

Integroitu malli viittaa siihen, että HDV on voinut syntyä viroidin kaltaisen elementin ja solun pre-mRNA/mRNA:n välisen rekombinaation seurauksena [9] .

Rakenne ja genomi

Hepatiittideltavirus on hiukkanen, jonka halkaisija on 35-37 nm ja joka on päällystetty hepatiitti B -viruksen (HBsAg) pinta-antigeeneillä, jonka tiheys on 1,25 g/cm³ cesiumkloridigradientissa ja jolle on tunnusomaista sedimentaatiokerroinarvo , joka on tyhjien välien keskiarvo . hepatiitti B -viruksen (HBV) hiukkaset, jotka koostuvat vain HBsAg:stä ja HBV- virionista . HDV-virioni koostuu kolmesta avainkomponentista: genomisesta RNA:sta, joka liittyy delta-antigeenimolekyyleihin ( nukleokapsidi ) ja ulompaan kapsidiin , joka koostuu hepatiitti B -pinta-antigeeneistä [9] . HDV-kuori sisältää lipidejä ja koostuu kolmen tyyppisistä HBV- glykoproteiineista : pienet eli S-HBsAg, medium tai M-HBsAg ja suuret eli L-HBsAg (noin 100 kopiota). Molemmissa viruksissa nämä proteiinit toimivat hepatosyyttien sisään ja niistä poistumisena [9] . HDV-infektoituneet solut muodostavat täysimittaisten viruspartikkelien lisäksi suuria määriä tyhjiä subviraalisia hiukkasia (SVP), joita edustavat halkaisijaltaan 25 nm olevat pallot ja 22 nm filamentit [18] .

HBV-vaippaproteiinien rooli

Kaikilla kolmella HBsAg-muodolla on yhteinen C-pää . Noin 50 % kunkin lajin HBsAg:stä käy läpi paikkaspesifisen N-glykosylaation [18] . S - domeenin lisäksi M-HBsAg sisältää N-terminaalisen hydrofiilisen PreS2-domeenin, ja L-HBsAg:ssa on PreS2:n lisäksi myös PreS1-domeeni. L-HBsAg tarvitaan, vaikkakaan ei riitä, hiukkasten kokoamiseen ja HBV- tarttuvuuden aikaansaamiseen ja S-HBsAg tarvitaan hiukkasten vapautumiseen solusta. M-antigeeni ei ole välttämätön kokoamiselle eikä tarttuvuudelle [19] . Toisin kuin HBV, HDV-kokoonpano vaatii vain S-HBsAg:n, mutta ilman L-HBsAg:ta hiukkaset ovat vailla tarttuvuutta. Nämä erot välttämättömissä proteiineissa selittyvät erilaisilla sitoutumisdomeeneilla HBV-nukleokapsidiin ja HDV - ribonukleoproteiiniin vaippaproteiinien sytosolisissa silmukoissa. Viimeaikaisten tietojen mukaan HDV-genotyypin HDV-1 kokoonpano (ja tarttuvuus) ei rajoitu vain yhteen HBV-genotyyppiin. Sitä voi esiintyä myös murmeli- , lepakon- ja villaapinoiden hepadnavirusten vaippaproteiinien läsnä ollessa [9] .

Viruksen RNA:t

HDV-virioni sisältää pyöreän genomin , jota edustaa negatiivisen polariteetin RNA , ja tämän RNA:n sekundaarirakenne sisältää kaksijuosteisia alueita [18] . Kun virus leviää infektoituneessa solussa, voidaan havaita kaksi muuta suurta viruksen RNA:ta: genomisen RNA:n kanssa komplementaarinen molekyyli (antigenominen RNA tai antigenomi) ja HDV - mRNA . HDV-genomin koko on vain 1672-1697 nukleotidia , mikä tekee siitä pienimmän tunnetuista nisäkäsviruksista ja tuo sen lähemmäksi kasviviroideja. Sillä on korkea GC-koostumus (60 %), ja molekyylinsisäisen emäsparin prosenttiosuus on 74 %, mikä mahdollistaa sen taittumisen sauvan muotoiseksi rakenteeksi. Tällaiset rakenteet ovat in vitro -olosuhteissa resistenttejä Dicer - entsyymin leikkaamiselle [7] . Infektoitunut solu voi sisältää noin 300 000 HDV-genomimolekyyliä, jotka ovat jakautuneet ytimen ja sytoplasman välillä , mikä osoittaa suurta replikaationopeutta. HDV:n antigenominen RNA on replikaatiosyklin välituote, se on komplementaarinen genomisen RNA:n kanssa (ja siksi sillä on positiivinen polariteetti) ja sisältää HDAg:tä koodaavan sekvenssin. Sen määrä on 5-22 kertaa pienempi kuin genomisen RNA:n, se esiintyy yksinomaan ytimessä, eikä siksi ole pakattu virioneihin. HDV-proteiinit transloidaan spesifisellä 800 nukleotidin pituisella mRNA:lla, jonka isäntäsolun DNA - riippuvainen RNA-polymeraasi II transkriptoi ja joka käy läpi samat kypsymisvaiheet (mukaan lukien capping ja polyadenylaatio ) kuin solun mRNA:t [9] .

Ribozyme

HDV:n genomisesta ja antigenomisesta RNA:sta löydettiin pieniä, noin 85 nukleotidin pituisia itsestään leikkaavia sekvenssejä. Nämä ribotsyymit , jotka osoittavat suurta sekvenssin säilymistä HDV-genotyyppien joukossa, ovat vastuussa replikaation tuottamien multimeeristen RNA-molekyylien leikkaamisesta. HDV-ribotsyymeillä on ainutlaatuiset rakenteelliset ja toiminnalliset ominaisuudet, jotka erottavat sen viroidisista ribotsyymeistä. Näistä ribotsyymeistä on saatu useita kiderakenteita, joiden ansiosta leikkausmekanismi on voitu kuvata pseudokosyytteihin perustuen. In vitro -olosuhteissa, kun läsnä on kaksiarvoisia metalli - ioneja , HDV-ribotsyymi leikataan tietyssä kohdassa transesteröintireaktion seurauksena, jolloin muodostuu 5'-OH ja 2'-, 3'-syklinen monofosfaatti [18] . Kuten edellä todettiin, isäntäsolugenomit sisältävät ribotsyymejä, jotka muistuttavat läheisesti HDV-ribotsyymiä [9] .

Delta-antigeeni

Osa delta-hepatiittiviruksen antigenomisesta RNA:sta muokataan replikaation aikana - spesifinen adenosiinitähde ( asemassa 1014) deaminoituu inosiiniksi . Tämän prosessin suorittaa soluentsyymi adenosiinideaminaasi (ADAR1), joka vaikuttaa RNA:han. Myöhemmän replikaation aikana modifioitu tähde muodostaa Watson-Crick-parin sytosiinin kanssa , ei uridiinin kanssa , minkä vuoksi alkuperäinen adenosiini kohdassa 1014 korvataan guanosiinilla . Editoinnin spesifisyys määräytyy todennäköisimmin hepatiittideltaviruksen RNA :n primääri- ja sekundaaristen rakenteiden perusteella [20] .

ADAR1:llä on kaksi isoformia  , pieni (ADAR1-S) ja suuri (ADAR1-L), joilla on sama C-pää. ADAR1-S on edustettuna laajemmin, se ilmentyy ja paikantuu jatkuvasti tumassa, kun taas ADAR1-L löytyy pääasiassa sytoplasmasta ja sen ilmentymistä stimuloi interferoni . ADAR1-L:n havaittiin olevan erittäin tehokas transkriptien muokkaamisessa sytoplasmassa, mutta HDV RNA:n muokkauksen osoitettiin myöhemmin tapahtuvan tumassa, ei sytoplasmassa, ja sitä välittää ADAR1-S, joka sijaitsee siellä. Kuitenkin tutkimukset vuosina 2004 ja 2006 osoittivat, että HDV-RNA:n tehostunut muokkaus interferonihoidon jälkeen saattaa johtua ADAR1-L:stä ADAR1-S:n sijaan [9] .

Muokkauksen seurauksena UAG- pysäytyskodoni , joka normaalisti täydentää avoimen lukukehyksen ja pysäyttää proteiinisynteesin 195. aminohappotähteen kohdalta, korvataan UGG-kodonilla, joka koodaa tryptofaania . Muokatut antigenomiset RNA:t replikaation aikana synnyttävät genomisia RNA:ita; RNA-polymeraasi II transkriptoi nämä genomiset RNA:t modifioiduiksi mRNA:iksi. Jopa 30 % hepatiitti delta -viruksen mRNA:sta sisältää muuttuneen lopetuskodonin. Näistä mRNA:ista syntetisoidaan pidempi peptidi , jossa on 214 aminohappotähdettä. Siten delta-hepatiittiviruksella on kaksi antigeenin muotoa: pieni, 195 aminohappotähdettä pitkä ja 24 kDa painava , ja suuri antigeeni, joka koostuu 214 aminohaposta ja jonka massa on 27 kDa . Kahden muodon N-päät ovat samat, erot ovat 19 aminohappotähteessä C-päässä [21] [20] . Molemmilla muodoilla on N-päässä bispiraalinen -motiivi , joka on välttämätön dimerisaatiolle . Delta-antigeenidimeereillä on runsaasti arginiinia sisältävä motiivi, joka mahdollistaa sen sitoutumisen viruksen RNA:han. L-HDAg:n pidennetyssä C-päässä on kuitenkin neljä ainutlaatuista kysteiinitähdettä , jotka ovat farnesylaation kohteita . Tämän translaation jälkeisen modifikaation jälkeen L-HDAg voi olla vuorovaikutuksessa HBV:n pintaproteiinien kanssa ja siten edistää uusien viruspartikkelien muodostumista [22] .

Sekä delta-antigeenin pienet että suuret muodot sisältävät tuman lokalisaatiosignaalin ja RNA:n sitoutumiskohdat. Joitakin delta-antigeenivuorovaikutuksia välittää N-päässä kierretty helix-motiivi [23] . Huolimatta aminohapposekvenssien 90-prosenttisesta samankaltaisuudesta, näillä kahdella muodolla on eri rooli virusinfektion kehittymisessä. Pientä delta-antigeenia tarvitaan viruksen RNA:n replikaatioon ja se toimii infektion alkuvaiheessa, kun taas suurta delta-antigeenia tarvitaan viruksen genomin pakkaamiseen ja se toimii myös viruksen RNA:n replikaation estäjänä. Koska delta-antigeenin kaksi muotoa ilmentyvät virusinfektion eri vaiheissa, RNA:n muokkausta on säädeltävä tiukasti. Tämän asetuksen mekanismeja ymmärretään tällä hetkellä huonosti [20] .

Ribonukleoproteiini

HDV:n genominen RNA sitoutuu HDAg:hen ja muodostaa ribonukleoproteiinin, jota on sekä viruspartikkeleissa että infektoiduissa soluissa. Tätä ribonukleoproteiinia ei tarvita vain virionien kokoamiseen, vaan myös HDV-RNA:n liikkumiseen ytimen ja sytoplasman välillä. Tämän ribonukleoproteiinin rakenne ja stoikiometria ovat kiistanalainen asia. Pioneeritutkimukset ovat osoittaneet, että virionissa genominen molekyyli liittyy 70 HDAg-molekyyliin, kun taas infektoituneiden solujen ytimessä sekä genominen että antigenominen RNA muodostavat ribonukleoproteiineja, joissa on 30 HDAg-molekyyliä. Lisätutkimukset osoittivat, että sekä virioneissa että infektoituneissa soluissa on 200 HDAg-molekyyliä genomimolekyyliä kohden. Nämä arvot ovat kuitenkin asettuneet kyseenalaiseksi viimeaikaisissa tutkimuksissa, joissa havaittiin, että delta-antigeenimolekyylit oligomeroituvat sitoutuessaan RNA:han; tämä on erityisen tärkeää ottaa huomioon, kun antigeenimolekyylien määrä RNA:ta kohti on pieni. Lisäksi HDAg:n genomiin sitoutumisen spesifisyys näyttää määräytyvän pikemminkin sen sekundaarirakenteen kuin sen primäärisen rakenteen perusteella [9] .

Elinkaari

Solujen tunkeutuminen

HDV-hematotropismi ja sen kyky replikoitua hepatosyyteissä liittyvät yhteisinfektioon jälkimmäisen HBV:n kanssa. Vaikka HDV-virionien kokoaminen vaatii HBV- pinnan glykoproteiinien ilmentymistä samassa solussa, molempien virusten replikaation muut aspektit ovat täysin riippumattomia toisistaan. Toisin kuin HBV, joka vaatii maksaspesifisiä transkriptiotekijöitä , HDV:n replikaatiota voi tapahtua monissa erilaisissa nisäkässolutyypeissä , jos virusgenomi on aiemmin toimitettu näihin soluihin. Koska HBV:n ja HDV:n vaipan rakenne on hyvin samanlainen, voidaan olettaa, että kohdesoluun kiinnittymis- ja tunkeutumismekanismit ovat näille viruksille yhteisiä. Itse asiassa suurin osa tällä hetkellä saatavilla olevista tiedoista HBV:n soluun pääsyn mekanismeista on peräisin HDV-infektiomalleista [9] .

Molemmat virukset vaativat L-HBsAg:n tarttuvuutta varten. Spesifiset mutaatiot Pre-S1-domeenin 75 N-pään aminohappotähteessä tai myristoylaation esto voivat tehdä viruksesta infektoivan. S-HBsAg:n antigeeninen silmukkadomeeni ja sen glykosylaatiokuvio myötävaikuttavat myös infektiivisyyteen , koska tämän domeenin mutaatiot voivat tukahduttaa infektion kehittymisen PreS1-domeenista riippumatta [9] .

Päästäkseen soluun HBV:n ja HDV:n täytyy ensin kiinnittyä sen pintaan; tämä johtuu solujen proteoglykaaneista heparaanisulfaateista . HDV-partikkelien kiinnittyminen soluun lisääntyi yli 15-kertaiseksi käsittelyn jälkeen 4-5 % polyetyleeniglykolilla . HDV:n ja HBV:n kiinnittymiseen liittyviä spesifisiä heparaanisulfaatteja ei ole vielä tunnistettu, vaikka vuonna 2015 glypikaani-5 :n osoitettiin olevan tärkein tässä prosessissa . Kiinnittymisvaihe soluun on välttämätön, mutta ei riittävä infektion kehittymiselle; heparaanisulfaatteihin liittyvien virusten pääsy soluun voidaan silti estää. Lisäksi soluun kiinnittymisen jälkeen viruksen tunkeutuminen soluun on paljon hitaampaa. Esimerkiksi ihmisen primaaristen maksasolujen 3 tunnin vuorovaikutuksen jälkeen HDV:n kanssa yli puolet viruspartikkeleista jäi solun pinnalle ja olivat siksi herkkiä soluun pääsyä estävien estäjien vaikutukselle (esimerkiksi peptidi, joka vastaa PreS1-domeenin osaan L-HBsAg:n N-päässä) [24] . On osoitettu, että suramiini esti HDV:n ja HBV:n kiinnittymisen soluun , joten purinergiset reseptorit [9] voivat olla mukana kiinnittymisprosessissa .

Vuonna 2012 todettiin, että HBV:n ja HDV: n toiminnallinen reseptori on natriumtaurokloraatin kuljetuspeptidi (hNTCP, SLC10A1 -geenin koodaama ). NTCP sijaitsee hepatosyyttien basolateraalisessa kalvossa ja osallistuu sappisuolojen intrahepaattiseen liikkeeseen . Virusinfektiota näyttävät ylläpitävän aminohapot, jotka osallistuvat sappihapon sitomiseen (eikä natriumin sitoutumiseen). Vuorovaikutusta NTCP:n ja HBV/HDV:n välillä näyttää välittävän viruksen pintaproteiinien PreS1-domeenin 75 N-terminaalista aminohappotähdettä ja NTCP:n sitoutumiskohta, joka sijaitsee solukalvon ulkokerroksen helix 5:ssä . Koska HDV voi replikoitua monissa solutyypeissä (ei vain ihmisen maksasoluissa), jos sen genomi toimitetaan oikein soluun, siirtogeenisten hNTCP-hiirten on viime aikoina osoitettu kykenevän infektoimaan HDV:tä [9] .

Ydinkuljetus

HBV pääsee soluun klatriinista riippuvaisen endosytoosin kautta ja kulkee varhaisten ja myöhäisten endosomien läpi ilman, että happamoituminen ja proteaasiaktiivisuus vaikuttavat siihen . Tästä ei ole näyttöä HDV:lle, vaikka on osoitettu, että L-HDAg voi toimia vuorovaikutuksessa klatriinin kanssa. HDV-ribonukleoproteiinin tuman kuljetuksen vaiheita soluun pääsyn ja genomin vaipan irrottamisen jälkeen ei täysin ymmärretä. HDV:n ribonukleoproteiinin liikkuminen sytoplasman ja ytimen välillä voi tapahtua HDAg:n osallistuessa ja sen vuorovaikutuksessa importiinien kanssa [9] . Nuklekapsidi siirtyy tumaan delta-antigeenissä olevan tuman lokalisaatiosignaalin ansiosta [25] .

Replikaatio ja proteiinisynteesi

Replikaation aikana antigenominen RNA sijaitsee yksinomaan tumassa ja syntetisoituu ytimessä , kun taas nukleoplasmassa syntetisoidut genomiset RNA-molekyylit voivat siirtyä toiseen replikaatiosykliin ytimessä tai viedä sytoplasmaan uusien viruspartikkelien kokoamiseksi [9] [26] .

HDV kaksinkertaistuu RNA-riippuvaisella RNA-replikaatiolla kaksinkertaisessa pyörivässä rengasmekanismissa, joka sisältää solun DNA-riippuvaisia ​​RNA-polymeraaseja , jotka näyttävät muuttavan spesifisyyttään (DNA:sta RNA:ksi). Kaksinkertaisen rullaavan renkaan replikaation mekanismi on samanlainen kuin symmetrinen rullarengasreplikaatio viroideissa, mutta sisältää mRNA-synteesin vaiheen. Se perustuu kahteen ympyränmuotoiseen RNA-templaattiin, joilla on eri polariteetti (genomi ja antigeeni), ja se sisältää multimeeristen lineaaristen transkriptien muodostumisen välituotteina [9] .

HDV RNA:n replikaatioon tarvitaan kolme entsymaattista aktiivisuutta:

• polymeraasiaktiivisuus oligomeeristen ketjujen syntetisoimiseksi ympyrämatriiseilla, lisäksi ensimmäisessä vaiheessa antigenomi syntetisoidaan genomisella matriisilla, ja toisessa vaiheessa antigeeni toimii matriisina genomisynteesiä varten;
• ribotsyymistä riippuvainen RNaasi - aktiivisuus näiden ketjujen leikkaamiseksi monomeereiksi;
• ligaasiaktiivisuus monomeerien sulkemiseksi renkaaksi [9] .

Toisin kuin joillakin RNA-viruksilla, joilla on suurempi genomi, HDV:llä ei ole omaa RNA-riippuvaista RNA-polymeraasia. Lisäksi, toisin kuin muut satelliittivirukset, HDV ei käytä auttajaviruksen (eli viruksen, joka voi muodostaa HDV-virioneja vain sen läsnä ollessa) polymeraasia, ja siksi se on täysin riippuvainen isäntäsolun entsyymeistä . On olemassa näyttöä siitä, että RNA-polymeraasi II osallistuu HDV:n replikaatioon . Ensinnäkin HDV-mRNA:illa on kansi 5'-päässä ja poly(A)-häntä 3'-päässä, kuten solun mRNA:illa; toiseksi HDV RNA:n transkriptio suppressoi pienillä annoksilla a-amanitiinia  , joka on RNA-polymeraasi II :n estäjä ; lopuksi RNA-polymeraasi II voi sitoutua sekä genomiseen että antigenomiseen HDV-RNA:han. On näyttöä siitä, että antigenomisen RNA:n synteesi osoittaa jonkin verran resistenssiä a-amanitiinille, joten on mahdollista, että RNA-polymeraasi I osallistuu myös transkriptioon . On osoitettu, että sekä RNA-polymeraasi I että RNA-polymeraasi III voivat olla vuorovaikutuksessa HDV-RNA:n kanssa, ja genomin ja antigenomin synteesi voi tapahtua ytimen eri alueilla [27] [9] .

Yksi eroista tämän viruksen genomisen RNA:n transkription ja replikaation välillä on käytetyissä entsyymeissä. Lisäksi transkription ja replikaation on osoitettu alkavan eri kohdista ja siksi käyttävät erilaisia ​​RNA-polymeraaseja. Lisäksi genomin replikaatiosta vastaava mekanismi ei tunnista katkaisu/polyadenylaatiosignaalia, jota tarvitaan mRNA:n 3'-pään kypsymiseen. Tiedetään, että RNA-polymeraasi I, joka transkriptoi rRNA -geenejä solussa , ei ole vuorovaikutuksessa RNA-polymeraasi II -transkriptien leikkaamiseen ja polyadenylaatioon osallistuvien solutekijöiden kanssa. Tämä saattaa selittää sen tosiasian, että multimeeriset antigenomiset RNA:t, jotka ovat seurausta pyörivän renkaan replikaatiosta käyttämällä genomista RNA:ta templaattina, eivät lohkea polyadenylaatiosignaalissa [27] .

Koetietojen vaihtoehtoisen tulkinnan mukaan RNA-polymeraasi II:ta käytetään sekä replikaatioon että transkriptioon. Tämä malli viittaa siihen, että solujen leikkaustekijät eivät tunnista polyadenylaatiosignaalia kaikissa tapauksissa, mikä tekee mahdolliseksi syntetisoida sekä multimeerisiä antigenomitemplaatteja että 800 nukleotidin mRNA:ta käyttämällä samaa solu-RNA-polymeraasia. Tämä malli ei kuitenkaan selitä antigenomisten templaattien synteesin epäherkkyyttä a-amanitiinille [20] .

Vaikka yksittäisten polymeraasien spesifinen rooli HDV-replikaatiossa on vielä selvittämättä, on selvää, että HDV pystyy saattamaan DNA-riippuvaisen RNA-polymeraasin toimimaan RNA:n kanssa. Tämän vaihdon mekanismit ovat suurelta osin epäselviä. Todennäköisesti S-HDAg osallistuu RNA-polymeraasi II:n spesifisyyden vaihtamiseen. Se voi sitoutua RNA-polymeraasi II:een ja tehostaa transkriptiota joko suoraan stimuloimalla elongaatiota tai neutraloimalla estäviä vaikutuksia. Lisäksi se on biokemiallisesti vuorovaikutuksessa RNA-polymeraasi II :n 12 alayksikön yhdeksän kanssa. Ehkä tämä vuorovaikutus ei rajoitu pelkästään RNA-polymeraasi II:een, koska S-HDAg on vuorovaikutuksessa ja/tai kolokalisoituu nukleolaaristen proteiinien (mukaan lukien nukleofosmiinin ja nukleoliinin ) kanssa, mikä voi toimia lisävahvistuksena RNA-polymeraasi I:n osallistumisesta HDV-replikaatioon [9] . On myös mahdollista, että DNA-riippuvainen entsyymi toimii genomisen RNA:n kanssa osittain kaksijuosteisen sauvamaisen rakenteensa vuoksi [27] .

HDV-mRNA:lla on yksi avoin lukukehys, joka koodaa delta-antigeeniä [5] . Transkription aloituskohtien tai promoottorien läsnäolo HDV RNA:ssa on kiistanalainen asia. On osoitettu, että HDAg-mRNA:n 5'-terminaalinen alue osuu yhteen sauvan muotoisen genomisen RNA:n yhden pään kanssa, sillä on monimutkainen sekundaarirakenne ja sillä voi olla tärkeä rooli HDV:n replikaatiossa [9] .

Genomi- ja antigenomimolekyylit muodostetaan leikkaamalla lineaarisia poly- tai oligomeerisia esiasteita. Tämän leikkaamisen suorittaa ribotsyymi, joka on läsnä sekä genomissa että antigenomissa. Monomeerien sulkemiseksi renkaaksi (genomiksi tai antigeeniksi) ligaasiaktiivisuus on välttämätöntä. Vaikka jotkin tutkimukset ovat osoittaneet isäntäsolun osallistumisen tähän ligaasiin, koska HDV RNA:n ligaatio tapahtuu vain nisäkässoluissa, toinen tutkimus on osoittanut HDV:n ribotsyymisekvenssien kyvyn ligatoida itseensä [9] .

Virionien kokoonpano

HDV-virionin muodostumista varten HDV-ribonukleoproteiini on päällystettävä vähintään S- ja L-HBsAg:lla, joten HDV-partikkelien kokoaminen on mahdollista vain soluissa, joissa HBV on koinfektoitunut. HDV-hiukkasten kokoamisesta ja solusta vapautumisesta on monia vastaamattomia kysymyksiä. Toisin kuin HBV, joka vaatii HBsAg:n sytoplasman domeenin, mukaan lukien PreS1:n ja PreS2:n välisen liitoksen, vapauttaakseen hiukkasia, HDV ei. Tämän perusteella on ehdotettu, että HDV käyttää ensisijaisesti Golgi-laitteen vapautumisreittiä subviraalisille partikkeleille eikä multivesikulaarista kehoa, kuten HBV:tä. On mahdollista, että klatriini osallistuu HDV-virionien vientiin. HDV-ribonukleoproteiinin ympärille vaipan muodostumiseen tarvitaan L- HDAg :n C-terminaalisen alueen farnesylaatio, koska se säätelee vuorovaikutusta HBsAg:n S-alueen kanssa. Farnesylaatio sisältää 15 hiiliatomin ketjun kiinnittymisen C 211 XXQ-box-motiiviin, joka on läsnä L-HDAg:n C-päässä ja säilyy kaikkien HDV-genotyyppien joukossa [ 9] .

Vuorovaikutus solun proteiinien kanssa

HDV RNA on vuorovaikutuksessa eri isäntäsoluproteiinitekijöiden kanssa maksimoidakseen tarttuvuuden. Vuorovaikutus voi olla suoraa tai epäsuoraa HDAg:iden vuorovaikutuksen kautta niiden kanssa. HDAg voi läpikäydä erilaisia ​​translaation jälkeisiä modifikaatioita , mukaan lukien fosforylaatio , asetylaatio , metylaatio , sumoylaatio ja farnesylaatio, mikä mahdollistaa sen vuorovaikutuksen eri soluproteiinien kanssa ja säätelee viruksen tarttuvuutta. Mielenkiintoinen esimerkki on HDAg:n vuorovaikutus YY1 -transkriptiotekijän kanssa, joka indusoi CBP / p300 -kompleksin (kaksi bromodomaiinia sisältävää proteiinia) muodostumista ja siten tehostaa HDV:n replikaatiota [28] .

HDV:n elinkaaren eri vaiheisiin voi myös vaikuttaa RNA:n suora vuorovaikutus proteiinien kanssa. Glyseraldehydi-3-fosfaattidehydrogenaasi ( GADPH ) on entsyymi, joka osallistuu normaalisti glukoosiaineenvaihduntaan . Kuitenkin sen vuorovaikutus HDV:n genomisen tai antigenomisen RNA:n kanssa saa tämän proteiinin siirtymään tumaan ja lisää viruksen ribotsyymiaktiivisuutta. HDV-infektiossa GADPH näyttää toimivan molekyylikaperonina, puristaen viruksen RNA:n konformaatioon , joka sisältää kaksoispseudokosteon, ja siten tehostaen itseleikkausta [28] .

Toinen esimerkki HDV RNA:n suorasta vuorovaikutuksesta soluproteiinien kanssa on kaikkien kolmen HDV RNA:n vuorovaikutus PKR  :n kanssa, kinaasin kanssa , joka aktivoi erilaisia ​​solutekijöitä, mukaan lukien eIF2a  , joka on tärkeä tekijä translaation esialoituskompleksissa. , jolla on tärkeä rooli synnynnäisessä immuniteetissa . Vuorovaikutus HDV-RNA:n kanssa aktivoi PKR:n, vaikka tämä proteiini on yleensä vuorovaikutuksessa kaksijuosteisten mutta ei yksijuosteisten RNA:iden kanssa. Ehkä HDV-RNA:n sisältämät kaksijuosteiset alueet ovat riittäviä tähän vuorovaikutukseen. Alla olevassa taulukossa luetellaan muut soluproteiinit (muut kuin edellä mainitut RNA-polymeraasit), joiden kanssa HDV on vuorovaikutuksessa [28] .

Yhteys sairauksiin

Ihmisillä HDV aiheuttaa vakavan maksasairauden nimeltä hepatiitti D. Hepatiitti D:n oireet ovat samat kuin hepatiitti B:n, mutta ne ovat paljon vakavampia. Lisäksi hepatiitti D:tä sairastavilla ihmisillä on paljon suurempi riski sairastua maksakirroosiin . Taudin kulku voi riippua delta-hepatiittiviruksen genotyypistä : genotyypin 1 viruksen aiheuttamalle infektiolle on tyypillistä vakavampi kulku kuin genotyyppien 2 ja 4 virusten aiheuttamille. Lisäksi delta -viruksen proteiinit hepatiittivirus voi aiheuttaa muutoksia maksasolujen proteomissa , jotka edistävät niiden pahanlaatuista transformaatiota; näin ollen hepatiitti D voi olla maksasolusyövän taustalla [9] [29] . Lisäksi hepatiitti D :n hoito interferonilla johtaa usein kilpirauhasen toimintahäiriöihin [30] .

Delta-hepatiittiviruksen mahdollisuus osallistua autoimmuunimaksatautien , kuten Sjögrenin oireyhtymän, kehittymiseen on osoitettu [31] .

Kokeelliset mallit

Delta-hepatiittiviruksen löytämisen jälkeen sen jatkotutkimuksessa käytettiin sekä in vitro- että in vivo -malleja [9] .

In vitro

Kuten edellä mainittiin, HDV, toisin kuin HBV, voi replikoitua monissa erilaisissa nisäkässolutyypeissä, jos virusgenomi toimitetaan niihin, eikä vain hepatosyyteissä. Useimmat viruksen replikaatiotutkimukset on suoritettu maksasolukarsinoomasolulinjojen (mukaan lukien Huh7 , HepG2 ) transfektion in vitro -malleissa . HBV-proteiineja tarvitaan kuitenkin viruspartikkelien kokoamiseen, joten usein suoritetaan yhteistransfektio HBV-pintaproteiineja koodaavien plasmidien kanssa [9] .

Viime aikoihin asti vain erilaistuneet primaariset ihmisen hepatosyytit (PHH), simpanssin tai tupai- hepatosyytit ja transformoimattomat HepaRG-solut ovat kyenneet infektoimaan HDV:tä. Näiden solujen kanssa työskentely oli kuitenkin erittäin vaikeaa, lisäksi kokeiden toistettavuudessa oli ongelmia. hNTCP:n tunnistaminen HDV-reseptoriksi on muuttanut tilannetta, koska se on mahdollistanut HDV:n tartuttamisen toimivampia soluja [9] .

In vivo

Vaikka delta-hepatiittiviruksen luonnollinen isäntä on ihminen, jotkut nisäkkäät ovat myös herkkiä tälle virukselle. HDV:tä on tutkittu laajasti simpansseilla käyttämällä HBV:tä auttajaviruksena, sekä murmeleilla ( murmelihepadnavirusta käytettiin auttajaviruksena ). Lisäksi HDV:n tutkimiseen on käytetty HBV- herkkää malaijilaista tupayaa , villaapinoita ja viime aikoina lepakoita. Tähän mennessä on kehitetty erilaisia ​​hiirimalleja HDV:n tutkimiseen [9] .

Käyttö

Hepatiittiviruksen deltaribotsyymiä käytetään luomaan keinotekoisia säätelyelementtejä, jotka moduloivat geenien ilmentymistä. Esimerkiksi MAP4K4 -geenin ilmentymisen säätelemiseksi allosteerisesti säädellystä HDV-ribotsyymistä luotiin rakenne, jossa oli upotettu teofylliiniaptameeri , joka yhdessä primaarisen mikroRNA :n kanssa voi hiljentää MAP4K4 -geenin maksasoluissa RNA-tasolla. RNA-interferenssin kautta [32] .

Muistiinpanot

1. ↑ Virusten taksonomia  Kansainvälisen virustaksonomian komitean (ICTV) verkkosivustolla .
2. ↑ Abdurakhmanov D. T. Krooninen delta-hepatiitti: kliiniset ja morfologiset ominaisuudet, kulku ja tulokset  // Ros. ja. gastroenteroli, hepatoli, koloproktoli. - 2004. - T. 14 , nro 4 . - S. 14-17 .
3. ↑ Atlas of Medical Microbiology, Virology and Immunology / Toim. A. A. Vorobieva, A. S. Bykova. - M . : Medical Information Agency, 2003. - S.  131 . — ISBN 5-89481-136-8 .
4. ↑ Human and Medical Virology, 2010 , s. 122.
5. ↑ 1 2 3 Acheson, 2011 , s. 383.
6. ↑ Fattovich G. , Giustina G. , Christensen E. , Pantalena M. , Zagni I. , Realdi G. , Schalm SW Hepatiittideltavirusinfektion vaikutus sairastumiseen ja kuolleisuuteen kompensoidussa kirroosissa tyyppi B. The European Concerted Action on Viral Hepatitis (Eurohep).  (englanniksi)  // Gut. - 2000. - Voi. 46, nro. 3 . - s. 420-426. — PMID 10673308 .
7. ↑ 1 2 Flores R. , Owens RA , Taylor J. Patogeneesi subviraalisten tekijöiden toimesta: viroidit ja hepatiitti deltavirus.  (englanti)  // Virologian nykyinen mielipide. - 2016. - Vol. 17. - s. 87-94. - doi : 10.1016/j.coviro.2016.01.022 . — PMID 26897654 .
8. ↑ Rizzetto M. , Canese MG , Aricò S. , Crivelli O. , Trepo C. , Bonino F. , Verme G. Hepatiitti B-virukseen liittyvän uuden antigeeni-vasta-ainejärjestelmän (delta/anti-delta) immunofluoresenssidetektio maksassa ja HBsAg-kantajien seerumissa.  (englanniksi)  // Gut. - 1977. - Voi. 18, ei. 12 . - s. 997-1003. — PMID 75123 .
9. ↑ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Alfaiate D. , Hepatitis delta virus ja  Durantel D. P. nykyisten ja tutkittavien hoitovaihtoehtojen näkökohdat. (englanniksi)  // Antiviraalinen tutkimus. - 2015. - Vol. 122. - s. 112-129. - doi : 10.1016/j.antiviral.2015.08.009 . — PMID 26275800 .
10. ↑ Human and Medical Virology, 2010 , s. 124.
11. ↑ Wang KS , Choo QL , Weiner AJ , Ou JH , Najarian RC , Thayer RM , Mullenbach GT , Denniston KJ , Gerin JL , Houghton M. Hepatiittidelta (delta) -viruksen genomin rakenne, sekvenssi ja ilmentyminen.  (englanniksi)  // Luonto. - 1986. - Voi. 323, nro 6088 . - s. 508-514. - doi : 10.1038/323508a0 . — PMID 3762705 .
12. ↑ Fauquet CM, Mayo MA, Maniloff J., Desselberger U., Ball LA Deltavirus  (määrittämätön)  // Kansainvälisen virustaksonomian komitean kahdeksan raporttia. Lontoo. - 2005. - S. 735-738 .
13. ↑ Vuonna 1993 ratifioidut uudet taksonit  : [ fin. ] // Arch Virol. — Koodi: [1993.02V]. - 1993. - Voi. 133. - s. 491-495.
14. ↑ Radjef N. , Gordien E. , Ivaniushina V. , Gault E. , Anaïs P. , Drugan T. , Trinchet JC , Roulot D. , Tamby M. , Milinkovitch MC , Dény P. Molekyylifylogeneettiset analyysit osoittavat laajan ja vanhan afrikkalaisen hepatiitti-deltaviruksen säteilyä, mikä viittaa deltavirussukuun, jossa on vähintään seitsemän suurta kladia.  (Englanti)  // Virologian lehti. - 2004. - Voi. 78, nro. 5 . - P. 2537-2544. — PMID 14963156 .
15. ↑ Fields, 2013 , s. 2227.
16. ↑ Lin CC , Lee CC , Lin SH , Huang PJ , Li HP , Chang YS , Tang P. , Chao M. RNA-rekombinaatio deltahepatiittiviruksessa: Uuden luonnollisesti esiintyvän rekombinantin tunnistaminen.  (Englanti)  // Mikrobiologian, immunologian ja infektioiden lehti = Weimian yu gan ran za zhi. - 2015. - doi : 10.1016/j.jmii.2015.10.013 . — PMID 26757847 .
17. ↑ Le Gal F. , Gault E. , Ripault MP , Serpaggi J. , Trinchet JC , Gordien E. , Dény P. Kahdeksas pääryhmä hepatiittideltavirukselle.  (englanniksi)  // Uudet tartuntataudit. - 2006. - Voi. 12, ei. 9 . - s. 1447-1450. - doi : 10.3201/eid1209.060112 . — PMID 17073101 .
18. ↑ 1 2 3 4 Kentät, 2013 , s. 2223.
19. ↑ Fields, 2013 , s. 2226.
20. ↑ 1 2 3 4 Acheson, 2011 , s. 384.
21. ↑ Weiner AJ , Choo QL , Wang KS , Govindarajan S. , Redeker AG , Gerin JL , Houghton M. Hepatiittideltaviruksen yksi antigenominen avoin lukukehys koodaa sekä hepatiitti delta -antigeenipolypeptidien p24 delta että p27 epitooppia (epitooppeja) delta.  (Englanti)  // Virologian lehti. - 1988. - Voi. 62, nro. 2 . - s. 594-599. — PMID 2447291 .
22. ↑ Fields, 2013 , s. 2225.
23. ↑ Zuccola HJ , Rozzelle JE , Lemon SM , Erickson BW , Hogle JM Hepatiittidelta-antigeenin oligomerisaation rakenteellinen perusta.  (Englanti)  // Rakenne (Lontoo, Englanti: 1993). - 1998. - Voi. 6, ei. 7 . - s. 821-830. — PMID 9687364 .
24. ↑ Fields, 2013 , s. 2224.
25. ↑ Xia YP , Yeh CT , Ou JH , Lai MM Hepatiittidelta-antigeenin ydinkohdistussignaalin karakterisointi: ydinkuljetus proteiinikompleksina.  (Englanti)  // Virologian lehti. - 1992. - Voi. 66, nro. 2 . - s. 914-921. — PMID 1731113 .
26. ↑ Li YJ , Macnaughton T. , Gao L. , Lai MM Hepatiittideltaviruksen RNA-temploitu replikaatio: genomiset ja antigenomiset RNA:t liittyvät erilaisiin tumakappaleisiin.  (Englanti)  // Virologian lehti. - 2006. - Voi. 80, ei. 13 . - P. 6478-6486. - doi : 10.1128/JVI.02650-05 . — PMID 16775335 .
27. ↑ 1 2 3 Acheson, 2011 , s. 383-384.
28. ↑ 1 2 3 Katsarou K. , Rao AL , Tsagris M. , Kalantidis K. Infectious long non-coding RNAs.  (englanniksi)  // Biochimie. - 2015. - doi : 10.1016/j.biochi.2015.05.005 . — PMID 25986218 .
29. ↑ Shirvani-Dastgerdi E. , Schwartz RE , Ploss A. Hepatiitti B-, delta- ja C-viruksiin liittyvä hepatokarsinogeneesi.  (englanti)  // Virologian nykyinen mielipide. - 2016. - Vol. 20. - s. 1-10. - doi : 10.1016/j.coviro.2016.07.009 . — PMID 27504999 .
30. ↑ Suvak B. , Dulger AC , Aykaç MC , Gonullu H. , Gonullu E. Delta-hepatiittiin liittyvä kilpirauhassairaus: ainutlaatuinen ilmiö.  (englanti)  // Przeglad gastroenterologiczny. - 2015. - Vol. 10, ei. 3 . - s. 169-172. - doi : 10.5114/pg.2015.49687 . — PMID 26516384 .
31. ↑ Weller ML , Gardener MR , Bogus ZC , Smith MA , Astorri E. , Michael DG , Michael DA , Zheng C. , Burbelo PD , Lai Z. , Wilson PA , Swaim W. , Handelman B. , Afione SA , Bombardieri M . , Chiorini JA -hepatiittideltavirus , joka on havaittu Sjögrenin oireyhtymän potilaiden sylkirauhasista ja toistaa Sjögrenin oireyhtymän kaltaisen fenotyypin in vivo .  (englanniksi)  // Patogeenit ja immuniteetti. - 2016. - Vol. 1, ei. 1 . - s. 12-40. — PMID 27294212 .
32. ↑ Cheng H. , Zhang Y. , Wang H. , Sun N. , Liu M. , Chen H. , Pei R. MAP4K4-geenin ilmentymisen säätely RNA-interferenssillä muokatun teofylliiniriippuvaisen hepatiittideltaviruksen ribotsyymikytkimen kautta.  (englanti)  // Molecular bioSystems. - 2016. - Vol. 12, ei. 11 . - s. 3370-3376. doi : 10.1039 / c6mb00540c . — PMID 27754501 .

Kirjallisuus

• Fields Virology / Päätoimittajat David M. Knipe, Peter M. Howley. - Kuudes painos. - Philadelphia, USA: Lippincott Williams & Wilkins, 2013. - 2582 s. — ISBN 978-1-4511-0563-6 .
• Nicholas H. Acheson. Molekyylivirologian perusteet . - 2. painos .. - WILEY (John Wiley & Sons, Inc.), 2011. - S.  379 -383. — 528 s. - ISBN 978-0-470-90059-8 .
• Desk Encyclopedia of Human and Medical Virology / Päätoimittajat Brian WJ Mahy, Marc HV van Regenmortel. - Elsevier Ltd., 2010. - 661 s. — ISBN 978-0-12-375147-8 .